CONCEPTOS GENERALES PARA EL TRABAJO EN EL

LABORATORIO
DE CONTROL DE CALIDAD
PARTE I

GMPS Y GLPS
GMPS: (Good Manufacturing Practices). (Buenas Practicas de
Manufactura)
Se conoce asi al conjunto de lineamientos y actividades
relacionadas entre s, destinadas a asegurar que los
medicamentos elaborados tengan y mantengan las caractersticas
de identidad, pureza, seguridad, eficiencia y CALIDAD requeridas
para sus USO.
GLPs (Good Laboratory Practices), (Buenas Practicas de
Laboratorio)
Las buenas practicas de laboratorio son un conjunto de reglas y
procedimientos operativos que garantizan que los datos
generados son: REPRODUCIBLES, Y REPRESENTATIVOS. (Dentro del
Laboratorio). Asegurando as la validez y confiabilidad de los
resultados al ofrecer productos seguros e inocuos.

Y PORQUE NOS TOMAMOS TANTOS

CUIDADOS?
Durante los aos 70s en E.U.A. Un senador de esta pas (Edward
Kennedy, 1975) y la FDA (Food And Drugs Administration
(Administracion y Medicamentos y Alimentos de EU)., presentaron
una demanda colectiva, contra un laboratorio de investigacin,
por un estudio preclnico. El laboratorio fue investigado,
encontrando deficiencias, en el registro de resultados, en el
entrenamiento inadecuado y actos fraudulentos.
En 1976, Cientificos de Seatle, preparacin un documento
denominado: GOOD LABORATORY PRACTICE. El documento fue
utilizado como gua, para evalular las actividades del labotoratorio
de investigacin, y fue sometido ante la FDA, y a la
Pharmaceutical Research and Manufactures Association Of
America (PhRMA).
El documento se hace oficial ante el CODIGO FEDERAL DE

UN EJEMPLO MAS RECIENTE

OJO NO SE BUSCAN CULPABLES,

SINO CAUSAS
EN 2013 Boehringer Ingelheim GmBH (El Corporativo Alemn), representante legal de BI Mexico
(Promeco), tuvo una fuerte llamada de atencin por parte de la FDA, mediante un comunicado
publicado en el sitio web de la FDA.
La farmacutica alemana ha recibido unacarta de advertencia de laFDA,publicada ayer en la
pgina web de la FDA, para que investigue el origen de las partculas de gran tamao en lotes de
uningrediente farmacutico activofabricado en una planta en Ingelheim am Rhein (Alemania).Es
muy comn, que la mayora de las empresas slo discuten cartas de advertencia; sin embargo,
Boehringer Ingelheim han tomado el enfoque proactivo.Hoy se emiti un comunicado de la
cabeza de su divisin de calidad diciendo que la compaa estaba tomando muy en serio las
cuestiones carta de advertencia.Dr. Gerhard Koeller, jefe de la Divisin Corporativa de Calidad,
dijo que la compaa "invertira toda la energa para remediar la situacin."Seal que adems de
la inspeccin de noviembre de la FDA, la planta haba superado con xito 22 inspecciones por
parte de las diferentes autoridades en los ltimos 5 aos.
Durante la investigacin, en parte se encontr, que durante el periodo de seguimiento de la
investigacin por parte de los auditores de la FDA, se dio un seguimiento inadecuado, al proceso
de resultados fuera de especificacin por parte de la empresa. Entre las sanciones que impone la
FDA, incluye el cierre de las instalaciones (En Alemania, la casa matriz) hasta la resolucin del
problema, o bien la negacin del permiso de importacin a los EU. Lo que implica la perdida de un
enorme mercado de ventas por parte de BI GmBH.

LA CALIDAD ES UN PROCESO
IMPORTANTE
Las polticas de calidad varian dependiendo al mercado al que estn
orientados, al paso de los aos cada vez se han vuelto mas estrictas, con el fin
de garantizar la seguridad en el uso de medicamentos, han pasado de ser un
mero tramite administrativo (como en Mxico), a ser polticas basadas en un
fuerte fundamento cientfico, (como en E.U. La Union Europea, o Japn), y
actualmente esta misma tendencia se esta siguiendo en Sudamerica,
(Colombia, y Brasil).
Un proceso importante en el trabajo en el laboratorio son la Auditorias, el
enfoque que tiene varia, de nueva cuenta, en que es lo que se va auditar, y no
solo en la revisin de registros, sino en la verificacin de la trazabilidad de los
resultados del laboratorio, un enfoque GMPs implica que no solo se tiene un
historial limpio en la Continuidad de registro vigentes, sino en los de aos
anteriores, (5 aos atrs) e incluso proyectando resultados, hacia adelante (De
manera prospectiva) (enfoque FDA).
CONCLUSION: Aspirar a un buen sistema de calidad, robusto, y confiable.

