Instituto Politécnico Nacional

Unidad Profesional Interdisciplinaria de

Biotecnología

“Determinación de la velocidad de transferencia de oxigeno”

Profesores:

Ing. José León Rangel Ramírez

Integrantes:

Cadena Taffoya Deyerid

Escamilla Hernández Diego

Mariano Granados Reyes Sadami Jafet

Mejía Murillo Andrew Vergara Gatica Ángel David

M. en I. Agustín Altamirano Segovia

Grupo: 3BM3

Velocidad de Transferencia de Oxígeno

OBJETIVOS

 Determinar la velocidad de transferencia de oxígeno, el coeficiente volumétrico de transferencia de oxígeno y la fracción de gas retenido global en diferentes tipos de biorreactores.

EQUIPO Y MATERIALES

 BIORREACTOR DE TANQUE AGITADO

 BIORREACTOR DE COLUMNA DE BURBUJEO

 BIORREACTOR AIRLIFT

 ELECTRODO Y MEDIDOR DE OXIGENO DISUELTO

Condiciones de operación

 TANQUE AGITADO:

 300 y 700 rpm  0.3, 0.6, 1.0, 1.2, 1.5 vvm

COLUMNA DE BURBUJEO Y AIRLIFT:

0.3, 0.6, 1.0, 1.2, 1.5 vvm

Reactivos

 SULFITO DE SODIO  SULFATO DE COBRE PREHIDRATADO  SOLUCIÓN DE YODO 0.1 N  SOLUCIÓN DE TIOSULFATO DE SODIO 0.1 N

PREPARACION DE SOLUCIONES

 Para medio litro:

 Solución de Sulfito de Sodio 0.4M:

 500 ml de agua  25.2 g Na ₂ SO ₃

 Solución de Sulfato de Cobre:

 100 ml de agua  0.374 g CuSO ₄ 5H ₂ O

AGREGAR

AGREGAR

DESARROLLO EXPERIMENTAL

Solución de

Sulfito de

Sodio 0.4M

Solución de

sulfato de

cobre

MÉTODO DEL SULFITO

pH 7.2 con

Muestra de

Tiosulfato

Muestra

Volumen

Con

HCl

3mL y

de Sodio

después de

gastado vs

condiciones

vertirla en

0.1N

5min y

Tiempo

distintas

matraz con

repetir el

10 mL de

proceso

solución de

Yodo 0.1N

AJUSTAR

TOMAR

TITULAR

TOMAR

GRAFICAR

REPETIR

SUSPENDER

CALIBRAR

SUMINISTRAR

LLENAR

MÉTODO DINÁMICO

Electrodo de

oxígeno

disuelto

El biorreactor

con agua de la

llave al

volumen

deseado

Nitrógeno

para disminuir

la

concentración

El suministro

de N ₂ cuando

la

concentración

oscile entre 0-

10%

Oxígeno

Cuando la

registrando el

concentración

% de

oscile entre

saturación

90-100%

cada 15s

SUMINISTRAR

CONCLUIR

FRACCIÓN DE GAS RETENIDO GLOBAL

(Vol f -Vol i )/Vol f

MEDIR EL NIVEL DEL LIQUIDO SIN AIREAR

MEDIR EL NIVEL DEL LIQUIDO CON AIREADO PARA CADA CONDICIÓN DE OPERACIÓN

DETERMINA R EL VALOR MEDIANTE LA FORMULA DEL MÉTODO DE EXPANSIÓN

INTRODUCCIÓN

 Aireación : Proceso mediante el cual el agua se pone en contacto íntimo con el aire para modificar las concentraciones de sustancias volátiles.

 Transferencia de gases: Fenómeno físico mediante el cual, moléculas de un gas son intercambiadas en la interface gas líquido

 La teoría más utilizada para explicar el mecanismo de transferencia de masa en el intercambio gas-líquido es la teoría de la doble capa de Whitman (1923). El modelo se basa en la existencia de dos capas: una de líquido y otra de gas en la interfase gas-líquido. Estas dos fases presentan una resistencia al paso de las moléculas de gas de una fase a otra.

