UN BIORREACTOR

Es un recipiente o sistema que

mantiene
un
ambiente
biolgicamente activo En el que se
lleva acabo un proceso qumico que
involucra organismos o sustancias
bioqumicamente activas
El proceso puede ser aerbico o
anaerbico

QUE ES UN INSTRUMENTO BIOLOGICO

Es todo aquello que tiene C,H,O,N en su composicin que participa del bioproceso.
Para que el bioproceso se lleve a cabo con xito , los instrumentos biolgicos
deben tener ciertos cuidados especficos
1.- Debe haber una distribucin uniforme del microorganismo en el sustrato.
2.-Se debe mantener constante y homognea la temperatura.
3.- Prevenir la Sedimentacin y la Floculacin .
4.- Mantener el cultivo puro .

a) SUSTRATO O MEDIO
Podemos llamar sustrato a todo lo que esta
dentro del contenedor (biorreactor) en el se
encontraran inmersos los microorganismos y
los nutrientes que esto necesiten.
Es la preparacin artificial , solida ,
semislida o liquida que suministra al
microorganismo cada una de las Sustancias
fundamentales,
Fuente
de
energa
y
condiciones ambientales adecuadas para la
sntesis y mantenimiento de su protoplasma

De acuerdo a su
consistencia
1. MEDIOS LIQUIDOS :
Son los que se presentan en este estado , denominndose por
esta razn caldos.
El medio lquido ms utilizado es el llamado caldo nutritivo
COMPUESTO:
Extracto de carne

peptona
Agua

Se utiliza fundamentalmente cuando se pretende la obtencin de

una suspensin bacteriana de una determinado concentracin
No permite el aislamiento de colonias

2. MEDIOS SOLIDOS:
Permite el aislamiento y observacin de
colonias
Se preparan a partir de los medios
lquidos, agregndoles un agente
Gelificante
Los mas utilizados son la gelatina y el
agar

 Gelatina
Es una protena animal obtenida de los huesos por
hidrlisis del colgeno
Es degradado, es hidrolizada, por la mayora de
las bacterias (termina convertido en medio liquido)
Es limitado por que la temperatura de incubacin
no puede ser mayor a 22C, los cultivos slidos a
temperaturas mas altas resultan inviables
No puede utilizarse temperaturas de 37C que es
la optima de crecimiento para muchos
microorganismos

 Agar-Agar
Polmero de azcares obtenido de algas
marinas (obtenido de la pared celular)
Formado principalmente por galactosa con un
grupo sulfato
Forma un gel firme entre 32 y 39 C y no se
funde por debajo de 85 C , funde a 90C y se
solidifica una vez fundido alrededor de los
45C
No es toxico para las bacterias ni degradado
por estas

3. MEDIOS SEMISLIDOS

Se preparan a parte de los medios lquidos,

agregando un agente solidificante en una
proporcin menor que para preparar medios
solidos

Uno de sus usos es la investigacin de la

movilidad de bacterias

Segn su Origen

Naturales
Preparados a partir de sustancias naturales de origen
animal o vegetal como; extractos de tejidos o
infusiones
Leche, suero, macerado de maz, extractos de carne
son aptos para el cultivo de Quimiorganotrofos

Sintticos
Son los medios que contienen una composicin
qumica definida cuali y cuantitativamente
Se usan para cultivar fototrofos y quimiolitrotofos

Semisintticos
Son los sintticos a los que se le aade factores de
crecimiento bajo. Por ejemplo: Extracto de levadura

SEGUN SU
FUNCIN

Medios Comunes

Poseen los componentes mnimos para que pueda

producirse el crecimiento de bacterias
El medio mas conocido es AGAR NUTRITIVO O AGAR
COMUN
Ejemplos : Agar Columbia

Medios de Enriquecimiento
Adems de presentar las sustancias nutritivas, incorporan
una serie de factores indispensables para los
microorganismos exigentes
Este enriquecimiento se hace por adicin de sangre, suero
de leche, huevo, bilis, etc.

