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FISIOLOGA

MICROBIANA

DOCENTE
T.M. Claudia Castillo K.

Objetivo
s
Conocer

los requerimientos
nutricionales de las bacterias.
Captacin de los nutrientes.
Conocer el crecimiento
bacteriano.
Cultivo de los microorganismos.

FISIOLOGA BACTERIANA
La fisiologa bacteriana comprende el estudio
de las funciones realizadas por estas.
Las bacterias son muy eficientes
fisiolgicamente, sintetizan en forma muy
rpida sus componentes celulares, siendo la
mayora autosuficientes, a pesar de su
simpleza estructural.
En la bacteria se desencadenan una serie de
procesos qumicos, que en conjunto
constituyen

METABOLISMO BACTERIANO

NUTRICIN MICROBIANA

Nutrientes:

sustancias que se
emplean en la biosntesis y
produccin de energa, necesarios
para el crecimiento microbiano.

Macronutrientes
En

forma de cationes:

Potasio (K+)
actividad

enzimtica.
Sntesis de protenas.

Calcio (Ca++)
Termorresistencia

de las endosporas.

Macronutrientes
Hierro (Fe++ y Fe+++)
Forma

parte de los citocromos.


Cofactor de enzimas y protenas
transportadoras de electrones.

Magnesio (Mg++)
Cofactor

enzimtico.
Forma complejos con el ATP.
Estabiliza los ribosomas y las membranas
celulares.

Macronutrientes
Macro

elementos que son


componentes de hidratos de carbono,
lpidos, protenas y cidos nucleicos.

Carbono (C)
Oxgeno (O)
Hidrgeno (H)
Nitrgeno (N)
Azufre (S)
Fsforo (P)

Macronutrientes
Carbono

(C)

Necesario para la construccin de


molculas orgnicas.
Las molculas que contienen carbono,
aportan a su vez hidrgeno y oxgeno.
Utilizadas como fuente de energa
(reacciones de xido-reduccin).

Macronutrientes
Nitrgeno

(N)

Necesario para sintetizar aminocidos,


purinas, pirimidinas, algunos hidratos de
carbono y lpidos, cofactores de enzimas
y otras sustancias.
Fsforo

(P)

Presente en los cidos nucleicos,


fosfolpidos, nucletidos como el ATP,
varios cofactores, algunas protenas y
otros componentes celulares.
Fuente es el fosfato inorgnico.

Macronutrientes
Azufre

(S)

Necesario para la sntesis de sustancias


como los aminocidos cistena y
metionina, algunos hidratos de carbono,
biotina y tiamina.
Fuente de azufre es el sulfato.

Macronutrientes
Dixido

de Carbono (CO2)

No aporta Hidrgeno ni energa.


Los organismos pueden agruparse
dependiendo de la fuente de carbono
en:
Usan el CO2 como
ORGANISMOS

AUTTROFOS
:

HETERTROFOS

fuente de energa

Usan nutrientes
Orgnicos como
Fuente de carbono
y energa

FOTOSINTTICOS.

Macronutrientes
Tipos

nutricionales

Los microorganismos pueden clasificarse


dependiendo de la fuente de Hidrgeno
o electrones:
LITTROFOS

Obtienen electrones
O hidrgeno de
Compuestos inorgnicos.

ORGANTROFOS

Utilizan sustancias
orgnicas como
Fuente de
Electrones.

Macronutrientes
Tipos

nutricionales

El metabolismo es realizado mediante la


utilizacin de dos fuentes de energa:
energa libre de las oxidaciones
qumicas y radiacin.
Obtienen energa a
partir de la
oxidacin de
compuestos
orgnicos o
inorgnicos.
QUIMITROFOS

Emplean la luz
como fuente
de energa.
FOTTROFOS

TIPOS NUTRICIONALES
QUIMITROFOS
ORGANTROFOS
HETERTROFOS
Protozoos, hongos,
Bacterias no fotosintticas
(mayora de microorganismos
Patgenos)

QUIMITROFOS
LITTROFOS
AUTTROFOS
Bacterias oxidantes del azufre,
Hidrgeno, nitrificantes,
Oxidantes del hierro.

FOTTROFOS
LITTROFOS

AUTTROFOS

Algas, bacterias prpuras


Y verdes del azufre,
Cianobacterias.

