Вы находитесь на странице: 1из 34

PARED CELULAR

INTRODUCCIN
La mayor parte de los procariotas posee una pared celular (P.C.)
rgida rodeando al protoplasto. Las excepciones son los
micoplasmas (dentro del dominio Bacteria) y algunas arqueas,
como Thermoplasma.
Al microscopio electrnico se puede observar como una capa en
ntimo contacto con la membrana citoplsmica, con un espesor
que oscila entre 10 y 80 nm (segn especies) -frente a los 8 nm
de la membrana celular- , y con una estructura ms o menos
compleja, segn los tipos bacterianos.
a) Las paredes celulares ms frecuentes en eubacterias siguen
dos modelos alternativos que, como veremos comparten un
componente comn: paredes de tipo Gram-positivo o de tipo
Gram-negativo.
b) Unas pocas eubacterias (como las del gn. Planctomyces)
poseen paredes a base de protenas.
c) Las Arqueas poseen paredes diferentes a las de eubacterias y
se pueden agrupar en diversos tipos.
La pared celular bacteriana est hecha de peptidoglicano
(tambin denominado murena), que est formado por cadenas de

. Las paredes celulares bacterianas son diferentes de las paredes de


plantas y hongos que estn hechas de celulosa y quitina,
respectivamente. Tambin son diferentes de las paredes de Archaea,
que no contienen peptidoglicano. La pared celular es esencial para la
supervivencia de muchas bacterias
En las bacterias Gram-positivas la pared celular contiene una capa
gruesa de peptidoglicano adems de cidos teicoicos, que son
polmeros de glicerol o ribitol fosfato. Los cidos teicoicos se unen al
peptidoglocano o a la membrana citoplasmtica.
En las bacterias Gram-negativas la capa de peptidoglicano es
relativamente fina y se encuentra rodeada por a una segunda
membrana lpida exterior que contiene lipopolisacridos y lipoprotenas.
La capa de petidoglicano se une a la membrana externa por medio de
lipoprotenas.
La mayora de las bacterias tienen una pared celular Gram-negativa y
solamente Firmicutes y Actinobacteria (conocidas previamente como
bacterias Gram-positivas de contenido GC bajo y bacterias Grampositivas de contenido GC alto, respectivamente) tienen paredes Grampositivas

La tincin de Gram es la ms importante entre las tinciones


llamadas diferenciales (aquellas que no tien de la misma manera
a todos los tipos de bacterias), esta tincin consta de varios
pasos:
1. Imaginemos un frotis en porta de vidrio con una muestra de
varios tipos de bacterias, que se han fijado por calor. En la primera
fase, esta preparacin de trata con un primer colorante llamado
violeta cristal o violeta de genciana.
2. A continuacin se aade una solucin de lugol (yodo-ioduro),
que acta como mordiente, formando una laca relativamente
resistente con el violeta. En este momento todas las bacterias
estn teidas de color violeta
3. Ahora realizamos una descoloracin diferencial con etanol o
una mezcla de etanol y acetona. Lo que ocurre es que algunas
bacterias (las que llamaremos Gram-negativas) pierden el color
violeta (quedaran prctimante transparentes al microscopio),
mientras que otras (las Gram-positivas) resisten el tratamiento, y
retienen el colorante violeta.
4. Finalmente, tratamos el porta con un segundo colorante
(colorante de contraste): se trata de un colorante de color rojo o
rosa, como la fucsina o la safranina. Este colorante tie ahora a
las bacterias previamente descoloradas por el etanol. Por lo tanto,
el resultado en la observacin al microscopio es que las bacterias
Gram-positivas se ven de color violeta, y las Gram-negativas de
color rosa o rojo.

Tincin de
Gram

3. Ahora realizamos una descoloracin diferencial


con etanol o una mezcla de etanol y acetona. Lo
que ocurre es que algunas bacterias (las que
llamaremos Gram-negativas) pierden el color
violeta (quedaran prcticamente transparentes al
microscopio), mientras que otras (las Grampositivas) resisten el tratamiento, y retienen el
colorante violeta.
4.Finalmente, tratamos el porta con un segundo
colorante (colorante de contraste), de color rojo o
rosa, como la fucsina o la safranina. Este colorante
tie ahora a las bacterias previamente
descoloradas por el etanol. Por lo tanto, el
resultado en la observacin al microscopio es que
las bacterias Gram-positivas se ven de color
violeta, y las Gram-negativas de color rosa o rojo.

