Kromozomlara dayalı toksisite

testleri
• = Mutagenik aktivite
• = Genotoksisite (genotoksik aktivite)
• Mutagenik (genotoksik) bileşik
• Mutagenler potansiyel karsinogenlerdir.
 Mutagenlerin metabolik aktivasyonu

enzimler
AKTİF
PROMUTAGEN aktivasyon

MUTAGEN
ka
rac
iğe
r

DNA da değişim

MUTASYON
TUMOR
 Genotoksisite testleri

• Moleküler

• Gen

• Kromozom düzeyinde olabilir.

 Comet assay
• Elektroforezle nukleustan çıkan DNA parçalarını gözleme
• İsole nukleuslar gele konur
• DNA fragmenti varsa “comet tail” görülür.

– +
Comet assay
comet assay

Normal

DNA fragmentli
nukleus
Comet assay değerlendirmesi
 Comet assay –
computer analizi
 Ames test (Gen düzeyinde)

Bruce Ames (born 1928)

 Ames test
Mutagen

His– Reverse mutasyon His+

bacteri bacteri

Histidin Normal
İçeren Normal
besiyerinde
besiyeri besiyeri
ölürler
 Ames test
Negative
0
SPONTAN
kontrol REVERTANTS

CO
MP
O UN
D
TEST GENOTOKSİSİTE
BİLEŞİĞİ
TAYİNİ

CO
MU NFI
R
CO TAG ME
MP EN D
O U IC
Positive TEST CONTROLU
ND

kontrol
Ames test sonucu
Ames test – otomatik
değerlendirme
 Kromozomal testler
• Mikronukleus testi
– Mikronukleus – asentrik ve delesyon parçaları

• Kromozom anormallik frekansı

– Lab. Hayvanları, lökosit kültürü, soğan kökü vb.

• SCE – sister kromatid değişimi

Mikronukleus testi
 Kromozom analizi
Kromozom anormalikleri Sonuç

% 2’den az Normal

%2–4 Sınır değerler

% 4’den fazla Mutagenik

 Sister Kromatid Değişimi

Normal kromozom SCE

Yüksek SCE frekansı – yüksek mutagenik activite.

TUNEL
Apoptotik hücrelerde TUNEL
TUNEL
 Kanser
sınır
tamir normal
hücre

mutagen mutagen

normal İlk İkinci

hücre mutasyon mutasyon

Bölünen
apoptosis tümör
hücresi
 Karsinogenite testleri

• Laboratuar testleri
– Hayvanlarda

– Kültür hücrelerinde in vitro transformasyon

– Epidemiyolojik çalışmalar
 IARC database
• International Agency
for Research of Cancer

• Direct connection to „Monographs“:

http://monographs.iarc.fr/index.php
 IARC sınıflaması

• Grup 1: Karsinogenik
• Grup 2A: Olası karsinogenik
• Grup 2B: Olası karsinogenik
• Grup 3: Karsinogenite kesinleşmemiş
• Grup 4:Olası karsinogenik değil