LIQUIDO

GAS

Etapas de la transferencia de Oxígeno desde las burbujas de gas hacia la célula

Etapas:

(i) Del seno de la burbuja a una capa interna de gas (ii) Difusión en la capa interna de gas. (iii) Difusión a través de una capa externa de líquido que rodea a la burbuja (iv) Transferencia al seno del líquido (v) Difusión a través de la capa de líquido que rodea a los microorganismos ¡Etapa limitante! (vi) Difusión en el interior de los microorganismos (vii) Reacción del oxigeno con el microorganismo

SISTEMAS DE OXIGENACIÓN ARTIFICIAL

 DIFUSIÓN DE AIRE COMPRIMIDO

 DIFUSIÓN DE AIRE COMPRIMIDO A PROFUNDIDAD CON AYUDA DE AGITACIÓN MECÁNICA

 AIREACIÓN MECÁNICA SUPERFICIAL

El K _L a

 Es el producto de dos parámetros: “k _L “es el coeficiente de transferencia de oxígeno en la interface líquido-gas, mientras que “a” representa la razón de área superficial de burbujas con respecto al volumen total de agua.

 El valor de kLa, y por lo tanto el grado de transferencia de oxígeno desde el seno del líquido hasta las células o microorganismos en cultivo, depende del diseño del biorreactor y de las condiciones de operación del sistema de cultivo: flujo de aire, volumen del líquido, régimen de agitación, etc.

 Disminuyen el kLa:

La viscosidad y el volumen del líquido

 Aumentan el kLa: el área de transferencia, la agitación y la presencia de dispositivos que aumenten una, la otra, o ambas.

 La diferencia (C*-C) se le conoce como el déficit de oxígeno. Es de destacar que el valor de C* se puede calcular usando la ley de Henry y varía con la temperatura y la presión parcial de oxígeno. (Sinclair, 1987)

Velocidad de transferencia de oxígeno



Donde:

Correlaciones de transferencia de masa

En general hay dos aproximaciones para evaluar k _L y a:

Calculando con correlaciones empíricas y con mediciones experimentales

Método del sulfito

Es un método para determinar K _L a en ausencia de microorganismos.

1.-Agregar al biorreactor la	4.-Poner a funcionar el biorreactor de acuerdo a las condiciones de operación
solución de sulfito de sodio a 0,4 M

5.-Tomar una muestra de 3 ml y verter	8.-Hacer una gráfica del volumen gastado de tiosulfato de sodio en función del tiempo
inmediatamente 1 ml a cada uno de los matraces con 10 ml de yodo

Se basa en que el Na ₂ SO ₃ , en presencia de Cu ⁺⁺ o Co ⁺⁺ , reacciona rápidamente con el O ₂ disuelto en el seno del líquido.

Una vez que determine la velocidad de transferencia de oxigeno, cambiar las condiciones de operación y repetir el procedimiento

Reacciones

Se toma una muestra para determinar la concentración del ión sulfito

que no reaccionó mediante otra reacción con solución de Yodo.

El Yodo que no reaccionó se cuantifica

titulándolo con Tiosulfato de sodio

Titulació

Para n calcular los valores de VTO y de K _L A, bajo condiciones constantes, se toman muestras

del biorreactor a intervalos de tiempo agregando una solución con exceso de Yodo (I ₂ )

para transformar rápidamente el sulfito residual de las muestras a sulfato.

2 Na ₂ SO ₃ + 2 I ₂ + 2 H ₂ O

2 Na ₂ SO ₄ + 4 HI

El Yodo residual que no reaccionó, se valora con tiosulfato de sodio (Na ₂ S ₂ O ₃ ) valorado en presencia de almidón como indicador, tomando nota del el volumen gastado de tiosulfato.

4 Na ₂ S ₂ O ₃ + 2 I ₂

2 Na ₂ S ₄ O ₆ + 4 NaI

Velocidad de consumo de SO3 = Velocidad de transferencia de Oxígeno

La velocidad de oxidación del sulfito es proporcional a la velocidad de

transferencia de Oxí eno

Método Dinámico para determinar el KLA

en este método solo es necesario medir la concentración de oxigeno en el biorreactor a lo largo de tiempo determinado.

