Cintica Microbiana

Reproduccin bacteriana
Fisin binaria

Una clula se divide en dos despus de

desarrollar una pared transversa.
Generalmente es asexual aunque en algunas
especies puede ser precedida de
conjugacin.

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Fisin Binaria

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Conjugacin Bacteriana
La transferencia de material gentico de una

clula a otra requiere contacto real. Se

realiza mediante la unin a travs de una
fimbria sexual (F).

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 Las clulas masculinas F contienen una

pieza circular de ADN llamada factor fertilidad

o F. Las clulas femeninas F- carecen de este
facto y son receptoras durante la
conjugacin.

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Otras formas de reproduccin bacteriana:

Esporas
Fragmentacin
Gemacin

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Reproduccin de levaduras:

Saccharomyces cerevisiae (levadura del pan) se pueden observar algunas

clulas gemando.
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Tomada de:Lim, D. 1998. Microbiology. Mc Graw-Hill. Estados Unidos

Germinacin de esporas de hongos

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Crecimiento Apical:

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Crecimiento Apical:

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Crecimiento
Se define como un incremento ordenado de los

principales constituyentes de un organismo.

Involucra sntesis de estructuras celulares, cidos
nucleicos, protenas y otros componentes celulares a
partir de nutrientes.
Todos los seres vivos toman nutrientes y excretan
productos de desecho.

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Fases de crecimiento.
Fase lag

Es un perodo de adaptacin, cuando un cultivo de m.o.

es llevado de un ambiente a otro.
Los m.o. sufren una reorganizacin tanto en su
velocidad de crecimiento como en sus constituyentes
macromoleculares.
Durante esta etapa la masa celular puede cambiar sin
cambiar el nmero de clulas.

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Fases de crecimiento.
Fase log exponencial

Es un perodo de balance o de estado estacionario en

el crecimiento, durante el cual la velocidad especfica
de crecimiento es constante.
La composicin qumica del medio de cultivo esta
cambiando debido a que los nutrientes se estn
consumiendo y productos metablicos son
producidos.

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Fases de crecimiento.
Fase estacionaria

Los nutrientes se agotan y productos txicos se

acumulan, crecimiento es ms despacio con un
nmero de clulas constante.
La masa total puede permanecer constante pero el
nmero de clulas puede descender.

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Fases de crecimiento.
Fase de decaimiento o muerte

Un gran nmero de clulas muere. Los nutrientes se

agotan y productos txicos se acumulan.

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Crecimiento...
Bajo condiciones exponenciales se describe:

dX/dt=X.. (1)
dN/dt=n.. (2)
donde:
X Concentracin de m.o. en g/l
N Concentracin de m.o. en clulas/l
t Tiempo
Velocidad especfica de crecimiento en h-1 (masa)
nVelocidad especfica de crecimiento en h-1 (nmero)

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Crecimiento...
dX/x=dt
Xt=X0et.(3)

Xt es la concentracin de m.o. en g/l en tiempo (t)

X0 es la concentracin inicial de m.o. en g/l
e es la base de logaritmo natural
Si la velocidad especfica de crecimiento es constante
lnXt=lnX0+ t .. (4)
La ec. 4 puede ser resuelta para el caso en el cual t=td, el tiempo
requerido para X2=2X1
td=ln2/0.693(5)
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La velocidad especfica de crecimiento es obtenida a

partir de la pendiente de una grfica de lnX vs tiempo

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Tiempo de generacin o duplicacin

Las bacterias generalmente se reproducen por fisin

binaria.
En este proceso una clula crece progresivamente
para posteriormente dividirse en dos clulas iguales.
El tiempo requerido para que la clula se divide (o
para que la poblacin de un organismo se duplique
en nmero) se conoce como tiempo de generacin o
duplicacin.

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Ejemplo de crecimiento exponencial

Tiempo

Nmero de
divisiones
0

Poblacin
n
(N02 )
1

Log10Nt

20

2 =2

0.301

40

2 =4

0.602

60

2 =8

0.903

80

2 =16

16

1.204

100

2 =32

32

1.505

120

2 =64

64

1.806

2 =1

0.000

El cultivo hipottico comienza con una clula con un tiempo de

generacin de 20 minutos

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Nmero de generaciones
N0=nmero inicial de la poblacin
Nt=nmero final de la poblacin en un tiempo t
n=nmero de generaciones en un tiempo t
Nt= N02n
logNt= logN0+ nlog2
n=(logNt- logN0) /log2
n=(logNt- logN0) /0.301