CONCEPTOS IMPORTANTES
UnKPIdel inglskey performance indicator, tambin conocido comoindicador
clave de desempeooindicador clave de rendimiento, es una medida del nivel
del desempeo de un proceso; el valor del indicador est directamente relacionado
con un objetivo fijado de antemano. Normalmente se expresa en porcentaje.
Un KPI se disea para mostrar "cmo" se progresa en un aspecto concreto; en ese
sentido indica rendimiento. Existen KPI para diversas reas de una empresa:
compras, logstica, ventas, servicio al cliente, etc. Las grandes compaas disponen
de KPI que muestran si las acciones desarrolladas estn dando sus frutos o si, por el
contrario, no se progresa como se esperaba.
UN INDICADOR KIP; evala el desempeo de un proceso dentro de una empresa, eso
incluye por ejemplo : TIEMPOS DE MANUFACTURA, TIEMPOS DE ANALISIS; VENTAS;
PLANEACION, LIBERACION DE PRODUCTO. Etc. (Es un indicador estadstico de
desempeo, y debe existir un departamento encargado de su elaboracin,
generalmente dentro de la direccin general de una empresa) Es importante que
todos los departamentos conozcan su KPI; para que conozcan sus oportunidades de
mejora.

Y COMO LA HACEMOS PARA

GESTIONAR TODO ESTO?
Actualmente se apoya la gestin de las diversas actividades,
mediante sistemas electrnicos, o computaciones, generalmente
software especializado enfoque empresarial, cuyo fin es realizar la
gestin de las distintas actividades en la empresa, por parte de los
distintos departamentos, VENTAS; CALIDAD; PRODUCCION,
ASUNTOS REGULATORIOS, etc. Entre lo mas conocidos y usados
son

Y QUE COMPETE A CALIDAD?

LA APROBACION DE MATERIAS PRIMAS
EL MUESTREO E INSPECCION DEL MATERIAL DE EMPAQUE.
EL RESGURARDO DE MUESTRAS DE RETENCION
EL SEGUIMIENTO DE CONTROL EN PROCESO (SEMITERMINADOS)
LA LIBERACION DE PRODUCTO TERMINADO
ESTUDIOS DE HOLDTIME, y ESTABILIDADES.
LA EMISION DE RESULTADOS ANALITICOS.
LA GESTION DE RESULTADOS FUERA DE TENDENCIA Y RESULTADOS FUERA DE
ESPECIFICACION.
VALIDACION Y TRANSFERENCIA DE METODOS ANALITICOS.
Se puede, y la mayora de la empresas USAN SAP; nicamente con fines de
liberacin y registro, en procesos mas enfocados al rea de calidad se usan otros
softwares, denominados generalmente como LIMS (Laboratory Information
Management System). Uno de los mas Usados el LabWare LIMS, y tambin uno de
los mas conocidos, ojo porque hay varias marcas de este tipo de software.

AS QUE LA GESTION DEL LABORATORIO SE

HACE ACTUALMENTE DE MANERA
ELECTRONICA

EMISIN DE UNA HOJA DE TRABAJO

ANALTICO
Actualmente en los sistemas GMPs el uso de bitcoras para el anlisis esta
quedando rezagado, por lo que es muy comn el empleo de hojas de trabajo
analticas. La hoja de trabajo analtica es un documento interno para ser usado
por el analista para registrar informacin acerca de la muestra, procedimientos
de ensayo, clculos y los resultados de los anlisis.
Propsito: Confirmar que la muestra que se analiza est en conformidad con los
requisitos o bien para justificar un resultado fuera de especificacin.
Todos los valores obtenidos en cada ensayo, incluyendo los resultados de los
blancos deben anotarse inmediatamente en la hoja de trabajo, y todos los datos
grficos obtenidos, ya sea por registro del instrumento o trazados a mano, deben
ser anexados a un archivo de registro electrnico a un documento en que los
datos estn disponibles.
La hoja de trabajo analtico con los datos completos debe ser firmada por el (los)
analistas responsables y verificada, aprobada y firmada por el supervisor.

HOJA DE TRABAJO ANALTICA

La hoja de trabajo analtica debe suministrar la siguiente informacin:
El No.de registro de la muestra
El numero de pagina, incluyendo el no. Total de paginas (incluyendo anexos)
La fecha de solicitud de anlisis
La fecha en la cual el anlisis fue comenzado y completado.
El nombre y firma del analista.
Una descripcin de la muestra recibida.
Referencias a las especificaciones y una descripcin completa de los mtodos de
ensayo con los cuales la muestra fue analizada incluyendo los limites.
La identificacin de los equipos de ensayo usados
El numero de identificacin de cualquier sustancia de referencia usada

HOJA DE TRABAJO ANALITICO

Los resultados del ensayo de adecuabilidad del sistema, si
corresponde.
Identificacion de reactivos y solvente empleados.
Los resultados obtenidos.
La interpretacin de los resultados y las conclusiones finales (ya
sea que la muestra haya cumplido o no con las especificaciones),
aprobadas y firmadas por el supervisor.
Cualquier comentario adicional, por ejemplo, para informacin
interna, o notas detalladas elegidas.
Una Hoja de revisin de Checklist, donde se verifican todos los
puntos antes mencionados.
Hojas de anexo donde se pueden realizar clculos, o pegar
documentacin adicional.