Cambios en la concentracion de oxigeno disuelto

cálculos

EJEMPLO:Un fermentador agitado de 20L contiene un cultivo de Bacillus thuringiensis a 30°C que se usa para la producción de un bioinsecticida. El k _L a es determinado usando el método dinámico.

El flujo de aire se apaga por unos minutos bajando el nivel de oxígeno disuelto y después se reconecta. Cuando el estado estacionario se alcanza el oxígeno disuelto marca 78% de saturación de aire. Se obtienen los siguientes resultados:

T ₀ = 5s T _f =15s Concentracion de oxigeno1= 50% Concentracion de oxigeno2=66%

Correlación empírica

 P  k _L a  2.0 10 ^3   V  

0.7

0.2

^u G

k _L a – coeficiente de masa combinada (s ^-1 )

P – Potencia disipada por el agitador (W) V – Volumen de fluido (m ³ ) u _G – Velocidad superficial del gas (ms ^-1 ) – Flujo

volumétrico del gas dividido entre area seccional del reactor



Tiene limitantes y se prefiere igualar condiciones del fermentador durante operación normal

Método de Balance de Oxígeno

N A	
N A 

1

 









F g p AG

F g p AG















T

T

V L  









i

0

 









1

F g p AG

F g p AG















RV L   T 



T





i

0

El método de balance de oxígeno en estado estacionario es el método más confiable para medir k _L a

y permite la determinación a partir de una sola medición y depende de que se mida en forma exacta la composición de gas, flujo, presión y temperatura

d

i

t

d

i

Valores de la constante de gas ideal

Ley de Henry

Aplicando la ley de Henry, se llega a demostrar que para el caso de la película líquida se cumple lo siguiente:

Mientras que para la película gaseosa se cumple lo siguiente:

Las ecuaciones anteriormente mencionadas, sirven para conocer cual será la resistencia que limite la velocidad de transferencia de masa (con base en el sistema- gas líquido).

Ley de Henry

*

AL

p  p   HC

AG

T AG

Donde p _AG – Presión parcial del componente A en el gas

p _T – Presión total del gas γ _AG – Fracción molar de A en el gas H – Constante de Henry C* - Solubilidad del componente A en el líquido

Solubilidad del Oxígeno

Solubilidad del oxígeno en soluciones acuosas a 25°C y

1atm

Solubilidad de oxígeno en soluciones acuosas de azúcar bajo 1atm de presión

Fracción de Gas Retenido (ε)

 La fracción de gas retenido de una dispersión gas-líquido es un parámetro importante en los procesos aerobios, porque junto con el diámetro de las burbujas, determina el área interfacial específica, entre las fases gaseosa y líquida, y por lo tanto también influye directamente sobre la velocidad de transferencia de oxígeno

AIS: Área interfacial dividida por el volumen de una de las fases o de la suma de ambas.

 Tamaño promedio de burbujas(evitar coalescencia) es constante mayor fraccion de gas retenido y mayor transferencia de oxigeno

 Si se aumenta la concentración de electrolitos disueltos se inhibe la coalescencia

 Influye la presencia de proteinas, alcoholes y surfactantes

 Importante Transferencia de oxigeno disuelto en aire , el oxigeno molecular seria consumido en pocos segundos por la baja solubilidad de el oxigeno en agua

(ε) en biorreactores

 Biorreactores de columna mayor (ε)

 Biorreactores airlift disminuyen (ε) al aumentar la velocidad de circulacion del liquido , la transferencia de masa cambia en el proceso debido a que el cambio interfacial y las concentraciones de oxigeno por cambios de altura

Efecto de solutos. Correlación empírica para corregir la solubilidad del oxígeno en presencia de cationes, aniones y azúcares (Quicker et al.)

 log ₁₀  



^C

*

AL0

_  0.5



^C

*

AL



2

^H i ^z i ^C iL ^

 ^K j ^C jL

• i j

Donde:

C ^* _AL0 – Solubilidad del Oxígeno sin solutos (molm ^-3 )



C ^* _AL – Solubilidad del oxígeno (molm ^-3 ) H _i – Constante del componente iónico i (m ³ mol ^-1 ) z _i – Valencia del componente iónico i

Patrón de flujo en biorreactores aireados en función de la velocidad de agitación y el flujo

DQO y DBO

La demanda bioquímica de

oxígeno (DBO) es una prueba

usada para la determinación

de los requerimientos de

oxígeno para la degradación

bioquímica de la materia

orgánica en las aguas

municipales, industriales y en

general residuales

La demanda química de

oxígeno (DQO) determina la

cantidad de oxígeno requerido

para oxidar la materia orgánica

en una muestra de agua

residual, bajo condiciones

específicas de agente

oxidante, temperatura y

tiempo.