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Constante de velocidad media del crecimiento (k)

k es el nmero de generaciones por unidad de tiempo

(generaciones por hora)

k=n/t=(logNt-

logN0) /0.301t

Si n=1, tiempo medio de generacin o

duplicacin(g)
Nt= 2N0
k= (log 2N0 - logN0 )/0.301g
k=1/g
g=1/k

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Descripcin del crecimiento en hongos

filamentosos
Xt es la concentracin
de m.o. en g/l en
tiempo (t)
X0 es la concentracin
inicial de m.o. en g/l
Xmax
es
la
concentracin
mxima de m.o. en
g/l (t)
Velocidad especfica
de crecimiento en h-1
(masa)

X max

X max - X o
1
Xo

exp

- t

Ejemplo de cintica de crecimiento con diferentes

concentraciones de sustrato (glucosa) de Aspergillus niger
2
B io m a s s d ry w e ig ht, X (m g /c
)m

Larralde-Corona et al., (1997)

-1

20

1 20 g L

16

7 0 g L-1

12

3 00 g L-1

40 g L-1

4
0

1 0 gL-1

10

20

30

40

50

Time (h)

60

70

80

90

 Ecuacin de Monod

Describe la velocidad de crecimiento en relacin a la

concentracin de nutrientes.
max [S/Ks+S]
donde:
Velocidad especfica de crecimiento
max Velocidad mxima especfica de crecimiento
S Concentracin de sustrato
Ks Constante de afinidad del m.o. al sustrato

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Velocidad especfica de crecimiento

max
0.5max

Ks
Concentracin de Sustrato
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 Rendimiento celular

Expresa la masa celular obtenida o cantidad de producto por

unidad de masa o sustrato consumido
Yx/s = X/S,
Yp/s= P/S,

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Existen diferentes mtodos para medir

crecimiento:
Conteo directo al microscopio
Mtodo del nmero ms probable
Dilucin en placa
Turbidimetria
Peso seco
Actividad celular

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Determinacin de cantidades
usando cmaras de conteo
Se puede necesitar contar el nmero de

organismos en un volumen dado de lquido.

Este tipo de conteo est asociado con
pruebas bacteriolgicas o mdicas.
Existen varias cmaras diseadas para
contar precisamente clulas u organismos en
condiciones diversas.

Hemocitmetro o Cmara cuenta

glbulos
Este sistema tiene 2 reas de conteo
separadas, cada una debe contener de 0.1
mm3 de muestra cuando se cubre con un
cubre objetos especial.
reas de conteo

Cubre objetos especial

Un cubreobjetos

especial, grueso se
monta sobre dos barras
de cristal y esto forma
las dos cmaras.

Bar

Bar

Cuadrculas de conteo
Lneas finas en le piso de
la cmara ayudan con el
conteo celular.

El # clulas por ml =
Promedio del # de
clulas de los cuadros de
las esquinas x 104.

La transferencia de la suspensin
celular
se
hace
por
capilaridad
Llene la cmara con la

suspensin celular utilizando

una pipeta con punta fina
aplicndola sobre el rea
escavada de la cmara

Deje la suspensin entrar por

capilaridad
No ejercer presin durante el
llenado con presin

Cmara cuenta hongos de Howard

Fue diseada especialmente para contar

hongos y levaduras en un volumen dado de

alimento.
La estructura es similar a la des hemocitmetro
pero no tiene cuadrcula en el piso de la
cmara.
Un disco ocular de Howard en el ocular del
microscopio se usa para facilitar el conteo.

Cmara cuenta hongos de Howard

Cmara de conteo de SedgewickRafter

Consiste de un marco de bronce
o poliestireno rectangular pegado
a un portaobjetos y cubierto con
otro.
Esto crea una cmara de conteo
de 1 ml.
Esta cmara es usada en
laboratorios de limnologa para
contar plancton en 1 ml de
muestra de agua.

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Tiempo de generacin o duplicacin

Tdpromedio en bacterias:

15-20 o bien de 45-60.

Tdpromedio en levaduras:
90-120.
Tdpromedio en hongos:

60-90 o bien de 4-8 horas.

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 Crecimiento crptico

Se puede observar durante la fase estacionaria, en la

que se produce un medio complejo debido a lisis
celular a partir de la cual los m.o. pueden crecer
como en etapa exponencial.

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 Crecimiento sincronizado

Son poblaciones de clulas que estn en la misma

etapa de crecimiento. Se pierde la sincrona debido a
que las diferentes poblaciones no envejecen igual.
El crecimiento sincronizado puede ser obtenido
mediante la alteracin del ambiente (temperatura,o
nutrientes). Por ejemplo: Baja temperatura a que los
m.o. aumentan su talla pero no hay divisin, para
despus incrementar temperatura a la optima.

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Un quimostato permite mantener

la poblacin microbiana constante.
Consiste de un reservorio con
medio estril un regulador de flujo
que controla la adicin de medio
fresco al cultivo. El reservorio del
cultivo a su vez tiene paso a otro
recipiente que colecta el medio
agotado.

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