Como veremos enseguida, esta diferencia de


comportamiento ante la tincin de Gram refleja el
hecho de que ambos tipos de eubacterias poseen
dos tipos estructuralmente diferentes de pared
celular, aunque ambas posean en comn la
posesin de peptidoglucano. A continuacin
estudiaremos con cierto detalle la pared celular de
eubacterias.

BACTERIAS GRAM POSITIVAS

BACTERIAS GRAM NEGATIVAS

BACTERIAS CIDO-ALCOHOL RESISTENTES

PAREDES DE LAS EUBACTERIAS

COMPOSICIN QUMICA Y ESTRUCTURA BSICAS


DEL PEPTIDOGLUCANO
Est formado por repeticiones de una unidad
disacardica fundamental unida a su vez a un
tetrapptido. Distintas cadenas (formadas por el
esqueleto de azcares) se unen entre s por determinados
enlaces peptdicos entre tetraptidos de cadenas
diferentes. La unidad disacardica repetitiva: consiste
en N-acetilglucosamina (NAG) unida por enlace (14) a
N-acetilmurmico (NAM). Obsrvese que el NAM es el 3O-D-lactil-ter de la NAG (o sea, se deriva de unir el cido
D-lctico con el OH del C-3 de la NAG).
Las distintas unidades disacardicas se van uniendo
entre s por enlaces (14) entre el NAM de una unidad y
la NAG de la siguiente. Este enlace es susceptible a la
rotura catalizada por el enzima lisozima. El nmero de
repeticiones (n) puede oscilar entre 10 y 100.
La cadena tetrapeptdica: Desde el grupo carboxilo de

Frmula de un peptidoglucano tpico. Observar:


La unidad disacardica NAG-NAM
Las distintas unidades disacardicas se unen
entre s por enlaces (14) entre el NAM de una
unidad y el NAG de la siguiente. Este enlace es
susceptible de rotura por lisozima en muchas
bacterias
El tetrapptido, con su alternancia de
aminocidos en L y en D

Comparacin entre el meso-diaminopimlico (mDAP) y la L-lys. Ambos son diaminocidos. El mDAP se puede considerar como una Lys en la que
el H terminal de la cadena lateral est
sustituido por un carboxilo (-COOH)

m-DAP

L-lys

LA ESTRUCTURA GLOBAL:
Las distintas cadenas polisacardicas, con sus
respectivos tetrapptidos, se unen entre s por medio
de puentes o enlaces peptdicos, entre un
aminocido de una cadena (p. ej., el aminocido n3,
como el meso-DAP del ejemplo) y otro aminocido de
una cadena adyacente (la D-ala terminal). De este
modo, la estructura global es una sola
macromolcula gigante que envuelve al
protoplasto, formando un sculo rgido, a modo de
tejido continuo, que tiene el volumen y la forma de la
bacteria respectiva

Ejemplos de entrecruzamientos en el
peptidoglucano

Directo (muchas
Gram-negativas)

Puente pentaglicina (algunas


Gram positivas

Comparacin de las
envolturas celulares
bacterianas. Arriba:
Bacteria Grampositiva. 1-membrana
citoplasmtica, 2peptidoglicano, 3fosfolpidos, 4protenas, 5-cido
lipoteicoico. Abajo:
Bacteria Gramnegativa. 1-membrana
citoplasmtica
(membrana interna), 2espacio periplasmtico,
3-membrana exterior, 4fosfolpidos, 5peptidoglicano, 6lipoprotena, 7protenas, 8lipopolisacridos, 9porinas.

