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Instituto Politécnico Nacional

Unidad Profesional Interdisciplinaria de

Biotecnología

“Determinación de la velocidad de transferencia de oxigeno”

Profesores:

Ing. José León Rangel Ramírez

Integrantes:

Cadena Taffoya Deyerid

Escamilla Hernández Diego

Mariano Granados Reyes Sadami Jafet

Mejía Murillo Andrew Vergara Gatica Ángel David

M. en I. Agustín Altamirano Segovia

Grupo: 3BM3

Velocidad de Transferencia de Oxígeno
Velocidad de Transferencia de Oxígeno

Velocidad de Transferencia de Oxígeno

OBJETIVOS

OBJETIVOS  Determinar la velocidad de transferencia de oxígeno, el coeficiente volumétrico de transferencia de oxígeno

Determinar la velocidad de transferencia de oxígeno, el coeficiente volumétrico de transferencia de oxígeno y la fracción de gas retenido global en diferentes tipos de biorreactores.

EQUIPO Y MATERIALES

EQUIPO Y MATERIALES  BIORREACTOR DE TANQUE AGITADO  BIORREACTOR DE COLUMNA DE BURBUJEO  BIORREACTOR
EQUIPO Y MATERIALES  BIORREACTOR DE TANQUE AGITADO  BIORREACTOR DE COLUMNA DE BURBUJEO  BIORREACTOR

BIORREACTOR DE TANQUE AGITADO

BIORREACTOR DE COLUMNA DE BURBUJEO

BIORREACTOR AIRLIFT

 BIORREACTOR DE COLUMNA DE BURBUJEO  BIORREACTOR AIRLIFT

ELECTRODO Y MEDIDOR DE OXIGENO DISUELTO

EQUIPO Y MATERIALES  BIORREACTOR DE TANQUE AGITADO  BIORREACTOR DE COLUMNA DE BURBUJEO  BIORREACTOR

Condiciones de operación

TANQUE AGITADO:

300 y 700 rpm 0.3, 0.6, 1.0, 1.2, 1.5 vvm

COLUMNA DE BURBUJEO Y AIRLIFT:

0.3, 0.6, 1.0, 1.2, 1.5 vvm

Condiciones de operación  TANQUE AGITADO:  300 y 700 rpm  0.3, 0.6, 1.0, 1.2,

Reactivos

Reactivos  SULFITO DE SODIO  SULFATO DE COBRE PREHIDRATADO  SOLUCIÓN DE YODO 0.1 N

SULFITO DE SODIO SULFATO DE COBRE PREHIDRATADO SOLUCIÓN DE YODO 0.1 N SOLUCIÓN DE TIOSULFATO DE SODIO 0.1 N

PREPARACION DE SOLUCIONES

Para medio litro:

Solución de Sulfito de Sodio 0.4M:

500 ml de agua 25.2 g Na 2 SO 3

Solución de Sulfato de Cobre:

100 ml de agua 0.374 g CuSO 4 5H 2 O

PREPARACION DE SOLUCIONES  Para medio litro:  Solución de Sulfito de Sodio 0.4M:  500

AGREGAR

AGREGAR

DESARROLLO EXPERIMENTAL

Solución de

Sulfito de

Sodio 0.4M

Solución de

sulfato de

cobre

AGREGAR AGREGAR DESARROLLO EXPERIMENTAL Solución de Sulfito de Sodio 0.4M Solución de sulfato de cobre MÉTODO
MÉTODO DEL SULFITO pH 7.2 con Muestra de Tiosulfato Muestra Volumen Con HCl 3mL y de
MÉTODO DEL SULFITO
pH 7.2 con
Muestra de
Tiosulfato
Muestra
Volumen
Con
HCl
3mL y
de Sodio
después de
gastado vs
condiciones
vertirla en
0.1N
5min y
Tiempo
distintas
matraz con
repetir el
10 mL de
proceso
solución de
Yodo 0.1N
AJUSTAR
TOMAR
TITULAR
TOMAR
GRAFICAR
REPETIR