Medios
Selectivo
s

Medios
Inhibidore
s
Medios
Diferenciale
s

el crecimiento de ciertas bacterias

contenidas
en
una
poblacin
microbiana. El fundamento de estos
medios
consiste
en
facilitar
nutricionalmente el crecimiento de
una poblacin microbiana especfica.
La selectividad se logra alterando las
condiciones fsicas del cultivo o con el
uso
de
compuestos
qumicos
Cuando
las sustancias
aadidas
a un
inhibidores.
medio
selectivo impiden totalmente el
crecimiento
de
una
poblacin
microbiana se denomina Inhibidor. Se
podran considerar como una variante
mas restrictiva de los medios selectivos.
Se consiguen por adicin de sustancias
microbianas o cualquier otra que inhiba
completamente el desarrollo de una
Se utilizan
para poner en evidencia
poblacin
determinada.
caractersticas bioqumicas que ayuden a
diferenciar gnero o especies. La adicin
de azcar fermentable o un sustrato
metabolizable se utiliza para este fin.
Ejem:
-Medio MacConkey
- Medio C.L.E.D

cualidad
especfica
que
puede
servirnos para reconocer la identidad
de un microorganismo. Estos medios
han
de
poseer
los
elementos
necesarios
para
asegurar
el
crecimiento de los microorganismos,
el sustrato especfico que vaya a ser
metabolizado y el indicador que nos
muestre el resultado. Ejem:
-Medios
CPS-ID3 una ogran UrilineID
Sirven
para obtener
cantidad
(Biomerieux)
de
clulas
a
partir
de
un
microorganismo ya aislado. Se emplean
en la obtencin de vacunas, en la
investigacin y en la industria. Los
Se utilizan
una cepa
que,lapor
medios para
msconservar
adecuados
para
diversas
razonessuelen
nos ser
interese
mantener.
multiplicacin
lquidos.
Fundamentalmente
se
utilizan
como
controles de calidad de las pruebas y
reactivos utilizados en el Laboratorio de
Microbiologa. Se pueden conservar las cepas
de tres formas:
-Haciendo pases peridicos de placa a placa.
-Mediante liofilizacin de una suspensin
bacteriana.
-Congelando las cepas en leche descremada

Medios de
Identificaci
n
Medios de
Multiplica
cin
Medios de
Conservaci
n

Medios de Transporte

Se usan para el transporte de muestras

clnicas
que
no
pueden
sembrarse
inmediatamente. Su utilizacin debe hacerse
introduciendo la torunda con la que se
obtuvo la muestra en el interior del medio
(generalmente en un tubo). Ejem:
-Medios Stuart-Amies
-Medio Cay-Blair

Medios de cultivo
ms comunes
Agar
Nutritiv
o

Agar
Sangre

Agar
Sangre

Este medio es bastante

bueno para el cultivo de
grmenes que no
presentan exigencias
particulares. No es
diferencial.
Es un medio
enriquecido

que se utiliza para la

investigacin de los
diversos tipos de
hemlisis. Se utiliza para
el crecimiento de
Es un
medio destinado
estreptococos.
para el aislamiento de
Neisserias (gonococos y
meningococos) y
Haemophilus, pero en l
pueden crecer muchos
otros microorganismos
existentes.

Agar
MacCon
key

Agar
C.L.E.D

Agar S.S

Agar
Hektoen

Es un medio utilizado
para el aislamiento e
identificacin de
enterobacterias.
Est recomendado
para el recuento e
identificacin
presuntiva de los
microorganismos de las
vas urinarias.
Es un medio selectivo
empleado para el
aislamiento de
Salmonella y Shigella.
Es doblemente
diferencial.
Es un medio ms
diferencial y menos
selectivo que el agar
SS. Se utiliza para
facilitar el aislamiento
de las enterobacterias.

a.