QUE SIGNIFICA LA GESTION DEL

LABORATORIO?
Recepcion, distribucin, y supervsion de las muestras a unidades especificas.
La asignacin de las muestras analistas, con un tiempo de anlisis designado. En base a
un programa de trabajo, esto en base a los tiempos establecidos, para la evaluacin del
KPI, cualquier retraso debe se comunicado al rea de planeacin, para el ajuste de
tiempos, todas la reas involucradas en el manejo del producto deben tener acceso al
sistema LIMS, para conocer el avance en la cadena de manufactura y analisis.
La asignacin del lotes se hace mediante el sistema LIMS, donde el analista imprime su
hoja u hojas de trabajo analtica, debe realizar la carga electrnica, de todos los insumos
utilizados en el analisis, reactivos, columnas, estndares, equipos, debe de tener al menos
3 revisiones dependiendo del sistema de calidad, para su revisin antes de realizar
cualquier carga de datos en el sistema electrnico, una vez revisado, debe de tener una
cuarta revisin, en el sistema electrnico, antes de la aprobacin del jefe directo y del rea
de gerencia, para que dictamen puede liberarlo. Cada usuario del sistema tiene una
cuenta individual , de uso intrasferible. (Recomendable en sistemas GMP).
Solo puedes imprimir n cantidad de documentos al dia por lote, y en todo momento
verificar que la informacin de las hojas de trabajo corresponda a la de tus lotes.

OBSERVACIONES
Corresponde una violacin al sistema de calidad el manejo de
documentos no autorizados, y que deben de ser inmediatamente
destruidos sino se encuentra un propsito para su uso. (No se
valen las hojas recicladas).
Cromatogramas, espectros, tickets y dems documentacin
analtica, debe de ser inmediamente anexada a bitcoras (si es el
caso) u hojas de trabajo, toda la documentacin analtica, debe de
estar identificada por quien la emitio, se recomienda el uso de
pluma azul para registro de datos crudos.
TODOS LOS SISTEMAS ELECTRONICOS (SOFTWARE); cumple con la
Normatividad de E.U.A. (CFR 21).

CONCEPTOS IMPORTANTES
MUESTRA DE RETENCION: Se denomina asi la muestra representativa de
materia prima, o Producto Terminado, o semiterminado, que se debe de
tener en resguardo, para un proceso de investigacin como el de
resultados fuera de especificacin o de tendencia, o un reanalisis pej.
RESULTADOS FUERA DE ESPECIFICACION (OOS): Se refiere a los
resultados que tienen una tendencia estadstica, como su nombre lo
menciona, fuera de la especificacin de calidad establecida por la
empresa, y que se sale del comportamiento histrico del producto.
RESULTADOS FUERA DE TENDENDENCIA (OOT): Dentro de Los sistemas
de Calidad que llevan un histrico del comportamiento del producto
(Reporte Anual de tendencia) (FDA), se llama asi al resultado estadstico
de un producto o materia prima que tiene un comportamiento fuera de la
tendencia estadstica esperado, ya sea un un valor menor o mayor al
esperado, pero que aun cumple con la especificacion de calidad.

CONCEPTOS IMPORTANTES
INVESTIGACION DE OOS/OOT: se conoce asi al proceso de investigacin de toda la
cadena de produccin y calidad involucrada en la manufactura y analisis de un
medicamento, cuyo fin es encontrar la causa raz del resultado aberrante. Existe o
debe de existir un rea, independiente del produccin que realice este proceso, y que
adems se coordine con las otras rea, como los distintos laboratorios involucrados,
(PT, Materia Prima, Estabilidades; etc). Asi como las diversas reas administrativas que
estn relacionadas con el sistema de calidad, (aseguramiento, inspeccin, dictamen y
liberacin, control de cambios, calificacin y capacitacin, validacin, almacn,
mantenimiento). Este proceso de investigacin debe ser concluyente con todos los
departamentos o reas involucradas, y se deben implementar acciones preventivas o
correctivas (CAPAS), para evitar que este problema se vuelva a repetir, ya que sino se
cierra la investigacin no se puede liberar ningn lote.
DESVIACION: cualquier actividad ejecutada fuera de lo establecido fuera de los
procedimientos de operacin que puede representar un riesgo potencial a la calidad de
un medicamento. Tambien es suspetible de investigacin, (OJO NO SE EMITEN
DESVIACIONES; como amonestaciones, se debe tener evidencia documental, de
cualquier indole, ya que de nuevo, sino se cierra la investigacin, no se puede liberar
productos dentro de la empresa).

