En 1953, James Watson y Francis Crick publicaron

el primer modelo estructural de la molcula de ADN,

(Premio Nobel de Medicina en 1962)

Unidad bsica: nucletido

Los peldaos formados por los nucletidos son complementarios.

La posicin de una A en una de las cadenas se corresponde con
una T en la otra cadena...

De igual forma, la posicin de una G en una de las cadenas se

corresponde con una C en la misma posicin de la otra cadena.

El esquema de este dogma ha sido encontrado repetidamente

y se considera una regla general (salvo en los retrovirus)

Protena

Severo Ochoa descubre la ARN polimerasa y sintetiza por primera vez

in vitro una molcula de ARN
(Premio Nobel de Fisiologa y Medicina en 1959)

Nirenberg y Khorana descifran el cdigo gentico

(Premio Nobel de Medicina en 1968)

El cdigo gentico est compuesto por codones

(codon= 3 bases nitrogenadas) que definen el
proceso de traduccin

61 codones para aminocidos

(existen 20 aminocidos diferentes)
3 codones de terminacin

El cdigo gentico es
universal
El cdigo gentico es
redundante (varios
codones para un mismo
aminocido)
Ejemplo: El aminocido
glicina est codificado
por GGU, GGC, GGA y
GGG

Obtencin de organismos genticamente idnticos

En el campo de la Ingeniera gentica consiste
en aislar y multiplicar un gen, o en general,
un trozo de ADN
En Animales superiores consiste en obtener un
individuo a partir de una clula o de un nucleo
de otro individuo

Conjunto de tcnicas nacidas de la Biologa molecular

que permiten manipular el genoma de un ser vivo

cromosoma

Homo sapiens

Mediante
la ingeniera
gentica se pueden introducir genes
Escherichia
coli
en el genoma de un individuo que carece de ellos

gen

Aislamiento y manipulacin de fragmentos

de ADN de un organismo para introducirlo
en otro (ADN recombinante)

Nathans D., Arber W., y Smith H. (premio Nobel de Fisiologa

y Medicina en 1978 por el descubrimiento de las enzimas de
restriccin y su aplicacin en Gentica Molecular)

Molcula A

Molcula B

Digestin de ambas molculas con la

misma enzima de restriccin, BamHI
Extremos
cohesivos
Mezclar

Tratar con ADN-ligasa

ADN recombinante

En 1983 Kary Mullis da a conocer esta tcnica y en 1993 recibi el Premio Nobel de Qumica por este descubrimiento

Es un proceso cclico
(cada ciclo consta de 3 pasos)
94C desnaturalizacin (separacin
de las dos hebras de ADN)
50C Anillamiento de "cebadores"
72C copia de cada una de las
hebras de ADN por la ADN
polimerasa

35 ciclos

236= 68 billones de copias

Plsmido

Plsmidos
gen de resistencia
a la ampicilina

3
Extremos cohesivos

Molcula de ADN recombinante

Plsmido

Virus

Ciclo lisognico

Ciclo ltico

(f)

(g)

(h)

Genoma de hongos: 44 millones de pares de bases

Huesped: Escherichia coli
Vector: Bacterifagos
capacidad: 20 mil pares de bases

Genoma humano: 3000 millones de pares de bases

Huesped: Saccharomyces cerevisiae
Vector: YAC (cromosoma artificial de levadura)
MegaYAC (capacidad: 1 milln de pares de bases)

Secuenciacin
de genomas

ACTTTGTCCACGGCCTAAGCGTTTTTTGCCC
AGTGACTTTGTCCAAC
GTCCAACAGTTACCAAGTGACTTTGTCCAC
TTTTGCCC
AGTGACTTTGTCCA
ACGGCCTAAGCGTTTTTTTT
ALINEAMIENTO DE TODAS LAS SECUENCIAS Y RECONSTRUCCIN DEL CROMOSOMA

Deteccin de mutaciones

Mtodo de diagnstico rutinario (relacin entre enfermedad y mutacin puntual)

Secuenciacin de ADNs fsiles

Posibilidad de aislar secuencias de ADN a partir de unas pocas copias (la mayora
estn daadas o degradadas)

Diagnstico de enfermedades genticas

Diagnstico prenatal / Diagnstico preimplantacin de enfermedades hereditarias o

determinacin del sexo del feto previamente a su implantacin en procesos de
fecundacin in vitro

Identificacin de especies y control de cruces entre animales

Para descubrir fraudes comerciales, tales como vender carne de una especie ms
barata a los precios de otra ms cara, o el comercio ilegal de especies en peligro

Secuenciacin de genomas

Conocimiento bsico y aplicado de diferentes organismos (incluido el genoma humano)

16 de Febrero de 2001
Celera Genomics

Proyecto genoma humano

La secuencia del genoma es un atajo valioso: ayuda a los
cientficos a encontrar los genes ms fcil y rpidamente
y sienta las bases para averiguar la funcin de los genes
identificados
Beneficios mdicos tras el conocimiento de la
estructura de cada gen humano
1.

