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GNERO LEPTOSPIRA

MORFOLOGA

Bacterias Gram (-), flexibles, en forma de


espiral muy delgadas, 0,1mu por 6 - 20 um
de longitud. Con uno o dos ganchos en sus
extremos.
Presenta un par de flagelos axiales.
Son aerobias estrictas, de crecimiento lento.
Exigentes vitaminas B, c grasos
cadena larga, sales de NH4 y piruvato
de sodio.

Membrana

Cubierta externa

citoplasmtica

Filamento axial

Filamentos
axiales
Citoplasma
MC
Cubierta
externa

TAXONOMIA
Orden: Spirochaetales
Familia: Leptospiraceae
Gnero: Leptospira

Orden Spirochaetales
Gnero: Leptospira
Especies:

patgenas son :
25 serogrupos con
ms de 200 serovares
no patgenas

ESPECIES

Leptospira interrogans. Con ms de


225 serovariedades, agrupados en
serogrupos. Es PATGENA

Leptospira biflexa. APATGENA

El taxn bsico es la serovar, estn


agrupados en serogrupos. L
interrogans serovar pomona

El serogrupo, no es una subdivisin


taxonmica; tiene un valor prctico y
didctico.

Leptospiras:
Clasificacin Serolgica

Caractersticas de L. interrogans
poder patgeno,
resistencia a la 8-azaguanina,
resistencia al NaCl (1M),
crecimiento a baja temperatura (13 C),
presencia de lipasa
resistencia a los iones Cu
crecimiento en presencia de colorantes inhibidores como
el verde de malaquita , fucsina bsica.

Leptospiras:
clasificacin serolgica

Orden: Spirochaetales
Familia: Leptospiraceae
Gnero: Leptospira
Especie: L. interrogans
Existen ms de 225 serovares reconocidos de
acuerdo al criterio serolgico.

CLASIFICACIN SEROLGICA
Serogrupos y Serovariedades de L. interrogans
SEROGRUPO

SEROVAR

Icterohaemorrhagiae

Icterohaemorrhagiae
Copenhageni, Lai,
Zimbabwe

Hebdomadis

Hebdomadis, Julews
Kremastos

Automnalis

Automnalis, Fortbragg; Bim


Weerasinghe

Pyrogenes

Pyrogenes

Bataviae

Bataviae

Grippotyphosa

Grippotyphosa, Canalzonae
Ratnapura

Canicola

Canicola

Australis

Australis, Bratislava, Lora

Pomona

Pomona

CLASIFICACIN SEROLGICA
Serogrupos y Serovariedades de L. interrogans
SEROGRUPO

SEROVAR

Javanica

Javanica

Sejroe

Sejroe, Saxkoebing, Hardjo

Panama

Panama, Mangus

Cynopteri

Cynopteri

Djasiman

Djasiman

Sarmin

Sarmin

Mini

Mini, Georgia

Tarassovi

Tarassovi

Ballum

Ballum, Aroborea

Celledoni

Celledoni

Louisiana

Louisiana, Lanka

Ranarum

Ranarum

Manhao

Manhao

Shermani

Shermani

Hurstbridge

Hurstbridge

Leptospiras:
Clasificacin genotpica

Gnero Leptospira: reclasificadas


tomando como base estudios de ADN
Clasificacin genotpica: un nmero
de genomoespecies incluyen todas
las serovariedades de ambas, L.
interrogans y L. biflexa
(heterogeneidad gentica)

Genomoespecie
s y distribucin
de serogrupos

No crece en medios de cultivo comunes.


Temperatura ptima de incubacin: 2830C.
Aerobio estricto.
Movimientos: rotacin, flexin y traslacin.
Lbil al medio ambiente: muere por
exposicin al calor, luz, detergentes y
desinfectantes. Viable en aguas alcalinas
o suelo hmedo.

FACTORES DE VIRULENCIA
Incluyen:
Factores de adherencia asociados con
protenas de superficie (fibronectina y
colgeno)
Accin endotxica de los
lipooligosactidos (LOS)
Esfingomielinasa C
Fosfolipasa A
Otras citotoxinas?

Diagnstico de laboratorio

Las tcnicas se dividen en dos grupos:


Las que evidencian los anticuerpos producidos.
Las que evidencian al agente.

Tcnicas que evidencian los


anticuerpos producidos

Gnero especfico
Detectan anticuerpos anti-leptospira (IgM),
independientemente del serogrupo infectante.
Diagnstico temprano de la enfermedad.
Los resultados por estas tcnicas debern
confirmarse con la tcnica de MAT.

Grupo especficas
Microaglutinacin en tubo (MAT).

Tcnicas que evidencian los anticuerpos producidos

Tcnicas gnero especficas

ELISA
til para realizar screening.
til para diagnstico temprano. Detecta
infecciones recientes
Alta sensibilidad.
Carece de la especificidad del MAT (falsos +)

Tcnicas que evidencian los anticuerpos producidos


Tcnicas gnero especficas

Macroaglutinacin en placa con


antgeno termo-resistente (TR)

Antgeno TR: fraccin termo-resistente comn al


gnero Leptospira sp.
Se utiliza con frecuencia en caninos. Diagnstico
presuntivo, cualitativa.
Se pueden obtener resultados positivos al cuarto
da de la enfermedad.
Reaccin positiva se evidencia con una
aglutinacin.