CONCEPTOS IMPORTANTES EN
CALIDAD
CAPACITACION Y CALIFICACION: En todo momento, antes de entrar a cualquier actividad que
involucre actividades que se relacionen con el manejo de producto o materia prima, es
indispensable contar con su matriz de capacitacin, o capacitaciones correspondientes, asi
como su calificacin, para contar con la evidencia documental, de que el analista, cuenta con
los conocimientos suficientes, para ejecutar las actividades relacionadas con su trabajo.
Existen diversas formas en las que se puede realizar una capacitacin y/o calificacin:
Mediante una evaluacin escrita, mediante la evaluacin fsica de una actividad que el
analista en capacitacin desempeara, o bien mediante la confrontacin de resultados
analticos, del analista a calificar con uno que ya cuenta con suficiente experiencia para
comparar los resultados (uno de los sistemas mas recomendables),de manera estadstica;
tambin se puede realizar una evaluacin estadstica, de los resultados de varios analistas,
con el fin de evaluar su desempeo, habilidad, criterio analtico, es poco recomendable, de
nuevo, porque no se tiene un referente, de Que es estar capacitado, sino se incluye un
analista de mayor experiencia. Y Tambin del proceso al cual se va a calificar.
UN ANALISTA SIN CAPACITACION NO PUEDE LIBERAR LOTES

TAMBIN SE HACE DE MANERA

ELECTRNICA
en la investigacin de resultados OOS/OOT:

OTROS SOFTWARE INVOLUCRADO

CALIFICACION DE PERSONAL:

TAMBIEN EXISTEN PROGRAMAS PARA LA

GESTION DOCUMENTAL; CONTROL DE
CAMBIOS; ETC:

CONCEPTOS IMPORTANTES
CONTROL DE CAMBIOS: se refiere al conjunto de actividades, relacionadas para
implementar un cambio de manera controlada que pudiera afectar la calidad del
medicamentos y que es necesario para la mejora del sistema de calidad , y del
cual se genera evidencia documental que permita trazabilidad documental.
TRANSFERENCIA ANALITICA: Se conoce as al proceso formal interlaboratorio, para
conocer si el laboratorio que emite un mtodo analtico, puede Trasferir a un
segundo laboratorino que recibe dicho mtodo, cuenta con las condiciones,
insumos, equipos, personal capacitado y calificado para ejecutar el mtodo, o en
su defecto, se debern implementar adecuaciones, al mtodo, para su correcta
implementacin, es valido, hacer modificaciones, si se justifica, mediante GLPs
que no se cuenta con todas las condiciones analticas, todo es mediante un
PROTOCOLO DE TRASFERENCIA bajo el mismo rigor de un protocolo de validacin
de mtodo analtico.
NO ES VALIDO Y CORRESPONDE UNA GRAVE VIOLACION AL SISTEMA DE CALIDAD
LIBERAR PRODUCTO; SIN ANTES TERMINAR UN PROTOCOLO DE TRANSFERENCIA

CONCEPTOS IMPORTANTES
El proceso de trasferencia generalmente se hace entre distintos
laboratorios de diversos pases, o distintas zonas geogrficas,
donde se sabe que no se cuenta con las mismas condiciones para
realizar un mismo anlisis que genere resultados que sean
reproducibles.
El proceso de validacin de mtodo analtico lo realiza el mismo
laboratorio donde se va ejecutar el mtodos analtico para
asegurar que se tienen resultados reproducibles dentro del mismo
y que son confiables, aplica para mtodos no compndiales, (No
farmacopeicos).

CONCEPTOS IMPORTANTES
Validacin: Se conoce asi a la evidencia documental generada a travs de la
recopilacin y evaluacin de datos obtenidos en la calificacin de pruebas
especificas, basadas en el conocimiento del proceso, sistema o mtodo, para
demostrar funcionalidad, consistencia y robustez.
Validacin de mtodo analtico: Es el proceso mediante el cual se demuestra
mediante un estudios de laboratorio, que la capacidad del mtodo analtico
satisface los requisitos para su aplicacin analtica deseada. Se realiza mediante un
Protocolo de validacin.
Mtodo Analtico: Se conoce asi a la descripcin de las secuencia de actividades,
materiales, y parmetros que se deben cumplir para llevar a cabo el anlisis de
componente especifico de la muestra.
Analito: Componente de una muestra a medir.
Especificacin de calidad: Es la descripcin del material que incluye la definicin de
sus propiedades y caractersticas, con tolerancias de variacin, y parmetros de
calidad.
Muestra: Porcion del material a medir.

CONCEPTOS IMPORTANTES
PODEMOS CLASIFICAR LOS METODOS DE ANALISIS EN:
Fisicoquimicos, Biologicos, Analiticos con un sistema instrumental
(con o sin seal ruido), o con algn fin en especifico: de
cuantificacin o de identificacin. pej.
OTRAS DEFINICIONES:
Intervalo de trabajo o analtico: rango de concentraciones
incluidas entre la concentracin superior e inferior del analito
(incluyndolas) para los cuales se ha demostrado que el proceso
es exacto, preciso y lineal.
Exactitud. Es la concordancia entre un valor obtenido empleando
el mtodo y un valor de referencia. Es la concordancia obtenida
entre un resultado experimental y y el valor real o nominal.

CONCEPTOS IMPORTANTES
Adecuabilidad del sistema: Es la verificacin del sistema
experimental que debe operar con base a criterios que permitan
asegurar la confiabilidad de los resultados de un mtodo analtico,
este concepto es muy importante en CROMATOGRAFIA DE
LIQUIDOS, (HPLC), y en la determinacin de CARBONO ORGANICO
TOTAL (TOC), debido a la naturaleza de los sistema analticos
empleados.
Linealidad: Habilidad para asegurar que los resultados obtenidos
directamente o por una trasformacin matemtica son
proporcionales a la concentracin del analito.
Precision: Grado de concordancia entre resultados analticos
individuales, cuando el procedimiento se aplica repetidamente a
diferentes porciones de una muestra homognea.

