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UROCULTIVO

Urocultivo
Es

el anlisis que se le realiza a la


orina para detectar con exactitud y
precisin cual es el agente
microbiano que esta causando una
infeccin en un organismo

La
Es

orina

un liquido biolgico considerado


estril debido a su vaciado
constante y su pH cido que inhibe
el desarrollo de algunos
microorganismos

INDICACIONES PARA TOMA DE MUESTRA


La orina es tomada por el paciente en su domicilio
con previo aseo general, haciendo nfasis en los
rganos genitales externos.
La orina se recolecta en un frasco estril.
No requiere ayuno
No beber agua en exceso antes de la recoleccin
de la muestra (al menos 4 horas antes).
No estar bajo tratamiento con antibiticos o tener
menos de 72 hrs. antes de recoleccin de muestra.
No colocarse medicamentos tpicos (pomada
ungentos o talco), en la regin genital, 72 hrs
antes de la recoleccin de muestra.
Muestras etiquetadas, nombre y apellido completo,
edad, sexo

INDICACIONES DE TOMA DE
MUESTRA
Paciente

peditrico se recomienda la toma de


muestra en el laboratorio, en los nios tambin se
asean los rganos genitales externos y regiones
vecinas, se aplica despus el dispositivo de
Machuca o bolsas de plstico adhesivas.
Paciente femenino no estar en menstruacin, esta
en este periodo deber esperar das despus del
termino del periodo para la recoleccin de la
muestra.
Paciente con sonda vesical se recomienda que el
medico tome la muestra.
El urocultivo debe hacerse, dentro de la hora
siguiente a la recoleccin de la orina, o bien si esto
no es posible, debe guardarse la orina en el
refrigerador a 4C hasta que pueda cultivarse, sin
exceder de algunas horas.

TOMA DE MUESTRA
Una

vez que se empieza a orinar, se


desecha la primera orina que
arrastrar los organismos
contaminantes.
Se interrumpe el paso de la orina
para recoger el frasco estril y
recolectar la porcin media de la
muestra.
Y por ultimo se desecha el resto de
la orina.

INFECCIN DE VAS
URINARIAS
Pielonefritis
Vas urinarias altas
Riones
Urteres

Vas urinarias bajas


Vejiga
Uretra

Fiebre
Dolor lumbar
Disuria (ardor al orinar).
Polaquiuria (ir mucho al
bao).
Tenesmo (dificultada
para orinar).

Cistitis

Disuria
Dolor

MICROORGANISMOS OBSERVADOS
Organismos

que son uropatgenos reconocidos y


crecen bien en medios de rutina en 24 hrs: Estos
incluyen E.coli, Klebsiella pneumoniae, Proteus mirabilis, y
Pseudomona aeruginosa. Estos patgenos constituyen la
causa del 80% de los bacilos gram negativos aislados.
Enterobacter y Citrobacter son tambin comnmente
aislados. Enterococcus, Staphylococcus saprophyticus,
Staphylococcus aureus y Streptococcus agalactiae son los
gram positivos ms frecuentemente aislados.

Organismos

que son uropatgenos reconocidos y no


crecen en medios de rutina: Mycobacterium
tuberculosis, Chlamidia trachomatis, Neisseriae
gonorrhoeae se desarrollla.

Organismos que pueden ser uropatgenos, pueden requerir


medios especiales y ms de 24 hrs: Corynebacterium
urealyticum, Corynebacterium seminale stos se desarrollan en
A.Sangre CNA.; Haemophylus influenzae, H. parainfluenzae, estos
de desarrollan en A. chocolate Gardenella vaginalis en altos
recuentos se ha asociado a UTI ste se desarrolla en Human Blood
Agar. Todos estos medios especiales deben incubarse por 48 hrs. En
CO2.
Organismos que no son uropatgenos pero pueden aislarse
de uretra y orina: Gran variedad de grmenes colonizan la
uretra y el rea genitourinaria, estos incluyen anaerobios,
Actinomyces spp, Lactobacillus, Streptococcos alfa-hemolticos,
Staphylococcos coag-negativa, y pequeos nmeros de gram
negativos.

MTODOS
Mtodo

de conteo en placa o recuento de colonias (Mtodo


de Kass):

Se

homogeniza la muestra mediante agitacin.


Se diluye la muestra al 1:100, colocando 0.1ml de orina en 9.9ml
de caldo tripticasa o de suero fisiolgico estril.
Se preparan diluciones de 1:1000 y 1:10 000 a partir de la dilucin
1:100.
Se deposita 1ml de cada dilucin en placas petri estriles que
contienen agar Tripticasa o medio CLED, Mediante rotacin suave
se favorece la distribucin homognea de la siembra.
Se incuban todas las muestras a 37 0C de 24 a 48 horas.
Para calcular el nmero de colonias se eligen las placas que
contengan de 30 a 300 colonias. Contadas estas basta multiplicar
su nmero por la dilucin respectiva para obtener la cuenta total.

Mtodo

del asa calibrada:


Esta estimacin cuantitativa
consiste en sembrar una
placa con medio de agar
sangre en una muestra de
orina,
sin
centrifugar,
empleando un asa de platino
calibrada
(4mm.
De
dimetro).
Despus
de
incubar las muestras a 370C
durante 24 a 48 horas, se
cuenta el nmero de colonias
desarrolladas y el resultado
se multiplica por 100, ya que
el asa de platino contiene
0.01ml de orina.

