REPBLICA BOLIVARIANA DE VENEZUELA

UNIVERSIDAD DEL ZULIA

FACULTAD DE MEDICINA
ASIGNATURA: BIOQUMICA

ENZIMAS Y
VITAMINAS

ENZIMAS
Naturaleza proteica
Actan a bajas concentraciones altamente
especficas
Disminuyen la energa de activacin
Aceleran las reacciones espontneas
No afectan la Ke de la reaccin
No afectan la energa libre de la reaccin

ENZIMAS
Protenas simples
Protenas conjugadas
Parte proteica

Apoenzima

Son codificadas genticamente

Tienen los niveles de organizacin
estructural de las protenas

Parte no
proteica

Cofactor

Holoenzima

ESTRUCTURA DE LAS ENZIMAS

Todas las enzimas poseen un sitio cataltico

Las reguladoras tienen estructura

cuaternaria
Subunidad cataltica
Subunidad alostrica (reguladora)

COFACTORES: parte no protica

Pueden ser:
Naturaleza
orgnica:
COENZIMAS

Naturaleza
inorgnica

Derivados de
vitaminas
hidrosolubles:

Iones
metlicos:

NAD++, FAD,
Tiamina P
P, B66 - P

+2, Cu+
+,
Fe+2
+2, Mg+2
+2
Se+2

RECICLABLES
Sustrato: sustancia (s) que reaccionan
para formar producto (s)

La enzima forma un complejo con el

sustrato: E S
La enzima transforma en radicales libres
a los sustratos y stos reaccionan en el
sitio cataltico para formar producto (s)
Luego la enzima se recupera para
participar en otra reaccin

EFECTO DE LAS ENZIMAS SOBRE LA ENERGIA

DE LA REACCIN
A
AA
AAA

Energa de activacin
(barrera energtica)

Liberacin de
energa til o
libre

EFECTO DE LAS ENZIMAS SOBRE LA ENERGIA

DE LA REACCIN

AA
AAA

Barrera energtica
DISMINUIDA

Las enzimas aceleran

las reacciones por
disminucin de
energa de activacin

En presencia
de enzima

Liberacin de
energa til o
libre
Las enzimas no
afectan la energa
libre de la
reaccin

ESPECIFICIDAD DE LAS ENZIMAS

Solo uno o muy pocos sustratos son
capaces de ingresar al sitio cataltico y
formar complejo E S
El sustrato, por sus grupos funcionales
y su estructura tridimensional, es
capaz de producir cambios
tridimensionales en el sitio cataltico y
formar E - S

E-S

MECANISMO DE ACCIN ENZIMTICO

A
B

Formacin de
radicales libres

E + A+B
E + A+B

A:B

Reaccin entre
radicales libres

A
B

E A:B
E A:B

A:B

Productos

E + A:B
E + A:B

REGULACIN ENZIMTICA

Estn organizadas en subunidad cataltica y

subunidad alostrica
Cuando los productos han alcanzado la suficiente
concentracin se unen al sitio alostrico
La unin Producto-Sitio alostrico afecta la
conformacin del sitio cataltico , evitando la
formacin de nuevo E-S
La modulacin alostrica puede ser negativa o
positiva

ENZIMAS ALOSTRICAS O REGULADORAS

E1

B
(-)

Enzima activa

E2

E3

DD
DD

Enzima inactiva

Subunidad
alostrica

Subunidad
alostrica

CLASIFICACIN DE LAS ENZIMAS

Se clasifican de acuerdo al tipo de

reacciones que catalizan
1
1

Oxido-Reductasas

2
2

Transferasas

3
3

Hidrolasas

4
4

Isomerasas

5
5

Liasas

6
6

Ligasas

OXIDO-REDUCTASAS
Hidrgeno (H)

Hidrogenin (H+)

+
+

+
+

Hidruro (H-)

+
+

OXIDACIN
1
1

Perder electrones

2
2

Perder tomos de hidrgeno

3
3

Ganar oxgeno (O2) o grupos OH

REDUCCIN

1
1

Ganar electrones

2
2

Ganar tomos de hidrgeno

3
3

Perder oxgenos (O2) o grupos OH

OXIDO-REDUCTASAS

Las oxido-reductasas son clasificadas en varios

subgrupos:
Deshidrogenasa anaerbicas
Deshidrogenasas aerobicas
Oxidasas
Peroxidasas
Catalasa
Glutation peroxidasa
Superoxido dismutasa