CONCEPTOS IMPORTANTES
Limite de Cuantificacin: Es la concentracin mnima del analito que
puede ser determinada con precisin y exactitud aceptable.
Limite de deteccin: Es la concentracin minima del analito que puede
ser detectada, per no necesariamente cuantificada, por el mtodo
analtico a evaluar.
ESTOS PARAMETROS SON BASICOS PARA CONOCER EL DESEMPEO DEL
METODO ANALITICO; sin embargo, en una validacin de mtodo
analtico, se evalan otros como la reproducibilidad, el recobro o
pocentaje de recobro, la robustez, la estabilidad de la muestra, la
repetibilidad , la sensibilidad y otros parmetros de desempeo mas
estrictos como la Tolerancia. Pero dependern de la utilidad del mtodo
en si, ya que se puede utilizar, para identificar, cuantificar o valorar la
estabilidad de una muestra analtica.

CONCEPTOS A TOMAR ENCUENTA

PARA TU ANLISIS
Sustancias de referencia Primaria: Son sustancias de uniformidad conocida
destinada a utilizarse en mtodos analticos, o microbiolgicos, que adems
estn designados a tener la mas alta calidad y pureza, se aceptan sin referencia
a otras sustancias.
Sustancias de referencia secundarias o estndares de trabajo (Working
Standard). Son sustancias cuyas propiedades se asignan por comparacin con
una sustancia de referencia, o bien, mediante un certificado analtico
cientficamente reconocido.
Sustancias Grado Reactivo: Son compuestos cuya calidad no es comparable a los
utilizados como estndares, pero son aceptables para su empleo en el
laboratorio, y cuya estabilidad permite su uso sin problemas.

CONCEPTOS IMPORTANTES EN LA
INDUSTRIA QUMICA
Impurezas. Se define como cualquier componente del medicamento que no es una
entidad qumica definida como frmaco, o excipiente. Desde el punto de vista de uso
de un principio activo esta comprometido en trminos de pureza cuando contiene un
sustancia cuyas propiedades, son superiores farmacolgicamente o toxicolgicamente.
Esta consideracin es mas relevante en la industria qumica, en general, ya que en la
industria farmacutica, se presupone que el proveedor de la materia prima, ya fue
auditado, y garantiza la confiabilidad de la materia prima, sin trazas de contaminacin,
de otros compuestos. Se emite un certificado o carta de Impurezas, donde el
proveedor de la materia prima garantiza la pureza y limite de trazas de solventes
residuales p.ej. Y que puede usarse sin peligro para la poblacion.
Traza. Son cantidades muy pequeas de compuestos que se evalan en procesos de
limpieza de equipos de manufactura, y que son permisibles, sin que causen problemas
de contaminacin cruzada. Actualmente se evalan el proceso de trazas, por HPLC y
por TOC.

CONCEPTOS IMPORTANTES EN LA
INDUSTRIA QUMICA.
Intermediarios: Compuestos producidos durante la sntesis, que pueden ser aislados y caracterizados.
Penltimo intermediario: ultimo compuesto antes del producto principal, cuando el producto principal,
es un sal no se debe considerar una base o un acido.
Subproductos. Compuestos no esperados durante el proceso de sntesis, del cual se puede suponer
su estructura.
EN LA INDUSTRIA FARMACEUTICA LOS QUE SE CUANTIFICAN PRINCIPALMENTE:
Productos o sustancias relacionadas: Es un impureza cuya estructura qumica es similar al principio
activo y puede tener actividad biolgica, y que es cuantificable en formas farmacuticas. (Producto
terminado/Materia Prima).
Productos de degradacin: Son impurezas producidas durante el proceso de degradacin del principio
activo. Generalmente se evalan en formas farmacuticas en estudios de estabilidad.
Impurezas Organicas Volatiles, o Solventes Residuales: Son trazas de compuestos (solventes por lo
general),atribuibles al proceso de sntesis de un principio activo (API), que no pueden ser retirados
durante la sntesis del producto principal, y cuya cantidad no debe rebasar un limite que represente
toxicidad, en el API. (Materia Prima).

OBSERVACIONES
En mtodos analticos, que evalan impurezas, como sustancias
relacionadas, solventes residuales, o bien en mtodos que
reportan productos de degradacin (los de estabilidades), es muy
comn reportar, el limite de cuantificacin o de deteccin o bien
ambos, debido a que estn buscando cantidades, muy pequeas
de impurezas. Es muy importante tener en cuenta estos
conceptos, para saber como reportar estos valores. Asi como la
seal ruido, ya que debajo del valor de la seal es muy difcil
cuantificacin de cantidades de impurezas de manera confiable,
este concepto de seal ruido tambin es importante en la
evaluacin de trazas, ya que las cantidades que se reportan por lo
general son de ppm (partes por milln). (relacin seal/ruido en
limites de cuantificacin y deteccin). Tener en cuenta el correcto
redondeo de cifras significativas, y la manera de reporte de estos

HAGAMOS UN ALTO
PARA QUE ME SIRVEN ESTOS CONCEPTOS?

