EL

MICROSCOPIO

Nombre: Marcos Gallardo

Risco.
Curso: 1 Anatoma
Patolgica.

INTRODUCCIN

El microscopio(de micro-pequeo, y
scopio-observar) es un instrumento
ptico muy utilizado en todo tipo de
laboratorios(clnicos, anatoma,) que
funciona por refraccin. Con l
podemos ver imgenes ampliadas de
objetos de reducido tamao(clulas) y
que los seres humanos NO somos
capaces de percibir a simple vista.

PUEDEN SER DE 2 TIPOS:

Microscopio simple o

Microscopio ptico compuesto

lupa
Formado por una sla lente
convergente
con poder
amplificador de imgenes

Formado por 2 sistemas de

lentes convergentes con poder
amplificador de imgenes: las
lentes objetivos y lentes oculares.

ESTE MICROSCOPIO COMPUESTO SE CLASIFICA EN:

MICROSCOPI
O
COMPUESTO
MICROSCOPIOS
PTICOS

1. Fluorescencia UV
2. Campo oscuro
3. Contraste de
fases
4. Invertido
5. Polarizado
6. Confocal

MICROSCOPIOS
ELECTRNICOS

1. De transmisin
2. De barrido
3. Otros tipos

ANTES DE EMPEZAR A EXPLICAR CADA UNO

DE LOS DIFERENTES TIPOS DE
MICROSCOPIOS, DECIR QUE TODOS ELLOS
PROCEDEN DEL MICROSCOPIO COMPUESTO
CON ALGN TIPO DE MODIFICACIN EN
ALGUNA DE SUS ESTRUCTURAS, TENIENDO
FUNCIONES MUY VARIOPINTAS Y SIENDO
UTILIZADOS PARA FINES MUY DIFERENTES.

1) MICROSCOPIO DE
FLUORESCENCIA
COMPONENTES
ESPECIALES:
FUENTE DE LUZ UV.
FILTRO DE EXCITACIN
(absorba las radiaciones
emitidas , dejando slo
la UV)
FILTRO DE BARRERA
(previene daos
retinianos causados x los
rayos UV)
FLUOROCROMOS

MICROSCOPIO FLUORESCENCIA ULTRAVIOLETA

Se diferencia del
microscopio compuesto
en que utiliza el rango
UV del espectro
luminoso (300-400
nm.) en lugar del rango
visible (aprox.670 nm.)
ya sea para aumentar la
resolucin o para
mejorar detalles
absorbiendo longitudes
de onda de dicha banda.

MICROSCOPIO FLUORESCENCIA ULTRAVIOLETA

Puesto que el
vidrio no
transmite la luz
ultravioleta, los
elementos pticos
de estos
microscopios estn
hechos con cuarzo o
fluorita, y la
iluminacin se
produce con
lmparas de

MICROSCOPIO FLUORESCENCIA ULTRAVIOLETA)

Puesto que la radiacin UV es

invisible al ojo humano, hay que
aadirle una sustancia marcadora
(fluorocromo) que tienen la
capacidad de ser excitados con luz UV,
emitiendo radiaciones visibles
percibidas como un cuerpo brillante.

IMGENES MICROSCOPIO FLUORESCENCIA

COMO SE
OBSERVARA?
La imagen se vera como
una muestra fluorescente
sobre un fondo oscuro.
PARA QUE SE UTILIZA?
Se utiliza en investigacin
cientfica (cuantificar ADN
o ARN de las clulas,
detectar c. nucleicos,
protenas que contienen
aminocidos, etc.)

IMGENES MICROSCOPIO
FLUORESCENCIA

2) MICROSCOPIO CAMPO OSCURO

COMPONENTES
ESPECIALES

FUENTE DE LUZ MUY

INTENSA.

CONDENSADOR
ESPECIAL (anillo de
campo oscuro).

MICROSCOPIO CAMPO OSCURO

Este tipo de
condensador hace llegar
la luz a la preparacin
oblicuamente, de forma
que slo pasa al
objetivo la luz que es
difundida por los
objetos en suspensin
que hay en la
preparacin, sin dejar
pasar la luz procedente
de la lmpara.

IMGENES MICROSCOPIO CAMPO

OSCURO

CMO SE
OBSERVARA?
El objeto observado
aparece intensamente
iluminado al dispersar la
luz , dispuesto sobre un
fondo oscuro.
PARA QU SE UTILIZA?
Para analizar elementos
biolgicos transparentes y
sin pigmentar, invisibles
con iluminacin normal y
sin fijar la muestra.

IMGENES MICROSCOPIO CAMPO

OSCURO

HEMATES

CLULAS EPITELIALES

3) MICROSCOPIO DE CONTRASTE DE FASES

COMPONENTES
ESPECIALES
Una lmina que
contiene un anillo
(anillo de fase) cuya
funcin es producir
un retardo/desfase de
la luz.