Oxigenasas

OXIDO-REDUCTASAS:
DESHIDROGENASAS
Transfieren tomos de hidrgenos o electrones de un
sustrato donador a un sustrato aceptor
A: H
Reducido

B:H

Oxidado

A
Oxidado

+
Reducido

Utilizan como coenzimas

NAD
FAD
El NAD es una coenzima que deriva de la vitamina B 3 (cido
nicotnico)
El FAD es una coenzima que deriva de la vitamina B 2
(ribofavina)

NAD

OXIDO-REDUCTASAS:
DESHIDROGENASAS

COFACTOR: NAD+/NADH+H+

Forma oxidada

Forma reducida

ACOPLAMIENTO ENTRE DESHIDROGENASAS

AERBIAS Y ANAERBIAS

:H
A:H

E1

Sustrato
reducido

NAD+

NADH + H+
E1: Deshidrogenasa
anaerobia

H
H

H
H

E2

E2(ox)

E3

E3(ox)

O2

H2O2

E2: Deshidrogenasa
anaerobia

E3:
Deshidrogenasa
aerobia

ACOPLAMIENTO ENTRE DESHIDROGENASAS

AERBIAS Y ANAERBIAS

:H
A:H

E1

Sustrato
reducido

NAD+

NADH + H+
E1: Deshidrogenasa
anaerobia

H
H

H
H

E2

E2(ox)

E3

E3(ox)

HO
H

E2: Deshidrogenasa
anaerobia

E3: oxidasa

OXIDO-REDUCTASAS
DESHIDROGENASA ANAERBIA

FLAVINA MONONUCLETIO (FMN) Y

FLAVINA ADENINA DINUCLETIDO (FAD)

Riboflavina (B2)
FMN

FAD

FAD

Flavina Adenina Dinucletido

Flavina Adenina Dinucletido

FADH2

FAD (Forma oxidada)

FAD (Forma oxidada)

FADH2 (Forma reducida)

FADH2 (Forma
reducida)

PEROXIDASAS: CATALASA

GLUTATION PEROXIDASA

SUPEROXIDO
DISMUTASA
Superoxido

Superoxido

Peroxido

Oxgeno

Peroxido de hidrgeno
(Agua oxigenada)

HIDROXILASAS

S
(Sustrato)

Hidroxilasa
(Cit P450)

S OH

TRANSFERASAS
Fosfotransferasas
(cinasas)

Metiltransferasas

Aminotransferasas

TRANSFERASAS: FOSFOTRANSFERASAS

CINASAS
Utilizan sustratos donador de
grupos fosfatos. Generalmente ATP
Son moduladas por hormonas
Son irreversibles

Glucosa + ATP

Glucocinasa

Glucosa 6 P + ADP

TRANSFERASAS: METILTRANSFERASAS

Transfieren grupos metilos ( CH33)

de un sustrato donador a un
aceptor
Dependen de coenzimas derivadas
del cido flico y la vitamina B12
12

TRANSFERASAS: METILTRANSFERASAS
COENZIMA: CIDO FLICO
cido Flico
(vitamina)

Tetrahidroflico
(FH4)
(forma activa)

Metil - FH4
(coenzima)
Serina
(fuente de
grupos metilos)

Cobalamina
(vitamina B12)

Hidroxicobalamina
Cianocobalamina
(forma activa)

Metiltransferasa

Metil
- FH4

FH4

Metil - B12
(coenzima)

TRANSFERASAS: METILTRANSFERASAS
COFACTOR: CIDO FLICO

Metiltransferasa

Metil B12

B12

TRANSFERASAS: AMINOTRANSFERASAS

- GLU-NH2
+

P - B6
- PIR

TRANSFERASAS: AMINOTRANSFERASAS

- KG
+

P - B6-NH2
- PIR

TRANSFERASAS: AMINOTRANSFERASAS

- KG
+

P - B6
- ALA-NH2

HIDROLASAS
Rompen por introduccin de una molcula de
H:O:H (agua) enlaces tipo C-C, C-O, C-N y
P-O:

Glucosdico (ter): Carbohidratos

Ester y Fosfodiester: Lpidos y cidos
nuclicos
Peptdico (amida): Protenas

HIDROLASAS
Glucosidasas
Rompen los enlaces alfa y beta glucosdicos por
introduccin de una molcula de agua (H2O)

