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MICROBIANAS
Objetivos que hay que alcanzar para conservar correctamente las cepas
microbianas en los laboratorios de microbiologa.
Que el cultivo a conservar sea puro, evitando que se produzcan
contaminaciones durante el proceso de conservacin.
Que durante el tiempo de conservacin sobrevivan al menos el 70-80% de
las clulas.
Que estas clulas permanezcan genticamente estables.
MTODOS DE ELECCIN O DE
CONSERVACIN A LARGO PLAZO.
Son los mejores porque en ellos se
paraliza el crecimiento de las
clulas microbianas, pero stas no
han muerto.
Se garantiza al mximo la
estabilidad gentica, por evitarse la
aparicin de generaciones
sucesivas.
Se congelan las clulas en suspensin en un lquido con un agente crioprotector y se guardan a temperaturas
inferiores a 0 C, con lo que el agua se congela
Este es el mejor mtodo de conservacin desde todos los puntos de vista, pero tiene el
inconveniente de requerir aparatos especiales
2. Velocidad en la
congelacin y
descongelacin: Es mejor
que las variaciones de la
temperatura sean
rpidas, tanto para la
congelacin como para la
descongelacin, por lo
que para descongelar
conviene poner las
clulas a 37C.
La liofilizacin se consigue
por sublimacin del hielo de
las clulas.
Para la liofilizacin se
recomiendan como
crioprotectores el inositol
para la mayora de las
bacterias y la leche
descremada para hongos
y actinomicetos
b)
Conservacin
por
liofilizacin.
Es un mtodo muy
recomendable por su comodidad
para el almacenamiento y para
el envo de las cepas, pues una
vez conseguidos los lifilos
pueden almacenarse a
temperatura ambiente (18C20C)
Tampoco se da crecimiento
en las clulas conservadas
por este mtodo, puesto
que se les ha quitado el
agua mediante la
liofilizacin, que es un
proceso suave
Tipo de microorganismo.
Condiciones de
almacenamiento.
Concentracin celular.
Factores que influyen
especficamente en la
eficacia de la
liofilizacin como
medio de conservacin.
Atmsfera de oxgeno
en el tubo.
Temperatura durante la
sublimacin.
Grado de deshidratacin
alcanzado.
MTODOS ALTERNATIVOS.
Son los que se utilizan cuando no se pueden emplear los mtodos de eleccin, bien
por carecer de los equipos necesarios, o bien porque la cepa microbiana no resiste los
tratamientos de la conservacin por estos mtodos.
La cepa microbiana
se guarda en forma
de cultivo activo en
el medio de cultivo
en el que ha
crecido.
MTODOS RESTRINGIDOS.
En este grupo se engloban mtodos no empleados habitualmente, pero a los que es necesario
recurrir a la hora de conservar grupos de microorganismos muy determinados que no resisten bien
la liofilizacin o la congelacin, como por ejemplo los gneros bacterianos spirillum, rhodospirillum,
etc.
Estos metodos se basan en la paralizacin del crecimiento por eliminacin del agua disponible para
las clulas.
a) Desecacin en papel de filtro.
b) Desecacin en suelo, arena, silicagel, etc.
c) Desecacin en bolitas de alginato
d) Desecacin en sal gorda para halobacterias.
Tambin es posible desecarlos por el procedimiento que se llama desecacin lquida (ldry) porque se utiliza para ello el liofilizador, pero sin que haya habido congelacin
previa de las clulas.
ste es un procedimiento
bastante eficaz.
c) Desecacin en
bolitas de alginato
Este es un mtodo
que se est
utilizando incluso
para la conservacin
de algas y clulas
vegetales.