ANTES DE EMPEZAR A ANALIZAR

EL PRIMER PASO
PORFAVOR; NO HAGAS NADA; SINO RECIBISTE UNA CAPACITACION
PREVIA; AUNQUE SEA BREVE DE CUALES SON TUS ACTIVIDADES; O
QUE VAS A ANALIZAR
PROCURA PREGUNTAR LAS VECES QUE SEAN NECESARIAS PARA
NO QUEDARTE CON DUDAS, ES INDISPENSABLE COMO ANALISTA
SABER EXACTAMENTE QUE SE ESTA HACIENDO.
REVISA TUS METODOS ANALITICOS; CON UN ANALISTA DE MAYOR
EXPERIENCIA SU TIENES DUDA EN COMO REALIZAR UNA
ACTIVIDAD.
LAS BUENAS PRACTICAS DE LABORATORIO SON PARA TU
PROTECCION: EVITA EN MEDIDA DE LO POSIBLE:

MIENTRAS PERMANECES EN EL
LABORATORIO
EVITA TODO TIPO DE DISTRACCION; SI SABES DE ANTEMANO; QUE ESTAS MANEJANDO
UN MATERIAL O REACTIVO PELIGROSO,
USA TU EQUIPO DE PROTECCION PERSONAL.
NO USES OBJETOS DE USO PERSONAL EN EL LABORATORIO SI SABES QUE MANEJAS
MATERAL PELIGROSO, (CELULAR, ACCESORIOS DE ROPA, MAQUILLAJE,
CUADERNOS..ETC.)
EVITA MOVIMIENTOS BRUSCOS SI MANIPULAS MATERIAL DE VIDRIO, NO TE SIENTES SI
ESTAS TITULANDO, ES RECOMENDABLE HACERLO DE PIE, Y DE MANERA CUIDADOSA.
SE VALE TENER UN AMBIENTE AGRADABLE DE TRABAJO, PERO EVITAR CAUSAR
DISTRACCIONES, DEBIDO AL AMBIENTE TENSO DE TRABAJO ES MUY RECURRENTE QUE
OCURRAN DESMAYOS, QUE TERMINAN POR LO GENERAL EN LA ENFERMERIA O EN SU
PEOR DEFECTO CON INCAPACIDADES, RECUERDA QUE UNA BUENA COMUNICACIN
TAMBIEN ES CLAVE EN LA SEGURIDAD DE TUS COMPAEROS ANALISTAS, NO LE VAMOS
A CAER BIEN A TODO EL MUNDO, PERO SOMOS UN EQUIPO DE TRABAJO.

CONSEJOS
NO TODOS LOS JEFES SON AMABLES Y ACCESIBLES, TRATA DE
MANTENERTE EN COMUNICACIN CONSTANTE CON TU JEFE Y/O
GERENTE..
LA COMUNICACIN ES PRIMORDIAL PARA GENERAR CONFIANZA EN
TU TRABAJO, YA QUE SINO LO HACES TU JEFE NO PODRA
ENCOMENDARTE TAREAS QUE CONSIDERE IMPORTANTES.
COMUNICA LAS PROBLEMATICAS QUE TENGAS, TRATA DE NO
EVITAR UN REGAO, YA QUE HABRA SITUACIONES QUE TU
HABILIDAD ANALITICA NO PRODRA RESOLVER, O SI SABES COMO
COMUNICARSELO A TU JEFE, EXISTEN METODOS ANALITICOS QUE
LLEVAN AOS EJECUTANDOSE, PERO NO TIENEN NINGUN
JUSTIFICACION PARA RELIZARSE DE LA FORMA EN LA QUE SE
HACEN, POR ESO ES PRIMORDIAL REVISARLA CON ANALISTAS DE
EXPERIENCIA PARA QUE TE BRINDEN SU OPINION, NO MODIFIQUES
UN METODO SIN CONSULTARLO,

MEDITA LO ANTES APRENDIDO

ANTES DE SEGUIR CON LA PRESENTACION MEDITA UNOS MINUTOS..

BIENVENIDA AL SIGLO XXI

Actualmente casi todas las actividades dentro de la industria
farmacutica, se hacen mediante registros electrnicos, asi que no se
puede estar ajeno, a ello.

