Universidad Autnoma de Baja

California
Facultad de Ingeniera, Arquitectura y
Diseo
Bioingeniera
Materia: Procesos Biotecnolgicos

Transgenic multivitamin
corn
through
Daniel Fernndez
Nolasco
biofortification of endosperm with three
vitamins representing three distinct
metabolic pathways
S h a i s t a N a q v i , C h a n g f u Z h u , G e m m a Fa r r e , Ko re e n
Ramessar, Ludovic Bassie, Jurgen Breitenbach,
D a r i o P e r e z , G a s p a r R o s , G a r h a r d S a n d m a n n , Te r e s a
Capell and Paul Christou

daniel.fernandez.nolasco@uabc.ed
u.mx

Desafos de la investigacin
Ms del 50% de la
poblacin padece
deficiencia de
vitaminas

Cultivos transgnicos
con mayor contenido
vitamnico

Solo ha sido posible

mejorar vitaminas
individualmente

Papa y Arroz -caroteno

Maz Rico en lisina
Lechuga Rica en hierro

La ausencia de Vitaminas refleja el

hecho de que las rutas metablicas
correspondientes estn ausentes,
truncadas o inhibidas en el
endosperma

Objetivo

Incrementar simultneamente los niveles de caroteno, ascorbato y folato en el endosperma de

una variedad sudafricana de maz blanco de lite
(M37W).

Tcnicas para el mejoramiento

QTL-Quantitative trait
locus

Ingeniera
multigentica

Locus cuya variacin de

sus alelos esta asociada a
un cambio cuantitativo.

Transferencia de ADN
directa por bombardeo
de partculas
Usa procesos fsicos
para lograr la
transformacin de
plantas de cultivo

Nmero de QTL que

afecten los niveles
vitamnicos
Impacto de cada QTL en
el fenotipo nutricional
Capacidad para localizar
cada QTL

No depende de
bacterias
No es limitado por tipo
de clula, especie o
genotipo

Metodologa y Resultados

Vectores de expresin y plantas transgnicas

Se transformaron embriones cigticos
inmaduros (10-14 das) de M37W
mediante bombardeo de partculas
metlicas recubiertas con las siguientes
casetes de expresin:
LMW Glutenina de trigo
HorP D-hordena de cebada
nos Nopalina sintasa
SSU S.U. pequea de rubisco de guisante
ADPGP Glucosa pirofosforilasa de arroz
Zmpsy1 Fitoeno sintasa
Pacrtl Fitoeno desaturasa de patgeno
OsdharDehidroascorbato reductasa
EcfolE GTP ciclohidrolasa de E.coli

Anlisis de elementos transformantes

PCR
Northern blot

75 plantas analizadas
PCR con 3 primers por cada gen

Los fragmentos de transgenes

pueden ser detectados por PCR
pero fallan al expresar un producto

Anlisis de niveles de -Caroteno en las

plantas trangnicas
Se obtuvo169 veces ms
la cantidad normal de Caroteno

Ruta metablica de produccin de Caroteno

Ruta metablica de la produccin de

ascorbato
La expresin del gen
dhar aument 6 veces
ms los niveles de
ascorbato

Ruta metablica de produccin de folato

La modificacin del maz
blanco aument al
doble la cantidad de
folato

Composicin de carotenoides y otros

elementos en M37W y L1-L6

Conclusiones
Se demostr que el maz transgnico puede ser
diseado para aumentar los productos de 3 rutas
metablicas distintas
Se lograron aumentar los niveles de carotenoides
excediendo por mucho los niveles logrados por
reproduccin convencional

Se alcanzaron niveles favorables de vitaminas de

acuerdo a la ingesta diaria recomendada, logrando
cubrir el total de -caroteno, una adecuada cantidad de
folato y 20% aprox. de la ingesta recomendada de
ascorbato.

GRACIAS