HIDROLASAS
Lipasas
Rompen los enlaces tipo ster presentes en
lpidos como Triacilglicridos, fosfolpidos,
colesterol esterificado

HIDROLASAS
Lipasas

HIDROLASAS
Fosfatasas
Rompen los enlaces tipo ster del cido
fosfrico. Son la anttesis de las cinasas

Glucosa + ATP

Glucocinasa

Glucosa 6 P + ADP

HIDROLASAS
Peptidasas
Rompen los enlaces tipo peptdicos (amida) que unen los
aminocidos en una protena
Exopeptidasas
Endopeptidasas

H2O

HIDROLASAS
Nucleotidasas
Rompen los enlaces tipo
fosfodister de los
polinucletidos
Exonucleasa
Endonucleasas

HIDROLASAS
Nucleotidasas
Rompen los enlaces tipo fosfodister de los
polinucletidos
Exonucleasa
Endonucleasas

LIASAS

Rompen uniones carbono-carbono, carbononitrgeno, carbono-azufre por mtodos diferentes

a la hidrlisis, generan dobles enlaces

- Aldolasas: rompen enlace C C y generan un

aldehdo.

LIASAS

- Fosforilasa: rompen enlace glucosdico

usando cido fosfrico en lugar de H2O .

Glucgeno
fosforilasa

ISOMERASAS
Interconvierten ismeros, generalmente de forma reversible

Fosfoglucomutasa: Glucosa 6 fosfato Glucosa 1 fosfato

Fosfohexosaisomerasa: Glucosa 6 fosfato Fructosa 6 fosfato

LIGASAS

Catalizan la formacin de enlaces carbonocarbono,

carbono-oxgeno,
carbononitrgeno, carbono-azufre.

Estn acopladas a reacciones productoras

de energa como la hidrlisis del ATP

La mayor parte de las ligasas depende de

Biotina

LIGASAS
Acetil CoA
carboxilasa

Bicarbonato: Fuente de CO2

CINTICA
ENZIMTICA

Es el estudio de los diversos factores que

modifican la accin de las enzimas sobre
velocidad de las reacciones qumicas que
ocurren en los organismos vivos, tales
como:
pH
Temperatura
Tiempo
Concentracin de los sustratos
Concentracin de las enzimas
Concentracin y Tipo de Inhibidores

pH
Medida de acidez de un medio. Esta
dado por la proporcin entre [H++] y
[OH--] en un medio acuoso
Afecta la carga elctrica de la enzima
y el sustrato

E y S++ mxima interaccin: pH

ptimo

pH ptimo vara segn el tipo de

enzima

Efecto del pH
Jugo gstrico

Efecto del pH
Plasma

Temperatura
Aumento de la temperatura = Aumento de la
energa cintica
Aumenta la energa cintica, aumenta la
probabilidad de formacin de complejo E-S
Temperatura ptima: Mxima formacin de
complejos E-S, mxima velocidad
Temperaturas muy bajas disminuyen la energa
cintica de E y S y la formacin de complejo E-S
Temperaturas elevadas (extremas) aumentan la
energa cintica. Desnaturaliza inactiva la
enzima

Temperatura

TEMPERATURA CORPORAL: Normal: 36,5-37,5oC

Hipotermia: <35oC
Hipertermia: >37,5oC

Concentracin de sustrato
Aumento de la concentracin de sustrato
conduce a aumento en las probabilidad de
formacin del complejo E-S
Aumento de la concentracin de sustrato
conduce a saturacin de todos los sitios
catalticos logrndose la Vmax
Km (moles/lt) es la concentracin de sustrato
capaz de generar la mitad de la
Vmax (moles/min)
La saturacin ocurre cuando por ms sustrato
que se agregue, no cambia la Velocidad de la
reaccin

Concentracin de sustrato

Efecto del incremento progresivo de la concentracin del sustrato sobre la

velocidad de una reaccin catalizada por enzimas. Esta grfica donde la
curva es hiperblica se denomina grfica de Michaelis-Menten