FOTTROFOS
ORGANTROFOS
HETERTROFOS
Bacterias prpuras y
verdes no sulfreas

Micronutrientes
Elementos

traza:

Manganeso, cinc, cobalto, molibdeno,


nquel y cobre.
Necesarios

en muy pequeas cantidades.


Son parte de enzimas y cofactores.
Facilitan la catlisis de reacciones.
Ayudan a mantener la estructura de la
membrana.

Factores de crecimiento
Son

compuestos orgnicos necesarios


para los componentes celulares, que
no pueden ser sintetizados por los
microorganismos.
Aminocidos
Sntesis

de protenas.

Purinas y pirimidinas
Sntesis

de cidos nucleicos.

Vitaminas
Cofactores

enzimticos.

CAPTACIN DE NUTRIENTES
Funciones de la membrana citoplasmtica

CAPTACIN DE NUTRIENTES
Son

mecanismos
especficos.
Transporte de
nutrientes en contra
de un gradiente de
concentracin.
Los nutrientes tienen
que atravesar la
membrana
plasmtica.

CAPTACIN DE NUTRIENTES

Desplazamiento

de las molculas de
un lugar de mayor concentracin a
uno de menor concentracin.
Necesario un gradiente de concentracin
elevado.
H2O, O2, CO2, atraviesan fcilmente.

Realizada

gracias a protenas de
membrana
permeasas.
Concentraciones inferiores de la
molcula que difunde.
La velocidad aumenta con el gradiente.

CAPTACIN DE NUTRIENTES

Necesario

cuando en el exterior es
menor la concentracin, en contra de
un gradiente de concentracin.
Utiliza protenas transportadoras.
Usa energa metablica y es capaz
de concentrar sustancias.
Presentes en bacterias

Gradiente de protones generado durante


el transporte de electrones para facilitar el
transporte activo.
Sistema de transporte de una sustancia en
un sentido
uniporte.
Sistema de transporte combinado de dos
sustancias
simporte.
Sistema de transporte combinado en que
las sustancias se desplazan en direcciones
opuestas
antiporte.

Transporte

de molculas al interior
de la clula despus de modificarse
qumicamente.
Transporte de azcares como
glucosa, manosa y fructosa, que son
fosforilados durante el proceso de
transporte por el sistema
fosfotransferasa.

Sistema fosfotransferasa en Escherichia coli

Crecimiento bacteriano
Es

el incremento de todos los


constituyentes en un
microorganismo.
Es el cambio en la poblacin
bacteriana que ocurre a travs de la
multiplicacin de las clulas.

Crecimiento bacteriano
La

curva de crecimiento se basa en:

un cultivo microbiano.
en un medio lquido.
sistema cerrado.
nutrientes entregados en la fase inicial
es mayor que los residuos de la fase
final.

Crecimiento bacteriano

Fase de
Fase
latencia exponencial

Fase
estacionaria

Fase de
muerte

Crecimiento bacteriano

Fase de latencia (lag):


Introduccin de microorganismos a un medio
de cultivo.
No hay divisin celular inmediata.
Estn replicando su DNA.
No hay incremento de la poblacin.
La clula est sintetizando nuevos
componentes.
Depende de la juventud de las clulas, del
medio en que se cultivan o traspasan, etc.
Aproximadamente 4 horas.

Crecimiento bacteriano
Fase

exponencial o logartmica:

Los microorganismos crecen y se


dividen hasta su nivel mximo.
Despus de 6 horas.
La poblacin es uniforme, qumica y
fisiolgicamente.
En esta fase se realizan los estudios
bioqumicos y fisiolgicos de las
colonias.

Crecimiento bacteriano

Fase estacionaria:
Se llega a una concentracin de 10 9 clulas
por mL.
El nmero total de microorganismos viables
permanece constante.
Existe una limitacin de los nutrientes.
Algunas bacterias responden con cambios
como: formacin de endosporas, reduccin de
tamao.
Las bacterias se vuelven ms resistentes.

Crecimiento bacteriano
Fase

de muerte:

Disminucin del nmero de clulas


viables.
Producto de que no existe multiplicacin
celular.
Esta fase es logartmica, producida en
condiciones de laboratorio.