SUSPENDER

CALIBRAR

SUMINISTRAR

LLENAR

MÉTODO DINÁMICO

Electrodo de

oxígeno

disuelto

El biorreactor

con agua de la

llave al

volumen

deseado

Nitrógeno

para disminuir

la

concentración

El suministro

de N 2 cuando

la

concentración

oscile entre 0-

10%

SUSPENDER CALIBRAR SUMINISTRAR LLENAR MÉTODO DINÁMICO Electrodo de oxígeno disuelto El biorreactor con agua de la
SUSPENDER CALIBRAR SUMINISTRAR LLENAR MÉTODO DINÁMICO Electrodo de oxígeno disuelto El biorreactor con agua de la
Oxígeno Cuando la registrando el concentración % de oscile entre saturación 90-100% cada 15s SUMINISTRAR CONCLUIR
Oxígeno
Cuando la
registrando el
concentración
% de
oscile entre
saturación
90-100%
cada 15s
SUMINISTRAR
CONCLUIR

FRACCIÓN DE GAS RETENIDO GLOBAL

(Vol f -Vol i )/Vol f
(Vol f -Vol i )/Vol f

MEDIR EL NIVEL DEL LIQUIDO SIN AIREAR

MEDIR EL NIVEL DEL LIQUIDO CON AIREADO PARA CADA CONDICIÓN DE OPERACIÓN

DETERMINA R EL VALOR MEDIANTE LA FORMULA DEL MÉTODO DE EXPANSIÓN

FRACCIÓN DE GAS RETENIDO GLOBAL (Vol f -Vol i )/Vol f MEDIR EL NIVEL DEL LIQUIDO
FRACCIÓN DE GAS RETENIDO GLOBAL (Vol f -Vol i )/Vol f MEDIR EL NIVEL DEL LIQUIDO

INTRODUCCIÓN

INTRODUCCIÓN  Aireación : Proceso mediante el cual el agua se pone en contacto íntimo con

Aireación : Proceso mediante el cual el agua se pone en contacto íntimo con el aire para modificar las concentraciones de sustancias volátiles.

Transferencia de gases: Fenómeno físico mediante el cual, moléculas de un gas son intercambiadas en la interface gas líquido

La teoría más utilizada para explicar el mecanismo de transferencia de masa en el intercambio gas-líquido es la teoría de la doble capa de Whitman (1923). El modelo se basa en la existencia de dos capas: una de líquido y otra de gas en la interfase gas-líquido. Estas dos fases presentan una resistencia al paso de las moléculas de gas de una fase a otra.

LIQUIDO GAS
LIQUIDO
GAS

Etapas de la transferencia de Oxígeno desde las burbujas de gas hacia la célula

Etapas:

(i) Del seno de la burbuja a una capa interna de gas (ii) Difusión en la capa interna de gas. (iii) Difusión a través de una capa externa de líquido que rodea a la burbuja (iv) Transferencia al seno del líquido (v) Difusión a través de la capa de líquido que rodea a los microorganismos ¡Etapa limitante! (vi) Difusión en el interior de los microorganismos (vii) Reacción del oxigeno con el microorganismo

Etapas de la transferencia de Oxígeno desde las burbujas de gas hacia la célula Etapas: (i)

SISTEMAS DE OXIGENACIÓN ARTIFICIAL

SISTEMAS DE OXIGENACIÓN ARTIFICIAL  DIFUSIÓN DE AIRE COMPRIMIDO  DIFUSIÓN DE AIRE COMPRIMIDO A PROFUNDIDAD

DIFUSIÓN DE AIRE COMPRIMIDO

DIFUSIÓN DE AIRE COMPRIMIDO A PROFUNDIDAD CON AYUDA DE AGITACIÓN MECÁNICA

AIREACIÓN MECÁNICA SUPERFICIAL

El K L a

El K a  Es el producto de dos parámetros: “ k “es el coeficiente de

Es el producto de dos parámetros: “k L “es el coeficiente de transferencia de oxígeno en la interface líquido-gas, mientras que “a” representa la razón de área superficial de burbujas con respecto al volumen total de agua.

El valor de kLa, y por lo tanto el grado de transferencia de oxígeno desde el seno del líquido hasta las células o microorganismos en cultivo, depende del diseño del biorreactor y de las condiciones de operación del sistema de cultivo: flujo de aire, volumen del líquido, régimen de agitación, etc.

