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FACULTAD DE

INGENIERA
NUTRICIN BACTERIANA
Blgo.Mblgo. Eterio ALVA MUOZ
Curso: Microbiologa General
Especialidad: Ingeniera
Agroindustrial

Metabolismo Bacteriano

Conjunto de reacciones bioqumicas catablicas y


anablicas, que transforman las sustancias nutritivas
para obtener energa.
Anabolismo: reacciones de sntesis.
Catabolismo: degradacin de compuestos orgnicos.
Reacciones Endorganicas.

Reacciones Exorganicas.

Energa
La Energa celular se obtiene de reacciones redox y
se conserva en compuestos ricos en energa.
Oxidacin: prdida de electrones por parte de una substancia.

Reduccin: ganancia de electrones.

El proceso metablico comienza en el ambiente celular externo con la


hidrlisis de grandes macromolculas por parte de enzimas especficas.
Las molculas de menor tamao as obtenidas (monosacridos, pptidos cortos
y cidos grasos) son transportadas luego a travs de las membranas celulares
hacia el interior del citoplasma por medio de unos mecanismos de transporte
(activos o pasivos) especficos de cada metabolito.

CARBONO.

Los hidratos de carbono constituyen en cuanto a masa los productos


predominantes de la fotosintesis vegetal. Constituyen al mismo tiempo los
nutrientes mas extendidos de la mayora de microorganismos, por lo que a
partir de ahora consideraremos la glucosa como el sustrato del metabolismo
celular.

La respiracin aerobia logra convertir los seis tomos de carbono de la


glucosa en C02 y H20 adems de energa, mientras que los metabolitos
finales de la fermentacin son compuestos de dos y tres tomos de carbono.

ENERGA.
Para poder desempear los procesos metablicos, las bacterias, como todos
los seres vivos deben producir y almacenar energa para luego poder
reutilizarla.
El proceso general de obtencin y consumo de energa puede sintetizarse
como sigue:

Las bacterias producen energa a partir de la glucosa a travs de los


siguientes procesos, enumerados por orden creciente de eficiencia:
fermentacin, respiracin anaerobia (en ambos casos en ausencia de oxgeno)
o respiracin aerobia.

Para obtener energa, las bacterias pueden valerse de diferentes


mecanismos:
A)Respiracin aerbica (Oxidacin): Ocurre en presencia de oxgeno, es
decir en aerobiosis. El sustrato es la glucosa u otro azcar y el aceptor final
de electrones es el oxgeno molecular.
B) Respiracin anaerbica: Ocurre en ausencia de oxgeno. El sustrato es la
glucosa u otros azcares y los aceptores finales de electrones son iones
inorgnicos.
C)Fermentacin: es un proceso que ocurre en ausencia de oxgeno. El
sustrato es la glucosa u otros azcares y los aceptores finales de electrones
son molculas orgnicas.

Tipos Nutricionales
Tipo

Fuente de
energa

Fuente de
carbono

Ejemplos

Fotoautotrofas

Luz

CO2

Algas y
cianobacterias

Fotoheterotrofas

Luz

Compuestos
orgnicos

Algas y bacterias
fotosintticas

Quimioautotrofas o
Litotrofas

Qumica

Compuesto
inorgnicos: H2,
NH3, NO2, H2S,
CO2

Pocas bacterias

Quimioheterotrofas o
Heterotrofas

Qumica

Compuesto
La mayora de
orgnicos: glucosa bacterias

Segn la especie bacteriana y en un proceso conocido como


fermentacin, el cido pirvico producido por gluclisis es
convertido posteriormente en diversos productos metablicos
finales.