BACTERIA GRAM NEGATIVA


Las bacterias Gram-negativas presentan dos membranas lipdicas entre las
que se localiza una fina pared celular de peptidoglicano, mientras que las
bacterias Gram-positivas presentan slo una membrana lipdica y la pared
de peptiglicano es mucho ms gruesa. Al ser la pared fina, no retiene el
colorante durante la tincin de Gram.
Muchas especies de bacterias Gram-negativas causan enfermedades. Los
cocos Gram-negativos causan la gonorrea (Neisseria gonorrhoeae),
meningitis (Neisseria meningitidis) y sntomas respiratorios (Moraxella
catarrhalis), entre otros. Los bacilos Gram-negativos incluyen un gran
nmero de especies. Algunos de ellos causan principalmente
enfermedades respiratorias (Hemophilus influenzae, Klebsiella pneumoniae
, Legionella pneumophila, Pseudomonas aeruginosa), enfermedades
urinarias (Escherichia coli, Proteus mirabilis, Enterobacter cloacae, Serrati
marcescens) y enfermedades gastrointestinales (Helicobacter pylori,
Salmonella enteritidis, Salmonella typhi). Otros estn asociadas a
infecciones nosocomiales (Acinetobacter baumanii

EL PEPTIDOGLUCANO DE BACTERIAS GRAMNEGATIVAS


En la mayor parte de Gram-negativas el peptidoglucano
corresponde a la composicin y estructura que acabamos de
describir. Sin embargo, en las espiroquetas, el diaminocido en
posicin 3, en vez de ser meso-DAP, est sustituido por la L-ornitina
(que tambin es un diaminocido).
El enlace entre cadenas polisacardicas se realiza
normalmente mediante unin peptdica directa entre el grupo
carboxilo de la D-ala terminal y el grupo -amino del mesoDAP. Ahora bien, en este enlace participan solamente el 50% de los
tetrapptidos. Los dems pptidos no participan en enlaces, y entre
estos ltimos se encuentran incluso dipptidos y tripptidos.
El resultado es una capa simple de PG (de 1 nm de espesor),
a modo de malla floja, y con grandes poros (los huecos dejados
por las zonas donde no hay enlace peptdicos). Ello explica el
comportamiento de las bacterias Gram-negativas en la tincin de
Gram: al aadir el alcohol, se produce una deshidratacin que
tiende a contraer la estructura del PG, pero los poros son grandes y
por ellos sale el primer colorante (el violeta de genciana). El ulterior

La envoltura celular de las bacterias Gram-negativas est compuesta por una


membrana citoplasmtica (membrana interna), una pared celular delgada de
peptidoglicano, que rodea a la anterior, y una membrana externa que recubre la
pared celular de estas bacterias. Entre la membrana citoplasmtica interna y la
membrana externa se localiza el espacio lsmico relleno de una sustancia
denominada periplasma, la cual contiene enzimas importantes para la nutricin
en estas bacterias.
La membrana externa contiene diversas protenas, siendo una de ellas las
porinas o canales protecos que permiten el paso de ciertas sustancias.
Tambin presenta unas estructuras llamadas lipopolisacridos (LPS), formadas
por tres regiones: el polisacrido O (antgeno O), una estructura polisacrida
central (KDO) y el lpido A (endotoxina).
Las bacterias Gram-negativas pueden presentar una capa S que se apoya
directamente sobre la membrana externa, en lugar de sobre la pared de
peptidoglicano como sucede en las Gram-positivas. Si presenten flagelos, estos
tienen cuatro anillos de apoyo en lugar de los dos de las bacterias Grmapositivas porque tienen dos membranas. No presentan cidos teicoicos ni
cidos lipoteicoicos, tpicos de las bacterias Gram-positivas. Las lipoprotenas
se unen al ncleo de polisacridos, mientras que en las bacterias Grampositivas estos no presentan lipoprotenas. La mayora no forma endosporas
(Coxiella burnetti, que produce estructuras similares a las endosporas, es una
notable excepcin).

PARED GRAM NEGATIVA

Otra imagen general de las envueltas de una


bacteria Gram-negativa (vale la pena recordar...!.
Observa la estructura general de la pared celular:
el espacio periplsmico contiene el PG, el cual
se une covalentemente con la lipoprotena de
Braun, que a su vez contacta con la lmina interna
de la membrana externa
la membrana externa es una bicapa
proteolipdica muy asimtrica:
su lmina externa contiene el LPS (observa las
cadenas laterales proyectadas hacia el exterior)
atravesando la membrana externa hay varios
tipos de protenas, incluyendo los trmeros de
porinas, con sus correspondientes canales
internos, que solo dejan pasar molculas
hidrfilas por debajo de cierto tamao

El lipopolisacrido
El lpido A: Dos unidades de glucosamina
unidas por enlace (16), pero donde todos los
grupos -OH (menos uno) y -NH2 estn
sustituidos (unidos a otras molculas):
Obsrvese que