MICROSCOPIO DE CONTRASTE DE
FASES
En la microscopa de
contraste de fases se sita
un diafragma anular en
el condensador. Es un
diafragma especial que
proyecta un haz de luz
anular hacia la muestra.
Cuando este haz de luz
llega a la muestra, se
produce una difraccin
de una parte de los rayos.

MICROSCOPIO DE CONTRASTE DE
FASES
En la parte posterior del objetivo se coloca
una lmina que contiene un anillo (anillo de
fase) cuya funcin es producir una
anticipacin de un cuarto de onda a la luz
que pasa a travs de l (la no difractada) con
respecto a la otra que no lo pasa (la
difractada).

MICROSCOPIO DE CONTRASTE DE
FASES
Con el podemos ver
elementos
transparentes que NO
veramos con un
microscopio de campo
claro.
El ndice de refraccin
provoca diferentes
retardos de los rayos
que no son percibidas
por el ojo humano.

A MAYOR ndice de
refraccin, MENOR
velocidad.

ndice de refraccin,
velocidad.

IMGENES DE CONTRASTE DE FASES

CMO SE OBSERVARA?
Se observara por
diferencias de contraste
con partes oscuras (+
densas) y otras partes ms
claras (- densas).

PARA QU SE UTILIZA?
Para observar cortes,
clulas y tejidos vivos
transparentes y sin colorear,
siendo muy til para
visualizar clulas vivas.

IMGENES DE CONTRASTE DE FASES

Ameba junto a
Vorticella observado
por contraste de fases

Clulas de Schwann
observadas por contraste
de fase

4) MICROSCOPIO INVERTIDO
COMPONENTES
ESPECIALES

NINGUNO
Todos sus
componentes son
iguales que los del
M.O.C. pero con una
disposicin inversa.

MICROSCOPIO INVERTIDO
La fuente de luz y el
condensador estn
sobre la plataforma
apuntando hacia abajo.
Los objetivos estn
debajo de la
plataforma apuntando
hacia arriba. Los
oculares se encuentran
en la misma posicin y
la muestra se coloca
sobre la platina.

IMAGEN MICROSCOPIO INVERTIDO

CMO SE OBSERVARA?
Igual que con el
microscopio ptico
compuesto.

PARA QU SE UTILIZA?
Para observar organismos
tejidos en cultivo sin una
preparacin previa,
favoreciendo el seguimiento
y crecimiento.

IMAGEN DEL YEYUNO A 40X

VENTAJAS DEL MICROSCOPIO INVERTIDO SOBRE EL

M.O.C.

VENTAJAS:
Sobrepasan el lmite del
grosor del recipiente y se
observa la imagen con
fineza.

INCONVENIENTES:
- Alto coste.
- Los objetivos ms
potentes son de 40X y de
60X. Tambin los hay de
100X pero son caros y
muy escasos.

Epitelio simple
cbico(clulas del
rin) teida con
hematoxilina y eosina.

5) MICROSCOPIO POLARIZADO
COMPONENTES
ESPECIALES

2 POLARIZADORES
(formados por cristal
de cuarzo y cristal de
Nicol)

MICROSCOPIO POLARIZADO
Se basa en el uso de 2 filtros
polarizadores:
- El 1(polarizador) sirve para
producir ondas luminosas que
oscilan en un solo plano y que
llega a la muestra(situado entre
el condensador y la muestra).
- El 2(analizador) transmite la
luz perpendicularmente al 1 y la
neutraliza (entre la muestra y el
ocular).
Cuando ambos polarizadores se
encuentran se extingue la luz del
polarizador.

MICROSCOPIO POLARIZADO
El material utilizado es
un cristal de cuarzo y
un cristal de Nicol,
dejando pasar
nicamente la luz que
vibra en un nico plano.
Esta luz produce en el
campo del microscopio
claridad (si los cristales
estn paralelos) u
oscuridad (si los
cristales estn cruzados).

FIBRAS DE COLGENO

IMGENES MICROSCOPIO
POLARIZADO

CMO SE OBSERVARA?
Los elementos cristalinos se
ven como estructuras luminosas
con colores muy vivos que
resaltan sobre el fondo oscuro
generado por los polarizadores.

PARA QU SE UTILIZA?
En el laboratorio de histologa y
anatoma patolgica, permite
determinar numerosas
estructuras cristalinas,
pigmentos, lpidos, protenas,

CORTE DE MSCULO
ESQUELTICO CON LUZ
POLARIZADA

IMGENES MICROSCOPIO
POLARIZADO

Fibroclulas musculares
estriadas

Cartlago hialino con luz polarizada

donde hay birrefringencia del
colgeno

6) MICROSCOPIO CONFOCAL
COMPONENTES
ESPECIALES

Fuente de luz
(convencional lser)

Ordenador para
transmitir la imagen
tridimensionalmente.