INHIBIDORES: Inhibicin
competitiva

INHIBIDORES: Inhibicin no
competitiva

Concentracin de Enzima
Aumento de la concentracin de la enzima

Aumento del nmero de sitios catalticos

Aumento de la probabilidad de complejo E-S

El aumento de la concentracin de complejo ES conduce a aumento de la concentracin de

producto

Concentracin de enzima
Mayor disponibilidad de sitios catalticos

E+S

E-S

E-P

E+P

Concentracin de enzimas
Regulada genticamente
Induccin enzimtica: cuando los
genes que codifican la enzima se
expresan ms rpidamente. > sitios
catalticos
Represin enzimtica: cuando los
genes que codifican una enzima se
expresan menos rpidamente o son
silenciados
La expresin gentica es regulada por
molculas con actividad autocrina ,
paracrina y endocrina

Concentracin de enzima
Enzimas
EnzimasInducibles
Inducibles
Cuando su concentracin aumenta por
la induccin de un gen

Enzimas
Enzimasconstitutivas
constitutivas
Cuando son sintetizadas de forma
constante por la expresin de un gen

egulacin autocrina de las enzimas

-Los reguladores autocrinos son producidos por una
clula y actuan en la misma clula induciendo o
reprimiendo genes.
-Los reguladores autocrinos pueden regular la
actividad enzimtica por modificacin covalente,
regulando su eficiencia.
Molcula
autocrina

Modifica concentracin enzimtica

Modifica eficiencia enzimtica
Acta sobre la clula
que la genera

-Las prostaglandinas tiene actividad

autocrina, tambin se les denomina
autocoides.

egulacin paracrina de las enzimas

-Los reguladores paracrinos son producidos por un
tipo de clula y actan sobre otra clua vecina
diferente, por difusin.

Molcula
paracrina

Regulan expresin gentica

Regulan eficiencia enzimtica
por modificacin covalente
Clula endotelial

egulacin endocrina de las enzimas

-Es realizada por las HORMONAS
-Las hormonas pueden regular la expresin
gentica:
Aumentando
(induccin)
o
disminuyendo (represin) la [E]
-Las hormonas pueden regular la eficiencia de las
enzimas
activndolas
o
inactivndolas
por
modificacin covalente.

Molcula
endocrina

egulacin endocrina de las enzimas

-Las hormonas son producidas por las glndulas
endocrinas y viajan a travs de la sangre para
actuar en tejidos distantes.

Sangre

Tejidos distantes

aturaleza de las hormonas

-DERIVADAS DE UN (1) AA (AMINOCIDO):
Ej: Hormonas tiroideas T3-T4 y adrenalina.
Derivadas de Tirosina.
-ESTEROIDEAS: son derivados metablicos
del colesterol (27C). Ej: progesterona (21C),
cortisol (21C), testosterona (19C), estradiol
(18C).
-PROTICAS: son derivados de protenas.
Ej: insulina, glucagon

Naturaleza de las hormonas

ormonas: mecanismo de accin

-Unin a receptores de membrana
Hormonas de naturaleza protica (insulina,
glucagon), derivados de 1 aminocido
(catecolaminas)
-Unin a receptores citoslicos: de naturaleza
lipdica (esteroideas)
-Unin a receptores nucleares: derivadas de 1
aminocido (tiroideas)

ormonas: mecanismo de accin

UNIN A RECEPTORES CITOSLICOS

ormonas de unin a
eceptores citoslicos: 1,25 (OH)2 D3
1,25 (OH)2D3

Citosol
1,25(OH)2D3

1,25(OH)2D3

VDR

VDR

Ncleo

VDR RXR

Expresin
gentica

Protena

ormonas de unin a
eceptores citoslicos: glucocorticoides

ormonas de unin a receptores

ucleares: hormonas tiroideas

CINTICA ENZIMTICA:
REGULACIN
IN VIVO:
-

EFICIENCIA DE LA ENZIMA:
*Modificacin covalente:
-Fosforilacin Cinasa: E E-P

Activa
Inactiva

-Defosforilacin Fosfatasa: E-P E

Activa
Inactiva

odificacin Covalente: fosforilaci

E

(inactiva)

ATP

seal

(+)

Cinasa

ADP

E P(activa)

BB
B B

odificacin Covalente: fosforilaci

E

(activa)

ATP

seal

(+)

AA
AA
A

Cinasa

ADP

E P(inactiva)