A.G. saturados
(C-14): betahidroximirstico

existen 5 (a veces 6) cidos grasos, todos


ellos saturados, con predominio de hidroximirstico (un cido graso C14).
El -OH original en 4 est sustituido por
arabinosamina-fosfato.
El -OH en 1 est sustituido por fosforiletanolamina (a veces pirofosforil-etanolamina).
El oligosacrido medular (tambin llamado
corazn o ncleo): se une al lpido A a travs
del -OH en 3. Se pueden considerar dos
fracciones:
ncleo interno, a base de dos tipos de
azcares exclusivos de Gram-negativas: 2ceto-3-desoxioctnico (KDO) y L-glicero-Dmanoheptosa (Hep).. Alguna de las Hep y
alguno de los KDO pueden a su vez estar
unidos a fosforil-etanolamina (o pirofosforiletanolamina). Esta regin es muy rica en
grupos cargados, especialmente con carga
negativa (de los fosfatos y KDO).
La fraccin del ncleo externo est
constituida a base de hexosas (glucosa,
galactosa, NAG, y a veces algunas hexosas
ms raras).

Unidad repetitiva de
la cadena lateral

Cadena lateral especfica: polisacrido


repetitivo, que se proyecta hacia el exterior
celular. Consiste en la repeticin (n<40 veces)
de unidades tri-, tetra- o pentasacardicas
(en estos dos ltimos casos uno de los
azcares de cada repeticin queda lateral
respecto del esqueleto lineal que forman los
dems).

Ncleo externo

Ncleo interno

Glucosamina(16)glucosamina, con
OH en 1
sustituido con Petanolamina

Bacteria Gram positiva


La envoltura celular de las bacterias Gram-positivas comprende la membrana
citoplasmtica y una pared celular compuesta por una gruesa capa de
peptidoglicano, que rodea a la anterior. La pared celular se une a la membrana
citoplasmtica mediante molculas de cido lipoteicoico. La capa de
peptidoglicano confiere una gran resistencia a estas bacterias y es la responsable
de retener el tinte durante la tincin de Gram. A diferencia de las Gram-negativas,
estas bacterias no presentan una segunda membrana lipdica externa.
Incluyen especies tanto mviles como inmviles con forma de bacilo (Bacillus,
Clostridium, Corynebacterium, Lactobacillus, Listeria) o coco (Staphylococcus,
Streptococcus); con gruesas paredes celulares o sin ellas (Mycoplasma). Algunas
especies son fotosintticas, pero la mayora son hetertrofas. Muchas de estas
bacterias forman endosporas en condiciones desfavorables.

La clula bacteriana est rodeada por una envoltura que observada al


microscopio electrnico, se presenta como una capa gruesa y homognea
denominada pared celular. Entre la membrana plasmtica y la pared celular se
encuentra el periplasma o espacio periplasmtico, luego en seccin (corte) se
observa una estructura semejante a dos lneas paralelas formada separando
una capa menos densa; esto corresponde a la llamada envoltura bacteriana. En
el interior de la membrana plasmtica se encuentra el citoplasma que est
constituido por una disolucin acuosa, el citosol, en el cual se encuentran
ribosomas y otros agregados de macromolculas, y en el centro se ubica la
zona menos densa llamada nucleoide, que contiene una madeja de hebras
difcil de resolver (distinguir) y cuyo principal componente es el ADN.
La pared externa de la envoltura celular de una bacteria Gram positiva tiene
como base qumica fundamental el peptidoglucano, que es un polmero de Nacetil-2-D-glucosamina, unido en orientacin -1,4 con N-acetil murmico, a
ste se agregan por el grupo lactilo 4 ms aminocidos.