Si la relación (DBO5/DQO)<0,2 entonces hablamos de unos vertidos de naturaleza industrial, poco biodegradables y son convenientes los tratamientos físico-químicos.

Si la relación (DBO5/DQO)>0,5 entonces hablamos de unos vertidos de naturaleza urbana, o clasificables como urbanos y tanto más biodegradables, conforme esa relación sea mayor. Estas aguas residuales, puede ser tratadas mediante tratamientos biológicos.

Velocidad de consumo de O ₂

dC L

 Q O 2 X

dt



Velocidad de consumo de oxígeno para distintas células

BIBLIOGRAFÍA

 http://

http:// www.ptolomeo.unam.mx:8080/xmlui/bitstream/handle/132.248.52.100/3316/zaragozaperez. pdf?sequence=1  http://www.bvsde.paho.org/bvsacd/scan2/05862/05862-11.pdf  http://www.smbb.com.mx/congresos%20smbb/morelia07/TRABAJOS/Area_V/Orales/OV-6.pdf  Vant Riet, K. 1991. Basic bioreactor design. Mercel Dekker, Inc. MX.  Wang, D .I .C ., Cooney, C. L, Demain, A. D., Dunill, P., Humphrey, A. E., Lilly, M. D. 1978. Fermentation and enzyme technology. John Wiley and Sons. ... /Determinacion%20de ...  http ://bioprocesos.unq.edu.ar/ dialnet.unirioja.es/descarga/articulo/4776883.pdf  Eliana Guevara López, Diseño, construcción y caracterización hidrodinámica de un biorreactor multifuncional, Tesis para ingeniero en alimentos, Huajuapan de León, 2004. SDM. (2012). Principios de agitación de fluidos. 14/03/16, de SDM Sitio web: http ://www.controlvi.com/ /SDM-principios-de-agitacion... ...  M.C. Ma. Luisa Colina Irezabal. (2011). Mezclado de alimentos fluidos. 14/03/16, de UAM Sitio web: http://sgpwe.izt.uam.mx/ /uami/mlci /mezclado_fluidos.pdf ... " id="pdf-obj-38-7" src="pdf-obj-38-7.jpg">

www.ptolomeo.unam.mx:8080/xmlui/bitstream/handle/132.248.52.100/3316/zaragozaperez.

pdf?sequence=1

 http://www.bvsde.paho.org/bvsacd/scan2/05862/05862-11.pdf  http://www.smbb.com.mx/congresos%20smbb/morelia07/TRABAJOS/Area_V/Orales/OV-6.pdf  Vant Riet, K. 1991. Basic bioreactor design. Mercel Dekker, Inc. MX.



Wang, D .I .C ., Cooney, C. L, Demain, A. D., Dunill, P., Humphrey, A. E., Lilly, M. D. 1978. Fermentation and enzyme technology. John Wiley and Sons.

...

/Determinacion%20de ...

 http://bioprocesos.unq.edu.ar/

dialnet.unirioja.es/descarga/articulo/4776883.pdf

 Eliana Guevara López, Diseño, construcción y caracterización hidrodinámica de un biorreactor multifuncional, Tesis para ingeniero en alimentos, Huajuapan de León, 2004. SDM. (2012). Principios de agitación de fluidos. 14/03/16, de SDM Sitio web: http

://www.controlvi.com/

/SDM-principios-de-agitacion...

...

 M.C. Ma. Luisa Colina Irezabal. (2011). Mezclado de alimentos fluidos. 14/03/16, de UAM Sitio

web: http://sgpwe.izt.uam.mx/

/uami/mlci/mezclado_fluidos.pdf

...