CINTICA ENZIMTICA:
REGULACIN
MODIFICACIN COVALENTE:
-La enzima es fosforilada
-La enzima fosforilada puede ser activa o inactiva
-La fosforilacin la realiza una cinasa
-La cinasa es modulada por una hormona
-La enzima puede ser defosforilada por una fosfatasa
-La fosfatasa es modulada por otra hormona

ormonas: mecanismo de accin

-Unin a receptores de membrana
-Unin a receptores citoslicos
-Unin a receptores nucleares

ormonas: mecanismo de accin

UNIN A RECEPTORES DE MEMBRANA
-Pueden ser hormonas de naturaleza protica,
polipeptdica y oligopeptdica.
-Son solubles en H2O pero poco solubles en
lpidos, por lo que no pueden atravesar la
membrana celular y actuar en el interior de
la clula.

ormonas: mecanismo de accin

UNIN A RECEPTORES DE MEMBRANA
-Se unen a un receptor de membrana, que
siempre es de naturaleza protica
-El complejo H-R genera una seal que puede
activar o inactivar enzimas citoslicas
mediante modificacin covalente

ormonas: mecanismo de accin

UNIN A RECEPTORES DE MEMBRANA
ACOPLADOS A PROTENA G

Glucag
on

GTP
GDP

Degradacin de
triacilglicridos

Lipasa sensible a
hormonas (activa)
P

Adenilato
Ciclasa

ATP

Lipasa sensible a
hormonas

AMPc

PKA

Glucag
on

G
Inhibe formacin de
glucgeno

GLUCGENO SINTASA
(inactiva)
P

GTP
GDP

Adenilato
Ciclasa

ATP

Glucgeno
Sintasa cinasa (GSK)

AMPc

PKA

ormonas: mecanismo de accin

UNIN A RECEPTORES DE MEMBRANA CON
ACTIVIDAD TIROSIN CINASA

Mecanismo de accin de la insulina

Insulina se une a receptores de membrana

Regula enzimas mediante mecanismos no
genticos modificacin covalente
Regula enzimas mediante mecanismo
genticos
El receptor para insulina est ubicado en
hgado, msculo esqueltico y adipocito

Receptor de insulina

Es una enzima alostrica tipo

tirosina cinasa
Est formado por dos
subunidades alfa y dos
subunidades beta
Las subunidades alfa actan
como subunidad alostrica
(reguladora)
Las subunidades beta actan
como subunidades catalticas
La insulina acta como un
modulador alostrico positivo

Receptor de insulina

Dominio Rico en Cistena

Dominio Yuxtamembrana
Dominio
Cataltico/Regulador

P
P

Dominio COOH
terminal

Interaccin insulina-receptor

La unin de la insulina con la subunidad

alfa activa la subunidad beta

La subunidad beta se autofosforila en

sus restos de tirosina
La subunudad beta autofosforilada,
fosforila a su vez varias protenas
denominadas IRS-1, IRS-2, IRS-3, IRS4

Receptor de insulina

AUTOFOSFORILACIN

HOMOFOSFORILACIN

IRS-1

HETEROFOSFORILACIN

Sealizacin de insulina:
translocacin de glut-4

Hormonas: secrecin de insulina

Clula Beta en reposo
- 75 mV
K+

K
K+
+

PROINSULINA

Canal de Ca2+
voltaje
dependiente

INSULINA

2K

PPTIDO C

Bomba ATP
Na+-K+

3Na+
Canal de
goteo de K+

K+

2+
Ca
Ca2+ 2+
Ca
2+
Ca
2+
Ca
Ca2+ 2+
Ca Ca2+

Secrecin de Insulina: fase inica

Glucosa

Glut-2

Glucosa
2 Piruvato
2 Acetil CoA

K K+ +
38 ATP
K
+
-K75
+ 55
K+ mV
KmV
(-)
K+ K+K+ K+
K+ K+
+

2K+

Bomba ATP
Na+-K+

2+
Ca
Ca2+Ca2+
Ca2+
Ca2+

Canal de Ca2+
voltaje
dependiente

PROINSULINA

3Na+
Canal de
goteo de K+

PPTIDO C
INSULINA

Sangre

Secrecin de Insulina: fase no inica

Glut-2

CIDOS GRASOS

2K+

2+
Ca
Ca2+Ca2+
Ca2+
Ca2+

Bomba ATP
Na+-K+

Canal de Ca2+

PROINSULINA

3Na+
Canal de
goteo de K+

PPTIDO C
INSULINA

Sangre