CONSIDERAR
DEBIDO A QUE ACTUALMENTE SE REALIZAN MUCHOS REGISTROS
DE FORMA ELECTRONICA,ES DE SUMA IMPORTANCIA, TENER
ENCUENTA LA NORMATIVAD QUE RIGE DICHOS REGISTROS, EL
CODIGO FEDERAL DE REGULACIONES o CFR 21 EN SU PARTE 11,
DICTAMINA MUCHOS DE LOS LINEAMIENTOS, QUE EL SOFTWARE
DEBE DE SEGUIR LA Y FORMA DE TENER REGISTRO MEDIANTE
GMPS. POR EJEMPLO DENTRO DE ESTA NORMATIVDAD SE
PROHIBE TAJANTEMENTE EL USO DE HOJAS DE CALCULO, SINO
CUENTAN CON SU CORRESPONDIENTE VALIDACION.
TODO EL SOFTWARE Y/O PROGRAMAS DE GESTION, REGISTRO,
CAPACITACION Y DE ADQUISICION DE DATOS DEBE DE CONTAR
CON SU CERTIFICACION POR PARTE DEL PROVEEDOR DEL MISMO.

ALGUNOS PROVEEDORES DE
SOFTWARE ESPECIALIZADO

SOFTWARE

REGISTROS ELECTRNICOS EN GMPS

USO DEL SOFTWARE RELACIONADO EN CROMATOGRAFIA (HPLC & GC)
PARTE II

INTRODUCCIN
El CFR 21, en su parte 11, se encuentra orientado en sistemas electrnicos, y
actualmente se encuentra divido en:
Registros electrnicos
Firmas electrnicas
Ambos son una extensin natural del uso de los registros tradicionales en papel. Los
registros en papel ofrecen seguridad a los datos y pueden presentar firmas
manuscritas para indicar que determinados datos son correctos y que se han
registrado ciertos eventos. Es posible detectar fcilmente cualquier intento de
alteracin de los datos o de las firmas.
En trminos sencillos, los requisitos de Registros electrnicos se basan en aportar
seguridad a los datos, que ofrecen un nivel de confianza similar al de los registros en
papel. Las firmas electrnicas exigen que tanto los operarios como los supervisors
puedan identificarse electrnicamente de modo equivalente al de una firma
manuscrita. La norma permite tambin el uso de indicadores biomtricos, como
dispositivos que utilizan huellas digitales o escneres de retina.

ALGUNAS RECOMENDACIONES
El equipo de computo que es provisto para las actividades en el laboratorio, es
designado para ello, y por lo general, la misma empresa establece polticas, y
procedimientos de uso, considera las polticas internas, en todo momento.
Buenas practicas en manejo de computo.
Los usuarios deben de apagar sus equipos y desconectarse de la red al final de su
jornada laboral.
Se debe evitar el uso de medios extrables, como CDs, o USB que contengan o
manejen informacin confidencial,
Algunos documentos deben de contar en todo momento con una contrasea, para
evitar modificaciones, al igual que carpetas electrnicas que contengan informacin
confidencial, lo mismo aplica para hojas electrnicas de calculo validadas.
Todos los accesos a red y sistemas electrnicos, deben de contar con un usuario y
contrasea asignados, designados por un administrador del sistema.
Se debe de establecer un listado de sitios web permitidos mediante acceso web.

ALGUNAS RECOMENDACIONES
Algunos sistemas o redes, cuentan con acceso via remota, ya que la informacin
no se almacena en el disco duro del equipo, sino mediante esta via, asi que en
todo momento se debe verificar la conexin, a servidores, asi como contar con
software especializado en proteccin de redes (antivirus), que garanticen la
seguridad en el manejo de los datos.
Es muy comn el manejo de software que emplea bases de datos, que se
trasfieren a servidores remotos, por lo que es necesario acceso via remota para
el manejo, almacenamiento y visualizacin de los datos que manejan se trabajan
en estas bases de datos: Esto es una practica muy comn de de seguridad en
software empleado en la gestin del laboratorio (COMO LIMS), o en los de
CROMATOGRAFIA (EMPOWER; CHEMSTATION; EZChrome). El modo de operacin
de este programa se conoce como modo ONLINE, (de Ah el NOMBRE), por lo que
es critico, el trabajo en Normativdad con GMPs, considerar que, las actividades
del uso de red y banda ancha son monitoreadas por parte del equipo de
seguridad informtica, asi que las operaciones permitidas para el manejo de este
tipo de programas informticos, de nueva cuenta son definidas por un

ALGUNAS RECOMENDACIONES
Uso de contraseas: Las contraseas deben de ser cambiadas, al menos
cada 90 das, deben de tener al menos como mnimo una longitud de 8
caracteres, no deben de contener palabras comunes, o relacionadas con el
usuario, no usar el mismo password, para varios equipos.
La informacin impresa debe de contener la siguiente informacin: Base o
programa de datos que la genero, fecha y hora de emisin, de emisin,
usuario que la genero, tiempo de validez, o caducidad,( en caso de
procedimientos de operacin o trabajo), nombre, no. De hojas emitidas,
firma electrnica, (si aplica). En caso ya no ser utilizada, debe de ser
inmediatamente destruida en un triturador de papel.
Es recomendable que equipos como los cromatgrafos, espectros, o
disolutores, estn conectados via remota a los equipos de computo, para
el cumplimiento de la CFR 21, y asi como normativas de seguridad
informtica en el laboratorio.

