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INTRODUCCIN
El glucgeno, el polisacrido de los animales,
se halla presente en todas las clulas pero su
presencia es ms predominante en el
msculo esqueltico y en el hgado, en donde
aparece
en
forma
de
grnulos
citoplasmticos.
La estructura primaria del glucgeno se
parece a la amilopectina, pero el glucgeno
se halla mucho ms ramificado, con puntos
de ramificacin que aparecen cada 8 a 12
restos de glucosa.
En la clula el glucgeno se degrada para su
empleo metablico por intervencin de la
fosforilasa del glucgeno, que escinde
fosforoliticamente los enlaces (1-4) del
glucgeno secuencialmente.
La estructura muy ramificada del glucgeno,
que posee muchos extremos no reductores,
permite la movilizacin rpida de la glucosa
en las ocasiones de necesidad metablica.
1. Obtencion de
glucgeno.
a) Sacrificar una rata con ter (sin
excitarla).
b) Extraer rpidamente el hgado y
lavarlo al chorro de agua.
c) Pesar y cortar en pedazos
pequeos, lavar nuevamente
con agua fra.
d) Colocar el hgado en un mortero,
previamente sumergido en hielo,
aadir acido tricloroacetico al
10% en proporcin de 1 ml/g de
tejido y 0.5g de arena lavada.
Triturar hasta formar pasta
homognea.
e) Centrifugar por 5 minutos a 200
rpm.
f)
Decantar el liquidosobrenadante
en un vaso de 250 ml y
mantener en hielo.
Decantar sobrenadante y
reunirlo con el obtenido en inciso
f)
j)
l)
Desechar sobrenadante y
resuspender precipitado con 5
ml de agua destilada.
Reaccin de Ninhidrina
Tiene como objetivo detectar los grupos -amino libres de los
aminocidos, pptidos y protenas en pH alcalino. Los aminocidos,
en general reaccionan con la ninhidrina cuando son calentados con
un exceso de la misma. Esta reaccin da lugar a la formacin de un
producto color azul o prpura. En el caso de prueba echa al
glucgeno esta debe ser negativa, en el caso de ser positiva se
concluye que en la muestra existe la presencia de alguna protena o
aminocido.
Reaccin de biuret.
Es una prueba general para protenas y pptidos de cadena no menor
de 4 unidades de aminocidos si la reaccin da positivo este tendr un
color violceo lo que significa que hay protenas y pptidos. En este
caso para la prueba del glucgeno la reaccin da negativa teniendo un
color azul claro, el cual nos descarta la presencia de protenas y
pptidos.
Reaccin de Molish
Es una prueba basada en la formacin del furfural el cual se deriva a
partir de los carbohidratos; si la reaccin da positivo se vera un anillo
color violeta en la interfase. En este caso para la prueba de glucgeno
da positivo vindose el anillo mencionado lo que significa que es claro la
presencia del glucgeno sabiendo que este es un polisacrido de la
glucosa, siendo esta una aldosa
Glucgeno
(ml)
HCl 1N (ml)
HCl 2N (ml)
HCl 4N (ml)
Amilasa
concent. (ml)
Amilasa 1:2
(ml)
NaCl al 5%
1 gota
Agua
destilada
Incubar 30
2
92
1 gota
Resultados
cida
Testigo
Enzimtica
Prueba
Fehling
++
+++
++
Lugol
Amarillo
Amarillo
Amarillo
Caf
rojizo
Amarillo
Amarillo
Seliwanoff
Porcentaje de glucgeno.
Porcentaje de glucgeno.
Aproximadamente 1 o 2 % del
peso hmedo del msculo en
reposo de un adulto bien
alimentado, unos 400 g, son
glucgeno; por el contrario, en
el hgado, unos 100 g son
glucgeno, entre el 6 y 8 % de
su peso hmedo. en los
animales que se almacena en
elhgado(10% de la masa
heptica) y en los msculos(1%
de la masa muscular) de
losvertebrados.
Porcentaje de glucgeno.
Datos:
Clculos:
P del Hgado = P de la
charola con hgado P de la
charola vaca
P del glucgeno = P de la
charola con glucgeno P de
la charola vaca