Tcnicas que evidencian los anticuerpos producidos

Tcnicas grupo especficas

Microaglutinacin en tubo
(MAT)

Prueba de microaglutinacin (microaglutination


test). Tcnica de Martn y Petit.
Tcnica de referencia mundial.(Gold standard)
Se llega al diagnstico serolgico de la enfermedad.
Muestra de eleccin: suero libre de hemlisis, en la
dilucin correspondiente segn especie.

Tcnicas que evidencian los anticuerpos producidos


Tcnicas grupo especficas

Microaglutinacin en tubo (MAT)


Dilucin de prueba de los sueros

Se sugiere:
1/25 para animales silvestres y de laboratorio.
1/50 para humanos y felinos.
1/100 para caninos, porcinos, equinos, caprinos,
ovinos.
1/200 para bovinos.

Se enfrenta a antgenos vivos


(7 das en EMJH, 1-2108 leptospiras/ml).

Tcnicas que evidencian los anticuerpos producidos


Tcnicas grupo especficas

Microaglutinacin en tubo
(MAT)
Criterio de observacin
Se respeta como lmite de positividad de la
reaccin, la disminucin de 50% de leptospiras
libres en relacin al testigo.

El ttulo final est dado por la mayor dilucin de


suero capaz de aglutinar 50% o ms de las
leptospiras presentes en el campo microscpico.

Tcnicas que evidencian los anticuerpos producidos


Tcnicas grupo especficas

Microaglutinacin en tubo
(MAT)

En forma rutinaria
se utilizan los siguientes serovares:
Antgenos
a utilizar

Sueros humanos: representativos de todos los


serogrupos.
Sueros equinos, porcinos,
Sueros caninos:
bovinos, ovinos, caprinos:
Ballum castellonis
Ballum castellonis
Cancola cancola
Canicola canicola
Icterohaemorrhagiae
Icterohaemorrhagiae
icterohaemorrhagiae
icterohaemorrhagiae
Pomona pomona
Grippotyphosa
Pyrogenes pyrogenes
grippotyphosa
Pomona pomona
Sejroe wolf
Tarassovi tarasovi

Tcnicas que evidencian los anticuerpos producidos


Tcnicas grupo especficas

Microaglutinacin en tubo
(MAT)
Imagen en campo oscuro

Remisin de muestras segn el curso de la


enfermedad

Leptospiremia

ETAPA
1

Etapa
2

Ttulo de ATC

Etapa
3

Leptospiuria

1/6400

Etapa
2:
Etapa
Etapa3:
2:Etapa
Etapa 1:
1:
Etapa
3:
suero
orina
suero sangre
sangre
orina
orina
rganos
orina LCR
LCR
rganos
leche
rganos
fetos
rganos
leche
fetos

1/3200

1/1600
1/800
1/400

1/200

1/100
0

3
semanas

10

12

meses

14

AISLAMIENTO

Se cultivan en medios semislidos o


semilquidos que contenga suero; como los
medios de Fletcher, Stuart, Khortoff
Ellinghausen-Mc Cullough-Johnson-Harris
(EMJH o TA/80).
Albmina bovina, Tween 80, suero de conejo,
vitaminas, cidos grasos.
Inhibidores: 5-fluoracilo, antibiticos
Se incuban por perodos largos (tiempo de
generacin). 28-30C

DOI:10.1002/9780471729259.mc12e01s00

DIAGNSTICO

Examen directo:
Microscopio de campo oscuro.
Requiere 104 lepto/ml

Tinciones especiales mtodos de


impregnacin argntica.
Inmunofluorescencia directa.
Reaccin de polimerasa en cadena
(PCR)

Observacin microscpica:

Con condensador de campo oscuro.


Muy mvil, de distintas formas y tamaos.
Usualmente presenta forma de gancho en los
extremos.

Examen indirecto:

Serologa:
1) antgeno TR (macro), screening,
gnero especfica.
2) prueba MAT (micro), serogrupo
especfica.
3) ELISA (gnero especfica)

Inoculacin experimental:

Muestras filtradas: hamsters, cobayos

RECREACIONAL:
BAO, PESCA
NUTICA

AGUAS
Y
SUELOS
HMEDOS

INUNDACIONES

OCUPACIONAL:
TAREAS AGROPECUARIAS
POCEROS
MINEROS
SOLDADOS

VISCERAS
Y
CONTACTO
DIRECTO
CON
ORINA

VETERINARIOS
EMPLEADOS
FRIGORFICOS

CUIDADO DE
ANIMALES
ENFERMOS

ESTACIONAL. LIGADA A HBITOS


POBLACIONALES.
FOCOS EPIDMICOS

ESTACIONAL. LIGADA A SITUACIONES


CLIMTICAS EXCEPCIONALES
EPIDMICA

ANUAL O ESTACIONAL. CASOS


ESPORDICOS O FOCOS
EPIDMICOS
PROFESIONAL

ANUAL.
CASOS ESPORDICOS
PROFESIONAL
ANUAL.
CASOS ESPORDICOS
PROFESIONAL

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