NUTRICIN Y CULTIVO
DE
MICROORGANIMOS

USO DE NUTRIENTES
GENERACIN DE MATERIAL CELULAR
MANUTENCIN DE ACTIVIDAD

ENZIMTICA Y DE TRANSPORTE
PRODUCCIN DE ENERGA

COMPOSICIN QUMICA DE
MICROORGANISMOS
AGUA: 80 90% (FORMAS

VEGETATIVAS)
MATERIA SECA:

MACROMOLCULAS
(PROTENAS, CIDOS NUCLEICOS,
LPIDOS, POLISACRIDOS)
PRECURSORES DE MACROMOLCULAS

1.- Requerimientos nutricionales

Macronutrientes (g/L o mg/L)

1. Carbono: forma parte de aminocidos, hidratos de carbono y lpidos.


a) Utilizan compuestos orgnicos como fuente de carbono: hetertrofos
b) Utilizan CO2 como fuente de carbono: auttrofos

2. Nitrgeno: forma parte de aminocidos, bases pricas y pirimidnicas; algunos hidratos de


carbono y lpidos.
a) Compuestos orgnicos: aminocidos
b) Compuestos inorgnicos: NH4+ , NO3c) Fijacin de nitrgeno atmosfrico
3. Fsforo: forma parte de cidos nucleicos, fosfolpidos, cofactores, algunas protenas y LPS.
a) Compuestos inorgnicos: fosfatos
4. Azufre: forma parte de aminocidos (cis, met); coenzimas (biotina, CoA).
a) Compuestos orgnicos: aminocidos
b) Compuestos inorgnicos: Sulfatos (SO4 2-)
5. Otros macronutrientes:

K+: cofactor y activadores de enzimas


Ca2+: termorresistencia esporas, cofactor de enzimas
Mg2+: cofactor de enzimas, ribosomas
Na+: Estabilidad de halfilos
Fe2+ y Fe3+: citocromos, protenas, cofactores.

UTILIZACIN DE CARBONO
AUTOTROFOS: USAN CO2 COMO NICA
O PRINCIPAL FUENTE DE C
HETEROTOFOS: USAN SUSTANCIAS
ORGNICAS PREFORMADAS
REDUCIDAS

2.- Medios de cultivo: composicin y preparacin

Micronutrientes (g/L)
a)

Cobalto: sntesis de la vitamina B12

b)

Cinc: papel estructural en muchas enzimas (ADN y ARN polimerasas,


protenas de unin a ADN)

c)

Molibdeno: necesario para la actividad de algunas enzimas (Flavoprotenas,


nitrogenasa, nitratorreductasa, sulfito oxidasa)

d)

Manganeso: activador de muchas enzimas

e)

Cobre: grupo prosttico de enzimas respiratorias

Factores de crecimiento
a)

Aminocidos

b)

Bases pricas y pirimidnicas

c)

Vitaminas:
- p-aminobenzoico. cido flico. cidos nucleicos
- Biotina (B8): cidos grasos
- Niacina: NAD
- Riboflavina: FAD y FMN
- Piridoxina (B6): transformaciones de aa
- Tiamina (B1)
- Cobalamina (B12): Sntesis de desoxirribosa

CULTIVO DE MICROORGANISMOS

Laboratorio

Medio de cultivo

Medio de Cultivo:
Medio que proporcione substancias nutritivas para los
microorganismos y que les permita desarrollarse, puede
ser considerado como tal.

Table 6.3

CULTIVOS PUROS
OBTENCIN DE COLONIAS AISLADAS
PLACAS DE PETRI
MEDIOS SLIDOS: AGAR AL 1,5%
UN ORGANISMO DA ORIGEN A UNA

COLONIA

SIEMBRA DE MICROORGANISMOS
EN PLACA POR ESTRA
EN PLACA EN SUPERFICIE O POR

EXTENSIN
EN PROFUNDIDAD O POR VERTIDO

PLACA DE PETRI

Siembra por estra o


agotamiento

Obtencin de cultivos puros


Siembra por agotamiento

Martes

Aislamiento de microorganismos en placa.