Factores ambientales sobre el


crecimiento bacteriano
El

crecimiento est influenciado por


factores fsicos y qumicos del
ambiente en que se encuentran.
Factores como: efecto de solutos y la
actividad del agua, pH, temperatura,
nivel de oxgeno, presin y radiacin.

Solutos y actividad del agua

Cuando la osmolaridad del entorno se


vuelve ms baja que la del citoplasma.
Reduccin por cuerpos de inclusin.
Apertura de canales sensibles a la presin
osmtica.
Osmotolerantes
pueden crecer en una
amplia concentracin osmtica.
Halfilas
necesitan niveles elevados de
cloruro de sodio, condiciones hipertnicas.

pH
Medida

de la actividad de los iones


de hidrgeno de una solucin.
Acidfilos
pH entre 0 5,5.
Neutrfilos
pH entre 5,5 8,0.
Alcalfilos
pH entre 8,0 11,5
Se utilizan buffer para amortiguar el pH
de algunas sustancias.

Temperatura
Al ser microorganismos unicelulares, estn
dependiendo de la T ambiental.
Al aumentar la T, aumenta el
metabolismo y a su vez el crecimiento
bacteriano
T ptima
Desnaturalizacin de protenas, deterioro
de membranas citoplasmticas, inhibicin
de crecimiento
T altas
La funcin se afecta, pero la estructura ni
composicin qumica
T bajas

Temperatura
Reacciones enzimticas
En aumento constante
Reacciones enzimticas
A mx. velocidad

Gelificacin de membrana,
Transporte lento,
No hay crecimiento.

Desnaturalizacin proteica,
Colapso de membrana,
Lisis trmica.

Temperatura
Las

temperaturas cardinales
dependen de:
Cada microorganismo
Factores ambientales como pH y
nutrientes.
T ptima puede variar de 0 75 C
T crecimiento de -20 100 C, con una
variacin de 30

Temperatura
mnima

ptima

mxima

Psicrfilos

0 C

15 C

20 C

Bacterias
ocenicas

Psicrtofos

0 C

20 30 C

35 C

Bacterias
deterioro de
alim. Refrig.

Mesfilos

15 -20 C 20 45 C

45 C

Mayora de
bacterias
patgenas

Termfilos

45 C

55 65 C

sup. a 65 C

Bacterias,
hongos y algas

Hipertermfilos

55 C

80 113 C

113 C

Bacterias
aisladas del
suelo marino

Temperatura

Concentracin de oxgeno

Aerobios
organismo que necesita O2 para
crecer.
Anaerobio
organismo que puede crecer en
ausencia de O2.
Anaerobio facultativo
no requieren O2 para
crecer, pero lo hacen mejor en su presencia.
Anaerobio aerotolerante
pueden crecer con
presencia o ausencia de O2.
Anaerobio estricto
no crecen en presencia de
O2
Microaerfilos
necesitan niveles de O2
bajos (2-10%)

Concentracin de oxgeno

Anaerobio
Aerobio
estricto

Anaerobio
facultativo

Microaerfilo

Anaerobio
aerotolerante

Presin
No

afecta a microorganismos de la
superficie terrestre.
Presin de 1 atmsfera.
En el ocano puede alcanzar 600
110 atm, y T es de 2 3 C.
Barotolerantes
un aumento de
la presin les afecta negativamente.
Barfilos
crecen a presiones
elevadas.

Factores ambientales sobre el


crecimiento bacteriano

Medios de cultivo
Preparacin

lquida o slida utilizada


para el crecimiento, transporte o
mantenimiento de microorganismos.
Debe poseer nutrientes esenciales
segn la especie que se quiere cultivar.
Los requerimientos reflejan el ambiente
natural en que se encuentran.

Medios de cultivo

Medios sintticos

componentes conocidos.
Utilizados en investigacin.

Medios complejos

Para bacterias exigentes.


Composicin qumica exacta se desconoce.
Contienen peptonas, extracto de carne y de levadura.
ej.: caldo nutritivo, agar Mac -conkey, etc.

Medios selectivos

Favorecen el crecimiento de microorganismos


particulares.

Medios diferenciales

Permite identificacin tentativa de bacterias.


Ej.: agar sangre