 Disminuyen el kLa: La viscosidad y el volumen del líquido  Aumentan el kLa :

Disminuyen el kLa:

La viscosidad y el volumen del líquido

Aumentan el kLa: el área de transferencia, la agitación y la presencia de dispositivos que aumenten una, la otra, o ambas.

La diferencia (C*-C) se le conoce como el déficit de oxígeno. Es de destacar que el valor de C* se puede calcular usando la ley de Henry y varía con la temperatura y la presión parcial de oxígeno. (Sinclair, 1987)

Velocidad de transferencia de oxígeno

 Donde:
Donde:

Correlaciones de transferencia de masa

Correlaciones de transferencia de masa En general hay dos aproximaciones para evaluar k y a: Calculando

En general hay dos aproximaciones para evaluar k L y a:

Calculando con correlaciones empíricas y con mediciones experimentales

Método del sulfito

Es un método para determinar K L a en ausencia de microorganismos.

 

1.-Agregar al biorreactor la

4.-Poner a funcionar el biorreactor de acuerdo a las condiciones de operación
4.-Poner a funcionar el biorreactor de acuerdo a las condiciones de operación
4.-Poner a funcionar el biorreactor de acuerdo a las condiciones de operación

4.-Poner a funcionar el

biorreactor de acuerdo a

las condiciones de operación

solución de sulfito de sodio a 0,4 M

 
1.-Agregar al biorreactor la 4.-Poner a funcionar el biorreactor de acuerdo a las condiciones de operación
1.-Agregar al biorreactor la 4.-Poner a funcionar el biorreactor de acuerdo a las condiciones de operación

5.-Tomar una muestra de 3 ml y verter

8.-Hacer una gráfica del volumen gastado de tiosulfato de sodio en función del tiempo
8.-Hacer una gráfica del volumen gastado de tiosulfato de sodio en función del tiempo
8.-Hacer una gráfica del volumen gastado de tiosulfato de sodio en función del tiempo

8.-Hacer una gráfica del

volumen gastado de

tiosulfato de sodio en función del tiempo

inmediatamente 1 ml a cada uno de los matraces con 10 ml de yodo

 
 
Método del sulfito Es un método para determinar K a en ausencia de microorganismos. 1.-Agregar al

Se basa en que el Na 2 SO 3 , en presencia de Cu ++ o Co ++ , reacciona rápidamente con el O 2 disuelto en el seno del líquido.

Una vez que determine la velocidad de transferencia de oxigeno, cambiar las condiciones de operación y repetir el procedimiento

Reacciones

Se toma una muestra para determinar la concentración del ión sulfito que no reaccionó mediante otra
Se toma una muestra para determinar la concentración del ión sulfito
que no reaccionó mediante otra reacción con solución de Yodo.
El Yodo que no reaccionó se cuantifica
titulándolo con Tiosulfato de sodio

Titulació

Para n calcular los valores de VTO y de K L A, bajo condiciones constantes, se toman muestras

del biorreactor a intervalos de tiempo agregando una solución con exceso de Yodo (I 2 )

Titulació Para n calcular los valores de VTO y de K A , bajo condiciones constantes,

para transformar rápidamente el sulfito residual de las muestras a sulfato.

2 Na 2 SO 3 + 2 I 2 + 2 H 2 O

2 Na 2 SO 4 + 4 HI

El Yodo residual que no reaccionó, se valora con tiosulfato de sodio (Na 2 S 2 O 3 ) valorado en presencia de almidón como indicador, tomando nota del el volumen gastado de tiosulfato.

4 Na 2 S 2 O 3 + 2 I 2

2 Na 2 S 4 O 6 + 4 NaI

Velocidad de consumo de SO3 = Velocidad de transferencia de Oxígeno

La velocidad de oxidación del sulfito es proporcional a la velocidad de

transferencia de Oxí eno

Método Dinámico para determinar el KLA

Método Dinámico para determinar el K LA en este método solo es necesario medir la concentración

en este método solo es necesario medir la concentración de oxigeno en el biorreactor a lo largo de tiempo determinado.