3.2. Diluciones seriadas y siembra en placa

0.1 ml

0.1 ml

Tcnica de siembra en superficie

1.: Colocar el inculo en la placa de Petri

4: Extender el inculo en la placa

2, 3: Esterilizar el asa de vidrio

Lunes

Resiembra de bacterias en tubo de agar


inclinado

1.- Esterilizar el asa


de siembra a la llama
del mechero

3.- Tomar muestra del


microorganismo con el
asa, flamear el tubo y
tapar

4.- Tomar el tubo con


medio
estril,
destapar y flamear
la boca

6.- Esterilizar el asa


de siembra a la llama
del mechero

2.- Destapar el tubo con


microorganismo
y
flamear la boca, sin soltar
el tapn

5.- Introducir el asa


con
el
microorganismo hasta
el fondo y deslizar en
zig-zag

7.- Flamear la boca


del tubo y tapar

Formulacin
La

formulacin tiene que ver con los


aspectos cuantitativos de los medios
establecer las concentraciones de cada
componente a ser utilizadas.

Optimizacin

1.
2.

3.
4.

Pueden ocurrir situaciones en las cuales sea


imperativo la optimizacin de los medios de cultivo.
Podemos mencionar las siguientes:
Existencia de limitaciones nutricionales ocultas
(microelementos y factores de crecimiento)
Uso de medios con exceso respecto de los
requerimientos nutricionales del mo que pueden
causar inhibicin del crecimiento.
Ensayo de sustancias estimulantes, activadoras e
inhibidoras del crecimiento y formacin del producto.
Empleo de fuentes nutricionales no convencionales.

Diseo, Formulacin, Optimizacin


de medios de cultivo

Diseo: Eleccin de los componentes


necesarios para lograr el crecimiento y la
formacin de productos

Formulacin: Proporciones, concentraciones de


cada componente.

Optimizacin: Encontrar la mejor formulacin


para lograr el objetivo (mx biomasa, producto,
etc.)

Agar Sangre
Extracto de corazn y peptonas 20g
NaCl
5g
Agar
15g
Agua destilada
1000ml
Aadir 50-80 ml de sangre de cordero

Es un medio de cultivo general que permite el


crecimiento de gran nmero de microorganismos.
Se emplea para determinar las reacciones de hemlisis

-hemlisis: lisis parcial de los glbulos rojos,


se forma un halo verdoso alrededor de la
colonia.
-hemlisis: lisis completa de los glbulos
rojos, aparece una zona transparente alrededor
de la colonia.
-hemlisis: no actan sobre los glbulos rojos,
no forman ningn halo.

Martes

Aislamiento y recuento de microorganismos mesofilos del suelo.

1 gr tierra
1 ml

Diluciones
decimales
1 ml

N= C . D-1 . i-1
1 ml

N= n de unidades formadoras de
colonias.
C= n de colonias por placa.
D= n de dilucin (10-3, 10-4 10-5).
i= inculo (0,2 ml).

1 ml

9 ml

9 ml

9 ml

9 ml

9 ml

10-1

10-2

10-3

10-4

10-5

0,2ml

Incubar a 28C en posicin


invertida, durante 4 das.

Contar placas
colonias

con

300-30

Miercoles

.- Observacin de las colonias de microorganismos


viables.

Observacin microscpica de los hongos y actinomicetos .

Penicillium sp.

Aspergillus sp.

Alternaria alternata.

Streptomyces sp.

Scharomyces cerevisiae.

Jueves

Aislamiento de microorganismos mesfilos del suelo.


Determinacin de U.F.C.

N= C . D-1 . i-1

Observacin de las colonias


microorganismos viables.

de

N= n de unidades formadoras
de colonias.
C= n de colonias por placa.
D= n de dilucin (10-3, 10-4
10-5).
i= inculo (0,2 ml).

J.2.3. Observacin microscpica hongos y actinomicetos presentes en


el suelo.

Penicillium sp.

Aspergillus sp.

Streptomyces sp.

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