NUTRIENTES
1. Elementos energticos y Constitutivos:

Macroelement
os (g/l)

Fuente de
Carbono

Puede ser CO2 compuestos

carbonados
orgnicos.
Se
utilizan en la construccin de
innumerables
molculas
necesarias para la clula. Los
ms comunes son:
-hexosas
como
glucosa,
fructosa, galactosa
-pentosas como arabinosa,
xilosa, ramnosa
-disacridos como lactosa,
sacarosa, maltosa;
-trisacridos como rafinosa
-polisacridos como almidn,
glucgeno
-alcoholes
como
glicerol,
sorbitol, manitol
-glucsidos como salicina, y
esculina.

Fuente
de
Nitrgen
o

Muchos organismos son auttrofos

respecto de la fuente de nitrgeno y
pueden crecer utilizando molculas
sencillas como NO3-, NH3 N2. El
nitrgeno
es
metabolizado
para
proveer protenas, cidos nucleicos y
polmeros
de
pared.
Otros
microorganismos pueden incorporar
nitrgeno en forma de aminocidos,
bases pricas o pirimdicas.
En ciertos medios de cultivo para
quimioorganotrofos,
el
aporte
de
nitrgeno
es
realizado
por
las
peptonas, que son los productos de la
hidrlisis cida o enzimtica de
protenas de origen animal o vegetal
(carne, soja, casena, gelatina, harina
de maz y girasol). Esos productos de
hidrlisis
pueden
tener
longitud
variable, desde aminocidos, hasta
dipptidos, tripptidos, polipptidos,
albumosas, proteosas

 La Hidrlisis cida puede ser

realizada con HCl H2SO4 y
presenta las
siguientes
- El triptfano
se destruye desventajas:
- Se pierde el 10% de vitaminas presentes
- Desaparecen casi completamente los
polipptidos
Se prefiere la hidrlisis enzimtica que
emplea diferentes proteasas actuando a pH
especficos, ej: papana a pH 6.5, tripsina a
pH 8.5, pepsina a pH 2.
Las peptonas son fuente de nitrgeno y, en
ausencia de hidratos de carbono en el
medio de cultivo complejo, cumplen la
funcin de fuente de carbono y energa.
Aportan vitaminas del grupo B, trazas de
metales y fosfatos que dan carcter
buffer al medio.
Las peptonas de origen vegetal pueden
aportar carbohidratos fermentables.

Microelementos o trazas (mg ):

Frecuentemente esenciales:
Esenciales en casos especiales
Inhibidores del crecimiento:
Factores de crecimiento:

Extracto de carne:
Extracto de levadura:
Extracto de malta:

MICROORGANISMOS:

Bacterias:
Hongos:


-Bacterias cido lcteas:
Gram + anaerobias
Lactobacillus
Streptococcus
Lactococcus

CONTROL INFORMTICO PARA

BIORREACTORES

Complejidad de la maza reaccionante.

Concentraciones relativamente bajas
del sustrato y el producto.
Condiciones suaves de pH y
temperatura.
Restriccin de la fase acuosa.
Crecimiento de la masa microbioana.
Capacidad de los microorganismos de
sintetiza sus propios catalizadores.

TEMPERATURA

Presin
Osmtica
Presencia
de oxgeno

Luz

La mayoria de las bacterias en 0.1 a 1%

NaCl.

Aerobios estrictos
Microaerfilos
Anaerobios obligados
Anaerobios areotolerantes
Anaerobio facultativos

Es importante para los microorganismos

fotosintticos.

PH

Actividad de
agua y
humedad
Potencial
redox

Relacin entre la presin del

vapor de agua en el
substrato del cultivo, y el
vapor de agua del agua
pura.
Capacidad del substrato
para aceptar o donar.

SOFTWARES PARA EL DESARROLLO Y USO DE

BIORREACTORES

MicroCode Studio
Visual Basic
6.0
MatLab 0.7
ROSA+ DE LA MARCA
BIONET
BioPat MODDE