Cambios en la concentracion de oxigeno disuelto

cálculos

EJEMPLO:Un fermentador agitado de 20L contiene un cultivo de Bacillus thuringiensis a 30°C que se usa para la producción de un bioinsecticida. El k L a es determinado usando el método dinámico.

cálculos EJEMPLO:Un fermentador agitado de 20L contiene un cultivo de Bacillus thuringiensis a 30°C que se

El flujo de aire se apaga por unos minutos bajando el nivel de oxígeno disuelto y después se reconecta. Cuando el estado estacionario se alcanza el oxígeno disuelto marca 78% de saturación de aire. Se obtienen los siguientes resultados:

T 0 = 5s T f =15s Concentracion de oxigeno1= 50% Concentracion de oxigeno2=66%

Correlación empírica

Correlación empírica  P  k a  2.0  10   V  

 P  k L a 2.0 10 3   V  

0.7

0.2

u G

k L a – coeficiente de masa combinada (s -1 )

P – Potencia disipada por el agitador (W) V – Volumen de fluido (m 3 ) u G – Velocidad superficial del gas (ms -1 ) – Flujo

volumétrico del gas dividido entre area seccional del reactor

Tiene limitantes y se prefiere igualar condiciones del fermentador durante operación normal

Método de Balance de Oxígeno

N A

N A

1       F g p AG F g p AG 
1
 




F g p AG
F g p AG






T
T
V L  




i
0
 




1
F g p AG
F g p AG






RV L   T 

T


i
0

El método de balance de oxígeno en estado estacionario es el método más confiable para medir k L a

y permite la determinación a partir de una sola medición y depende de que se mida en forma exacta la composición de gas, flujo, presión y temperatura

d

i

t

d

i

Valores de la constante de gas ideal

Valores de la constante de gas ideal

Ley de Henry

Ley de Henry Aplicando la ley de Henry, se llega a demostrar que para el caso

Aplicando la ley de Henry, se llega a demostrar que para el caso de la película líquida se cumple lo siguiente:

Ley de Henry Aplicando la ley de Henry, se llega a demostrar que para el caso

Mientras que para la película gaseosa se cumple lo siguiente:

Ley de Henry Aplicando la ley de Henry, se llega a demostrar que para el caso

Las ecuaciones anteriormente mencionadas, sirven para conocer cual será la resistencia que limite la velocidad de transferencia de masa (con base en el sistema- gas líquido).

Ley de Henry

* AL
*
AL

p p HC

AG

T AG

Donde p AG – Presión parcial del componente A en el gas

p T – Presión total del gas γ AG – Fracción molar de A en el gas H – Constante de Henry C* - Solubilidad del componente A en el líquido

Solubilidad del Oxígeno

Solubilidad del oxígeno en soluciones acuosas a 25°C y

1atm
1atm

Solubilidad de oxígeno en soluciones acuosas de azúcar bajo 1atm de presión

Fracción de Gas Retenido (ε)

Fracción de Gas Retenido (ε)  La fracción de gas retenido de una dispersión gas-líquido es

La fracción de gas retenido de una dispersión gas-líquido es un parámetro importante en los procesos aerobios, porque junto con el diámetro de las burbujas, determina el área interfacial específica, entre las fases gaseosa y líquida, y por lo tanto también influye directamente sobre la velocidad de transferencia de oxígeno

AIS: Área interfacial dividida por el volumen de una de las fases o de la suma de ambas.

Tamaño promedio de burbujas(evitar coalescencia) es constante mayor fraccion de gas retenido y mayor transferencia de oxigeno

 Tamaño promedio de burbujas(evitar coalescencia) es constante mayor fraccion de gas retenido y mayor transferencia

Si se aumenta la concentración de electrolitos disueltos se inhibe la coalescencia

Influye la presencia de proteinas, alcoholes y surfactantes

Importante Transferencia de oxigeno disuelto en aire , el oxigeno molecular seria consumido en pocos segundos por la baja solubilidad de el oxigeno en agua

(ε) en biorreactores

(ε) en biorreactores  Biorreactores de columna mayor (ε)  Biorreactores airlift disminuyen (ε) al aumentar

Biorreactores de columna mayor (ε)

Biorreactores airlift disminuyen (ε) al aumentar la velocidad de circulacion del liquido , la transferencia de masa cambia en el proceso debido a que el cambio interfacial y las concentraciones de oxigeno por cambios de altura

Efecto de solutos. Correlación empírica para corregir la solubilidad del oxígeno en presencia de cationes, aniones y azúcares (Quicker et al.)

