CENTRIFUGACIN

FRANCISCO C SILGADO L.
ISMAL A. GONZALEZ R.
MOISS D. RODRGUEZ D.
ANTONIO MERCADO MsC.

UNIVERSIDAD DE CRDOBA
FACULTAD DE CIENCIAS BSICAS
PROGRAMA DE QUMICA
LAB. BIOQUMICA
MONTERIA, COLOMBIA
2015

CENTRIFUGACIN
CENTRIFUGACIN

Es una tcnica que permite la

separacin bien sea clulas
molculas etc.
Se utiliza la propiedad de
sedimentacin de la partcula

SEDIMENTACIN
Se basa en la diferencia de
densidades entre un slido y el
lquido que lo rodea. Solamente
est influenciada por la gravedad.

PRINCIPIOS
PRINCIPIOS FSICO
FSICO -- QUMICOS
QUMICOS

PRINCIPIO
PRINCIPIO DE
DE ARQUMEDES
ARQUMEDES
De este modo cuando un cuerpo est sumergido en el fluido se
generaunempujehidrostticoresultantedelaspresionessobrela
superficie delcuerpo que acta siempre hacia arriba atravs del
centro degravedad del cuerpo del fluido desplazado y de valor igual
al peso del fluido desplazado

Principio de Stokes
se comprueba qu

1. La velocidad de sedimentacin de cada partcula es proporcional a su

tamao
2. Lavelocidaddesedimentacinesproporcionalaladensidaddela
partcula y a la del medio.
3. La velocidad de sedimentacin es nula cuando ambas densidades se
igualan,
4. La velocidad de sedimentacin disminuye al aumentar la viscosidad del
medio,.
5. Lavelocidaddesedimentacinaumentaalaumentarelcampode fuerza

FUERZAS
FUERZAS QUE
QUE INTERVIENEN
INTERVIENEN EN
EN EL
EL PROCESO
PROCESO
Fuerza centrfuga:
es la que tiende a alejar los objetos del centro derotacin mediante
lavelocidadtangencial, perpendicular alradio, en unmovimientocircular.

Fuerza centrpeta:
Se llama as a la fuerza que tira de un objeto hacia el centro de un camino
circular mientras que el objeto sigue dicha trayectoria a una rapidez
constante.
Fuerza friccional:
La fuerza de friccin a veces tambin es conocida como resistencia al
rozamiento.
Esta
es
la
fuerza
friccional
que
se
generaenlasuperficiedeltubodeensayo(conunamuestra) causada por el
movimiento del aire alrededor de esta. Es por ello que las muestras en una
centrfuga deben estar en un tubo de ensayo grueso,porquesinoestosse
romperan. Esto ayuda a minimizar la fuerza de friccin.

CENTRIFUGACIN:
CENTRIFUGACIN: DOS
DOS TIPOS
TIPOS DE
DE ESCALA
ESCALA

CENTRIFUGACIN A ESCALA
PREPARATIVA

CENTRIFUGACIN A ESCALA
ANALTICA

*
1.
.
.
a.
b.

TIPOS DE CENTRIFUGACIN

Escala preparativa
Centrifugacin diferencial
Centrifugacin en gradiente de concentracin
Centrifugacin zonal
Centrifugacin isopcnica
2. Escala analtica

CENTRIFUGACIN DIFERENCIAL

El principio de separacin se basa en la

diferente velocidad de sedimentacin de las
partculas en funcin de su tamao y
densidad.
En un tubo, los diferentes tipos de partculas
se encuentran distribuidos uniformemente,
pero al someterla a un campo centrifugo, las
molculas
sedimentarn
a
distintas
velocidades, por lo que se irn separando a lo
largo del proceso de centrifugacin.

CENTRIFUGACIN ZONAL O EN
BANDAS

En este tipo de centrifugacin, la

muestra se deposita en forma de
capa en la parte superior del medio
en que se va a realizar la separacin,
el cul presenta un gradiente de
densidad continuo.
Una ves depositada la muestra, se
procede a la centrifugacin de los
tubos .

CENTRIFUGACIN ISOPCNICA

TIPOS DE CENTRIFUGAS
BAJA VELOCIDAD
Se caracterizan:
Pequeo tamao.
Sin refrigeracin.
Mxima velocidad: 5000 rpm.
til para partculas grandes
(clulas, precipitados de sales
insolubles)

ALTA VELOCIDAD
Se caracterizan por:
Velocidad entre 18000 y 25000 rpm.
Refrigeradas, algunas con sistema de
vaco.
tiles en la separacin de fracciones
celulares.
Insuficientes para la separacin de
ribosomas, virus o macromolculas.

TIPOS DE CENTRIFUGAS
ULTRACENTRFUGAS
Velocidad: a partir de 50000 rpm.
Presentan sistemas auxiliares: sistemas de
refrigeracin,
sistemas de alto vaco.
2 tipos:
-Analticas: obtencin de datos precisos de
propiedades de sedimentacin (s, PM).
-Preparativas: aislamiento de partculas de bajo
S (microsomas,virus, macromolculas).

APLICACIONES DE LA
CENTRIFUGACIN

Separar molculas en funcin del tamao

molecular y la densidad.
Obtencin de hematocrito.
La separacin de las lipoprotenas del plasma (colesterol).
Obtencin de suero o plasma a partir de sangre total.
Concentracin de clulas de los lquidos biolgicos.
Separacin de sustancias.

O
T
N
E
M
A
D
N
U
F

S
O
C
I
T

M
E
T
A
M
S

CENTRIFUGACIN
Se conseguir una misma separacin en 2 centrfugas distintas cuando
sea igual FCR, no si es igual la velocidad de giro (rpm). Es importante,
por ello, dar las condiciones de centrifugacin en FCR, no en rpm.

FUNDAMENTOS
FUNDAMENTOS

Fuerza
Fuerza
Centrifug
Centrifug
a
a
(Principio
(Principio de
de
Arqumedes)
Arqumedes)

Todo cuer
po sumerg
ido total o
parcialmen
te en un fl
(lquido o
uido
gas) recibe
un empuje
ascendent
e, igual al
peso del
fluido desa
l o j ad o p o r
el objeto
.

COEFICIENTE
COEFICIENTE DE
DE SEDIMENTACIN
SEDIMENTACIN

CONCLUSIONES
CONCLUSIONES

La tcnica de centrifugacin permite la separacin muchos

componentes: en bioqumica, tales como clulas, orgnulos; protenas,
carbohidratos, etc.
Muchas de las separaciones que se llevan a cabo en centrifugacin
depende de: su tamao, forma y densidad de los componentes a
separar.
La tcnica de centrifugacin cumple con un principio fundamental que
permite la sedimentacin de los componentes de inters de un anlisis.

*GRACIAS !!!
POR SU ATENCIN.