Diagnstico en individuos con riesgo de ser

portadores del gen de alguna enfermedad

2.

Marco de trabajo para el desarrollo de

nuevas
terapias,
adems
de
nuevas
estrategias para la terapia gnica

15 de Febrero de 2001
Consorcio pblico internacional

Obtencin de protenas de inters mdico, comercial, etc...

(insulina, hormona del crecimiento, factores de coagulacin antes se obtenan

a partir de los tejidos que las producen o fluidos corporales)

Obtencin de vacunas recombinantes

(aternativa al uso de organismos patgenos inactivos)

Extraccin del ADN
del virus

Integracin del
plsmido hbrido
en el ncleo de una
clula de levadura

ADN
plsmido
bacteriano

La levadura fabrica las

protenas vricas
con poder inmunolgico

Inyeccin de protenas
vricas en un chimpanc

Diagnstico de enfermedades de origen gentico

Mediante ingeniera gentica

se construye una sonda de
ADN, marcada (marcaje
fluorescente), con la
secuencia complementaria del
ADN enfermo

ADN sano
ADN enfermo
Conocimiento previo de
la secuencia de ADN
enfermo

Biochip
Microarray
DNAchip

ADN complementario
del ADN enfermo
DIAGNSTICO

Si aparecen bandas
fluorescentes
demuestra que la
persona presenta la
anomala
Hibridacin? Renaturalizacin
No hibridacin? del ADN con la
sonda
fluorescente

Desnatura
lizacin
del ADN

ADN de la
persona que se
quiere diagnosticar

Plantas transgnicas

Agrobacterium tumefaciens es patgena de plantas.Produce tumores

Agrobacterium

ncleo
Plsmido Ti

Transgnesis= introduccin de
ADN extrao en un genoma, de
modo que se mantenga estable de
forma hereditaria y afecte a
todas las clulas en los organismos
multicelulares.
Ingeniero
gentico
natural tras
sutitucin de
genes onc por
genes de
inters

cromosoma

inductor de tumores
contiene oncogenes
(genes onc)

cromosoma
clula
vegetal
tumores
Proliferacin de
hormonas
crecimiento. Se
forman tumores en
las zonas de la
lesin

Resistencia a herbicidas, insectos y enfermedades microbianas

El maz transgnico de Novartis es resistente al herbicida Basta y tambin es
resistente al gusano barrenador europeo (contiene el Gen de resistencia a la
toxina Bt de Bacillus thuringiensis) produce su propio insecticida
Problemas:La toxina Bt en las plantas transgnicas tiene propiedades
sustancialmente diferentes a la toxina Bt en su forma natural.
La toxina puede ser transmitida a travs de la cadena alimenticia, un
efecto que nunca ha sido observado en la toxina Bt en su forma natural.
Larvas de especies de insectos predadores benficos (larvas verdes de
crisopa) murieron cuando fueron alimentadas con el gusano barrenador
europeo
Gold rice de Monsanto con color amarillo por los altos niveles de vitamina A

Mejora de la calidad de los productos agrcolas

Produccin de aceites modificados

Sntesis de productos de inters comercial

Anticuerpos animales, interfern, e incluso elementos de un polister destinado a la fabricacin

de plsticos biodegradables

Transgnesis en animales

Gen humano

(por microinyeccin de zigotos)

Secuencia promotora para

la sntesis de una protena
de la leche

Gen hbrido

humano

rata

Ovulos de cerda
fecundados

Desarrollo de una cerda transgnica

Clonacin de animales

(TRANSFERENCIA NUCLEAR DE CLULAS EMBRIONARIAS)

Clonacin de animales

(TRANSFERENCIA DEL NCLEO DE UNA CELULA SOMATICA: CLULA DIFERENCIADA)