Leucocitos
Eritrocitos
Clulas Epiteliales
Bacterias

INOCULACIN
Usar

el asa calibrada,
flamear, dejar enfriar,
mantener en posicin
vertical
introducir
solo el aro debajo
del nivel
de la
orina previa mezcla
de
la
orina
sin
centrifugar.

Mtodo para introducir el


asa calibrada

Estriar

Estriar

en la placas de cultivo de la siguiente manera:

de arriba hacia el centro de la placa y estriar la orina en una


serie de pasos de ngulo de 90 a travs del inculo

Sin flamear el asa estriar


atravesndola lnea del inoculo
en el sentido de las flechas.
Incubacin
Una vez sembradas las placas deben
incubarse durante 24 horas a 35 - 37
C.

ETIOLOGIA DE LAS INFECCIONES


DE VIAS URINARIAS
1.
2.
3.
4.
5.
6.

Escherichia Coli (80% al 90% de los casos)


Proteus sp.
Klebsiella sp.
Pseudonoma auruginosa
Enterobacter sp.
Staphylococcus saprophyticus

ESTIMACIN CUANTITATIVA DE LAS


COLONIAS

La siembra en las placas se realiza por estra cruzada


con asas calibradas de 4 mm de diametro y 0.01 ml de
capacidad.
Criterio

Colonias por ml.

Contaminacin

<10 000

Sospecha de infeccin

10 000 - 100 000

Infeccin

>100 000

*Hay casos de pielonefritis en los que el nmero de


bacterias es menor de 100 000 en un mililitro de
orina. Esos casos se presentan cuando un volumen de
orina es muy grande y por lo tanto disminuye la
concentracin de bacterias en la unidad de volumen.

MTODOS CUALITATIVOS
Se

usan para identificar que


microorganismos es el causante
de la enfermedad, se usan medios
de cultivo tanto enriquecidos como
selectivos.

AGAR GELOSA SANGRE

Dada la excelente base nutritiva, permite el


crecimiento
de
prcticamente
todos
los
microorganismos que pudieran estar presentes.
Si se aade sangre se pueden determinar las
distintas formas de hemlisis que pudieran tener
lugar.

AGAR GELOSA CHOCOLATE

El Agar Gelosa Chocolate es un medio utilizado


con varios suplementos para el aislamiento y
cultivo de Neisseria gonorrhoeae y otros
microorganismos fastidiosos. La hemoglobina al
2% provee la hemina (Factor X) requerida para el
crecimiento de Haemophilus y mejorar el
desarrollo de Neisseria, as como suplementos
(disponibles
comercialmente)
que
proveen
glutamina, cocarboxilasa, levadura, glutamina,
coenzimas, hemina, vitaminas, aminocidos,
dextrosa y otros factores de crecimiento, todos
ellos necesarios para el mejor desarrollo de
Haemophilus y Neisseria.

Haemophilus influenzae: Colonias pequeas,


hmedas, perladas con caracterstico olor
hmedo
Neisseria gonorrhoeae: Colonias pequeas
grisceas o incoloras, mucoides
Neisseria meningitidis :Colonias medianas a
grandes, de color azul grisceo, mucoides.
Streptococcus pneumoniae: Colonias pequeas,
planas, pueden aparecer verdes por la
decoloracin del medio.

MEDIO CLED

El Azul de Bromotimol cambia de color por la


fermentacin cida de la Lactosa. La Cistina
favorece el crecimiento de las Enterobactericeas
y el bajo contenido en electrolitos reduce la
difusin de Proteus. Las peptonas, el extracto de
carne y la Lactosa constituyen los elementos
nutrientes del medio.

E. coli en Agar CLED

AGAR MCCONKEY

El Agar MacConkey contiene cristal violeta y


sales biliares como inhibidores de organismos
Gram positivos. Las colonias aisladas de
bacterias que fermentan la lactosa son rosadas y
pueden estar rodeadas de una zona de
precipitado de sales biliares el cual es debido a
una cada en el pH por la fermentacin de la
Lactosa. Las colonias que no fermentan la lactosa
permanecen incoloras.

AGAR EOSINA Y AZUL DE METILENO


(EMB)
El uso de la eosina y del azul de metileno permite la
diferenciacin de las colonias fermentadoras de lactosa
de las no fermentadoras. La sacarosa est incluida en
el medio para detectar a los miembros del grupo
coliforme que fermentan ms rpidamente la sacarosa
que la lactosa.
Las
colonias de Salmonella y Shigella son
translcidas, de color mbar o incoloras. Los coliformes
que utilizan la lactosa y/o sacarosa producen colonias
de color azul a negro con centros obscuros y brillo
metlico. Otros coliformes como Enterobacter
presentan colonias mucosas de color rosa. Las cepas de
Enterococcus faecalis son parcialmente inhibidas.

AGAR BIGGY

El Extracto de Levadura, la Glicina y la Glucosa


constituyen los elementos nutritivos y energticos
necesarios para el crecimiento de las variedades
de Candida. El Sulfito Bismuto, que inhibe el
crecimiento de la flora secundaria, es reducido a
sulfuro por la accin del germen, dando lugar a
colonias pardas, que en algunos casos
determinan que, alrededor de la colonia, el medio
tambin presente el mismo color.