MICROSCOPIO CONFOCAL
Utiliza un sistema de
espejos para mover el
rayo lser a travs de
la muestra, iluminando
1 slo punto por vez.
Se registran los datos
de cada punto, se
guardan los resultados
en un ordenador para
luego llevarlos a un
monitor de alta
resolucin.

MICROSCOPIO CONFOCAL
El microscopio confocal
combina 2 enfoques:
ptico y
computacional. Una
vez en el ordenador se
pueden marcar a color
para una mejor
visualizacin.
Las fuentes de luz
pueden ser
convencionales o lser.

MICROSCOPIO CONFOCAL

CMO SE
OBSERVARA?
Marcados posteriormente
en ordenador con colores
llamativos sobre fondo
oscuro.

PARA QU SE
UTILIZA?
Para estudiar la
estructura de los
materiales biolgicos.

NEURONAS MOTORAS
OBSERVADAS POR
MICROSCOPIO CONFOCAL

MICROSCOPIO CONFOCAL

VENTAJAS:
Se pueden tomar
imgenes de la
muestra en cortes
muy finos y mostrar
los resultados en
3D.
INCONVENIENTES:
Es muy caro.

MICROSCOPIA CONFOCAL
FLUORESCENTE DE AXONES
SENSORIALES

MICROSCOPIOS ELECTRNICOS
MICROSCOPIO DE
TRANSMISIN

MICROSCOPIO DE BARRIDO
OTROS:
MICROSCOPIO DE IONES EN
CAMPO
MICROSCOPIO DE SONDA DE
BARRIDO
MICROSCOPIO DE EFECTO TNEL
MICROSCOPIO DE FUERZA
ATMICA
MICROSCOPIO VIRTUAL
MICROSCOPIO DE ANTIMATERIA
MICROSCOPIO REFLECTOR
MICROSCOPIO NUCLEAR

1)MICROSCOPIO DE TRANSMISIN
Los electrones
pueden ser
desviados por
campos
electromagnticos
de una forma
parecida a la
refraccin producida
en la luz por las
lentes de cristal.

MICROSCOPIO DE TRANSMISIN
Un M.E.T. es un
microscopio que utiliza
un haz de electrones
para visualizar un
objeto.
Lo caracterstico de
este microscopio es el
uso de una muestra
ultrafina y que la
imagen se obtenga de
los electrones que
atraviesan la muestra.

MICROSCOPIO DE TRANSMISIN

VENTAJAS CON
RESPECTO AL
M.O.C.
- Permite una
altsima resolucin
(hasta 0.1 nm).
- Pueden aumentar
un objeto hasta un
milln de veces.

MICROSCOPIO DE TRANSMISIN

M.E.T. TEJIDO DE TRANSMISIN

*Blanco = Vesculas intracelulares de procolgeno.
*Negro = Colgeno en el exterior celular.

2)MICROSCOPIO DE BARRIDO

Muestra
nicamente la visin
de las superficies
ofreciendo imgenes
pseudotridimensiona
les.

MICROSCOPIO DE BARRIDO
En este tipo de
microscopio
electrnico hay un
pequeo haz de
electrones que se
desplaza
secuencialmente
para recorrer o
barrer toda la
muestra.

MICROSCOPIO DE BARRIDO

CMO SE
OBSERVARA?
Muestran imgenes que
parecen estar iluminadas
y que contienen reas
claras y obscuras,
permitiendo apreciar
fcilmente texturas.

PARA QU SE UTILIZA?
Son muy utilizados en
biologa celular.

MICROSCOPIO DE BARRIDO

CLULAS DEL TEJIDO

CONDUCTOR

TEJIDOS CONECTIVOS

MANTENIMIENTO Y PRECAUCIN CON EL M.O.C.

Al finalizar el trabajo poner el objetivo de menor aumento en

posicin de observacin y bajar la platina.

Mientras que no se est utilizando el microscopio apagar la

lmpara, limpiar los microscopios tras cada uso y cuando se
vaya a guardar, taparlo con su funda para evitar que se
ensucien.

Nunca tocar las lentes con las manos. Si se ensucian,

limpiarlas suavemente con papel de filtro, algodn,etc.

Despus de utilizar el objetivo de inmersin(100X), hay que

limpiar el aceite que queda en el objetivo con algodn y xilol.

MANTENIMIENTO Y PRECAUCIN CON EL M.O.C. 2

El cambio de objetivo se hace girando el revlver, NUNCA

agarrndolo por el tubo del mismo.

Mantener limpia y seca la platina del microscopio. Si se

derrama sobre ella algn lquido, secarlo con un pao,
mientras que si es aceite utilizar xilol.

Para su recogida y transporte, liar el cable sobre la base del

mismo y agarrar con las 2 manos el microscopio: una en la
base y la otra por el brazo o columna.

No forzar nunca los tornillos del microscopio (macromtrico,

micromtrico, platina, revlver y condensador).