Esta molcula se polimeriza gran cantidad de veces, de modo que se forma una
malla especial, llamada sculo de murena. Dicho compuesto es de vital
importancia para conservar la forma y darle rigidez a la clula bacteriana (si este
compuesto no existiese, la clula reventara debido a su gran potencial osmtico).
Las siguientes caractersticas son presentes generalmente en una bacteria Grampositiva:
Membrana citoplasmtica.
Capa gruesa de peptidoglicano.
cido teicoicos y lipoteicoicos, sirven como agentes quelantes y en ciertos tipos de
adherencia.
Polisacridos de cpsula
Si un flagelo est presente, este contiene dos anillos como soporte en oposicin a
los cuatro que existen en bacterias Gram-negativas porque las bacterias Grampositivas tienen solamente una capa membranal.
Tanto las bacterias Gram-positivas y las Gram-negativas pueden tener una
membrana llamada capa S. En las bacterias Gram-negativas, la capa S est unida
directamente a la membrana externa. En bacterias Gram-positivas, la capa S est
unida a la capa de pptidoglicano. Es nico a las bacterias Gram-positivas la
presencia de cidos teicoicos en la pared celular. Algunos cidos teicoicos
particulares, los cidos lipoteicoicos, tienen un componente lipdico y pueden asistir
en el anclaje del pptidoglicano, en tanto el componente lipdico sea integrado en la
membrana.

Un cido ribitol-teicoico

cidos teicurnicos: Ciertas bacterias Grampositivas, cuando se someten a un rgimen de


limitacin de fosfato son incapaces de sintetizar
cidos teicoicos, pero en su lugar producen
cidos teicurnicos. Los teicurnicos consisten
en polmeros aninicos formados por la
alternancia de cidos urnicos (que tienen
grupos -COOH libres) y aminozcares como la Nacetil-galactosamina.

cidos lipoteicoicos: Estn presentes en


todas las bacterias Gram-positivas, aun en
condiciones de carencia de fosfato. Se trata
simplemente de cidos glicerol-teicoicos que se
encuentran unidos a la membrana
citoplsmica, concretamente se unen por
enlace fosfodister con glucolpidos de
membrana, mientras que el otro extremo de la
cadena queda expuesto al exterior.

Otra imagen que muestra la estructura global de


la pared de Gram-positivas. Observar que el PG
est inmerso en la matriz a base de:
Teicoicos (unidos al PG)
Lipoteicoicos (unidos a glucoprotenas de la
pared celular)
Ambos tipos de polmeros pueden sobresalir de
la pared hacia fuera.
Funciones de los polmeros de la matriz:
Parece ser que su papel principal es suministrar
una carga neta negativa a la pared celular, lo que
permite captar cationes divalentes (p. ej., Mg ++),
que a su vez se necesitan para muchas
actividades enzimticas de la membrana
citoplsmica o del espacio periplsmico, que
participan de la morfognesis y divisin de la
pared celular.
Como ya dijimos, los cidos teicoicos y
teicurnicos son buenos antgenos. Cuando no
estn cubiertos por estructuras ms externas
(como cpsulas), constituyen el antgeno
somtico O de las bacterias Gram-positivas.
Finalmente, en algunas bacterias, sumistran,
junto con el PG, receptores especficos para la
adsorcin de ciertos bacterifagos.

PARED DE LAS BACTERIAS CIDO-ALCOHOL RESISTENTES (AAR)


Pared especial de ciertas Gram-positivas: Nocardia, Mycobacterium
Resisten la decoloracin con clorhdrico-etanol ( cido-alcohol resistentes)
Esta propiedad deriva de:
cidos miclicos, Glucolpidos, Y Ceras
cidos miclicos Son -hidroxicidos grasos ramificados en , de cadena muy larga
Forman parte de un esqueleto muy peculiar de la pared celular:
PGarabinogalactanocidos miclicos
Otros lpidos de en la pared de bacterias AAR
Glucolpidos:
Micolatos de trehalosa
Sulfolpidos de trehalosa
Micsidos (unin ster entre miclicos y azcares)
Ceras: unin de miclicos con alcoholes ramificados de cadena larga (C30-C34)
Papeles conferidos por la pared AAR
Aspecto y consistencia crea de las colonias en placas de Petri
En lquidos crecen formando grumos
Gran impermeabilidad
Resistencia a desecacin
Resistencia a agentes antibacterianos
Detergentes
Oxidantes
cidos y bases

PARED CELULAR ACIDO-ALCOHOL RESISTENTE: 1-lpidos externos, 2cido miclico, 3-polisacridos (arabinogalactano), 4-peptidoglicano, 5-membrana
plasmtica, 6-lipoarabinomanano (LAM), 7-fosfatidilinositol manosido, 8-esquema de
la pared celular.