 log 10  



C

*

AL0

0.5



C

*

AL

2

H i z i C iL

Efecto de solutos. Correlación empírica para corregir la solubilidad del oxígeno en presencia de cationes, aniones

K j C jL

  • i j

Donde:

C * AL0 – Solubilidad del Oxígeno sin solutos (molm -3 )

C * AL – Solubilidad del oxígeno (molm -3 ) H i – Constante del componente iónico i (m 3 mol -1 ) z i – Valencia del componente iónico i

Patrón de flujo en biorreactores aireados en función de la velocidad de agitación y el flujo

Patrón de flujo en biorreactores aireados en función de la velocidad de agitación y el flujo

DQO y DBO

La demanda bioquímica de oxígeno (DBO) es una prueba usada para la determinación de los requerimientos
La demanda bioquímica de
oxígeno (DBO) es una prueba
usada para la determinación
de los requerimientos de
oxígeno para la degradación
bioquímica de la materia
orgánica en las aguas
municipales, industriales y en
general residuales
La demanda química de
oxígeno (DQO) determina la
cantidad de oxígeno requerido
para oxidar la materia orgánica
en una muestra de agua
residual, bajo condiciones
específicas de agente
oxidante, temperatura y
tiempo.

Si la relación (DBO5/DQO)<0,2 entonces hablamos de unos vertidos de naturaleza industrial, poco biodegradables y son convenientes los tratamientos físico-químicos.

Si la relación (DBO5/DQO)>0,5 entonces hablamos de unos vertidos de naturaleza urbana, o clasificables como urbanos y tanto más biodegradables, conforme esa relación sea mayor. Estas aguas residuales, puede ser tratadas mediante tratamientos biológicos.

Velocidad de consumo de O 2

dC L  Q O 2 X dt
dC L
 Q O 2 X
dt

Velocidad de consumo de oxígeno para distintas células

Velocidad de consumo de oxígeno para distintas células

BIBLIOGRAFÍA

http://

BIBLIOGRAFÍA  <a href=http:// www.ptolomeo.unam.mx:8080/xmlui/bitstream/handle/132.248.52.100/3316/zaragozaperez. pdf?sequence=1http://www.bvsde.paho.org/bvsacd/scan2/05862/05862-11.pdf http://www.smbb.com.mx/congresos%20smbb/morelia07/TRABAJOS/Area_V/Orales/OV-6.pdf  Vant Riet, K. 1991. Basic bioreactor design. Mercel Dekker, Inc. MX.  Wang, D .I .C ., Cooney, C. L, Demain, A. D., Dunill, P., Humphrey, A. E., Lilly, M. D. 1978. Fermentation and enzyme technology. John Wiley and Sons. ... /Determinacion%20de ...http ://bioprocesos.unq.edu.ar/ dialnet.unirioja.es/descarga/articulo/4776883.pdf  Eliana Guevara López, Diseño, construcción y caracterización hidrodinámica de un biorreactor multifuncional, Tesis para ingeniero en alimentos, Huajuapan de León, 2004. SDM. (2012). Principios de agitación de fluidos. 14/03/16, de SDM Sitio web: http ://www.controlvi.com/ /SDM-principios-de-agitacion... ...  M.C. Ma. Luisa Colina Irezabal. (2011). Mezclado de alimentos fluidos. 14/03/16, de UAM Sitio web: http://sgpwe.izt.uam.mx/ /uami/mlci /mezclado_fluidos.pdf ... " id="pdf-obj-38-7" src="pdf-obj-38-7.jpg">

Wang, D .I .C ., Cooney, C. L, Demain, A. D., Dunill, P., Humphrey, A. E., Lilly, M. D. 1978. Fermentation and enzyme technology. John Wiley and Sons.

...

Eliana Guevara López, Diseño, construcción y caracterización hidrodinámica de un biorreactor multifuncional, Tesis para ingeniero en alimentos, Huajuapan de León, 2004. SDM. (2012). Principios de agitación de fluidos. 14/03/16, de SDM Sitio web: http

...

M.C. Ma. Luisa Colina Irezabal. (2011). Mezclado de alimentos fluidos. 14/03/16, de UAM Sitio

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