Clonan terneros en EE UU para producir anticuerpos

humanos

efe- Washington - agosto 2002

Terneros clonados y manipulados genticamente (fbrica de anticuerpos humanos)

genes para anticuerpos
humanos recombinantes

clulas drmicas

clonacin

Objetivo: Tratamiento de enfermedades inmunolgicas

Futuro: Tratamiento de una amplia gama de enfermedades ocasionadas por
bacterias y virus, como hepatitis, ntrax (utilizada como arma biolgica)

Clonan cerdos destinados a trasplantar sus rganos a

humanos

La empresa escocesa PPL Therapeutics logra

retirar de los cerditos el gen que provoca el
rechazo en transplantes a humanos "alfa 1,3
galactosil transferasa"

Enero 2002. AP Photo/Roanoke Times, Gene Dalton (IDEAL-EFE)

Paso importante en favor del xenotrasplante (transferencia de clulas u

rganos de una especie a otra)
Ayudar a superar la escasez de rganos humanos para hacer trasplantes de
todo tipo

Un laboratorio de Texas clona al primer animal

domstico
"Copycat" es el primer gatito nacido mediante clonacin"
El experimento abre las puertas de la clonacin masiva de
animales domsticos, un fin sin explorar cuya sola
posibilidad haba desencadenado ya el almacenamiento
de clulas de mascotas por parte de sus ricos propietarios

febrero 2002 Universidad College Station (Texas)

El sexto da
El ataque de los clones

La clonacin humana ya se
est intentando de forma
clandestina por varios
laboratorios en el mundo

La clonacin reproductiva no arroja

los resultados suficientes, no existen
garantas como para decir 'Vamos a
clonar un ser humano'

Por cada intento de clonacin

hay detrs miles de fallos,
Para obtener a Dolly: 277 fusiones
abortos y malformaciones
de ovocitos con clulas mamarias, solo
genticas
29 embriones fueron aptos. De estos
solo uno result un xito

CREACIN DE UN EMBRIN ARTIFICIAL

(con clulas adultas)
-embrin somticoOBJETIVO LTIMO: TRATAMIENTO de ENFERMEDADES

OBJETIVO LTIMO: AUTOTRASPLANTES

(no hay rechazo)

1 Cultivo de blastocisto

Fecundacin

2 Eliminacin de la capa externa

Embrin temprano

Fusin de clula somtica

y ovulo enucleado

3 Adicin de sustancias
que disgregan la masa
celular interna

4 Transferencia de los agregados

celulares a un nuevo pozo

6 Adicin de factores de
diferenciacin
seleccionados

En caso de existir deficiencias a nivel

gentico se puede hacer terpia gnica
a nivel de clulas madre

7 Administracin de
clulas diferenciadas a
tejidos daados
5 Formacin de clulas
diferenciadas a tejidos
daados

Las clulas madre abren la posibilidad a un nuevo mundo en

las terapias de los trasplantes
Calificada como una tcnica "ineficaz e imperfecta" por cientficos
como Iam Wilmut, "padre" de la oveja Dolly, la clonacin ha encontrado
en las clulas "madre" su primera razn de ser.
Retos tcnicos
1.

Las clulas embrionarias de ratn originan teratomas y

teratocarcinomas en animales adultos

2.

Conocimiento de las seales implicadas en el desarrollo y

diferenciacin

3.

Asegurar la salud a largo plazo de las clulas a transplantar

(edad biolgica de las clulas)

Declaracin Universal de Derecho Humanos y Genoma Humano de la UNESCO (1997),

adoptada en 1998 por la Asamblea General de ONU (busca un balance entre una
continuacin en las investigaciones y la salvaguarda de los derechos humanos)

Frente a los mltiples beneficios de la ingeniera gentica

pueden surgir algunos problemas

Problemas sanitarios

nuevos microorganismos patgenos,

efectos secundarios de nuevos frmacos de diseo, etc...

Problemas ecolgicos

desaparicin de especies con consecuencias

desconocidas, nuevas contaminaciones debidas a un metabolismo incontrolado, etc...

Problemas sociales y polticos

en el campo de la produccin industrial, agrcola y

ganadera,
pueden crear diferencias an ms grandes entre pases ricos y pobres. El sondeo gnico en
personas puede llevar a consecuencias nefastas en la contratacin laboral, por ejemplo, y atenta contra
la intimidad a que tiene derecho toda persona (empleo, agencias de seguros, discriminacin..).

Problemas ticos y morales

Poder conocer y modificar el patrimonio gentico humano

puede ser una puerta abierta al eugenismo "Eugenesia: la ciencia del incremento de la felicidad humana