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Contraste
de
Fases
GENERALIDADES
La
microscopa de contraste de fase, fue
desarrollada fundamentalmente por Zernike en
1932.
Se basa fundamentalmente en el retraso que se
produce en las ondas de luz al atravesar objetos
de distintos ndices de refraccin, aprovechando y
amplificando dichos retrasos.
Es un microscopio ptico modificado que permite
contrastar sustancias de diferente grosor o
densidad.
Mediante un condensador y un objetivo especial
se controla la iluminacin de tal manera que vaya
en diferentes rutas a travs de las distintas partes
de una clula.
El resultado es una imagen con diferentes grados
de brillo y oscuridad.
Se utiliza para visualizar estructuras celulares sin
necesidad
de
usar
colorantes
o
matar
Principio de la Microscopa de
Contrastes
Se basa en el hecho de que cuando interfieren
ondas que tienen un determinado desfase se
produce una interferencia constructiva (con mayor
amplitud) o destructiva (con menor amplitud).
Objetivo de la Microscopa de
Contrastes
El objetivo es manipular el desfase de dos haces de
luz para trasladar esas pequeas variaciones de
fase a los correspondientes cambios de amplitud
que se visualizan como diferencias de contraste.
Placa de Difraccin
Placa de Fase
dentro del tubo del sistema de lentes objetivos,
la cual consta de un anillo ranurado a manera
de disco.
Ocular similar al del microscopio de campo
claro.
FORMACIN DE LA IMAGEN
AJUSTE DEL
MICROSCOPIO
La correspondencia entre las placas de fase de los
objetivos y los diafragmas anulares de la condensadora ha
de ser exacta. A cada placa le corresponde un diafragma
anular y el centrado de ambos ha de ser exacto.
AJUSTE DEL
MICROSCOPIO
AJUSTE DEL
MICROSCOPIO
AJUSTE DEL
MICROSCOPIO
AJUSTE DEL
MICROSCOPIO
La
luz
incidente
atraviesa
un
diafragma anular, y la lente del
condensador focaliza un anillo circular
de luz sobre la muestra. La luz que
pasa sin obstculos a travs de la
muestra es focalizada por el objetivo
sobre el grueso anillo gris de la placa
de fase, que absorbe parte de la luz
directa y altera su fase en un cuarto
de longitud de onda. Si una muestra
refracta difracta la luz, se altera la
fase de algunas ondas lluminosas y
stas se redirigen a travs de la
delgada regin clara de la placa de
fase. Se recombinan las luces
refractada y no refractada en el plano
de la imagen para formar la imagen.
AJUSTE DEL
MICROSCOPIO
TRAYECTORIA DE LA LUZ EN L MICROSCOPIO DE
FASES
LIMITACIONES
Se puede convertir el microscopio normal en
uno de contraste de fases?