ALGUNAS RECOMENDACIONES
Se deben cuidar las conexiones remotas, como las de WIFI, redes
telefnicas no autorizadas, o de otro tipo (como banda ancha), asi como el
ingreso de cualquier tipo de computo, ajeno a las instalaciones, (Laptos,
telfonos inteligentes, tablets, etc, ya que no se cuenta con la garanta de
seguridad de que puedan ser intervenidos via remota, y con ello accedan a
redes privadas de la empresa. Es una practica comn, que las seas
telefnicas de los equipos ajenos se encuentren bloquedas por seguridad,
por lo que las llamadas telefnicas, se realizan mediante extensiones, o
chat privado.
Puedes ingresar tu telfono personal, con un registro previo, asi como una
identificacin que te acredite como personal que se encuentra laborando o
visitantePFFFF
ASI QUE ES MUY COMUN QUE CUANDO VISITES LAS INSTALACIONES DE LA
EMPRESA,TE PIDAN HACER ESTE REGISTRO EN LA ENTRADA

WTF

OBSERVACIONES
Como se menciona en la primera parte de esta presentacin,
muchas de las actividades relacionadas con el sistema de calidad
se realizan mediante programas informticos especializado
( Trackwise, LOS, IdeaFOR CON (Desarrollado por BI) (gestin de la
documentacin interna de BI), LIMS, SAP, asi que son igualmente
susceptibles al igual que el software especializado de ser
auditados, y con sus respectivas medidas de seguridad
informtica, y de igual forma se puede tener acceso via remota
desde cualquier parte del mundo para el escrutinio de las bases de
datos por parte de la casa matriz, o responsables, para proceso
intenos de la empresa, asi que se debe ser cuidadoso, en el
manejo de la informacin empleada, ya que puede incluir acciones
legales, para quien haga un uso inadecuado de la informacin

AUDIT TRAIL
Anaudit trail(also calledaudit log) is a security-relevant
chronological record, set of records, and/or destination and source
of records that provide documentary evidence of the sequence of
activities that have affected at any time a specific operation,
procedure, or event.
Audit records typically result from activities such asfinancial
transactions,scientific
researchand
health
care
data
transactions,orcommunicationsby individual people, systems,
accounts, or other entities.

EL BENDITO AUDIT TRAIL

Audit Trail (tambin llamado registro de auditora) es un registro
cronolgico de seguridad permanente, o un conjunto de registros,
(en sistemas o programas informticos), que identifica el destino
y el origen de datos generados, y que proporcionan evidencia de
la secuencia de actividades ejecutas dentro de la operacin de un
sistema o programa.
Los registros de auditora generalmente son el resultado de
actividades como las transacciones financieras, transacciones de
datos de investigacin y cuidado de la salud, (sector farmacutico
p.ej.), cientficos o comunicaciones por personas individuales, los
sistemas, las cuentas, u otras entidades.
Audit Trailes una herramienta de uso cotidiano que permite
hacer el seguimiento de los accesos y cambios efectuados en
cualquiera de los campos de los archivos electrnicos de un

AUDIT TRAIL

Y COMO PARA QUE ME PODR

SERVIR AUDIT TRAIL?..
Debido a que muchos de los equipos empleados en el laboratorio,
son susceptibles, a ser operados mediante sistemas de computo,
es muy comn o casi norma , la operacin de programas
especializados, con un gestor de operacin que cuente con Audit
trail, que monitoree, e impida, si es el caso, la manipulacin de los
parmetros de operacin, generacin de datos analticos, o bien
de procesamiento de los mismos, y que garantice que se las
condiciones de operacin del equipo y del software son
reproducibles, confiables, trazables y auditables.
Un registro de Audit trail, permite verificar que los registros
electrnicos, e impresos, cumplan con la trazabilidad buscada en
los procesos de auditoria, asi que es muy comn que p.ejm, si se
solicita un cromatograma, la hoja de trabajo, se solicite tambin el
registro de audit trail, o bien el acceso electrnico en el equipo de

AUDIT TRAIL
Un registro de Audit trail, adems cuenta como medida de
seguridad , candados electrnicos, propios, y le asigna una firma
electrnica
a los archivos, para que estos no puedan ser
modificados, la FDA pide evidencia, por parte de expertos en
seguridad informtica, de la no alteracin de dicha
informacin
CONSIDERAR ESTO, para la operacin de software especializado
en CROMATOGRAFIA; esto da pie a que la estructura del mismo
este jerarquizada, como medida de seguridad, y para que de
garanta de la operabilidad y manejo del mismo, en el equipo
(HPLC o gases segn sea el caso).

REGISTRO DE SISTEMAS ELECTRNICOS (EN GMPS)

USO DEL SOFTWARE DE CROMATOGRAFIA (HPLC & GASES)
PARTE III

JERARQUIZACIN DEL SOFTWARE DE

CROMATOGRAFA
RECORDAR:

SOFTWARE

PROYECTO
METODO DE OPERACIN (PARAMETOS DE
OPERACIN Y ADQUSICION DE DATOS,
SECUENCIAS ETC.)
METODO DE PROCESAMIENTO DE DATOS
(EVENTOS DE INTEGRACION)
METODOS DE REPORTE

REGISTRO DE AUDIT TRAIL

MIGRACION A BASES DE DATOS VIA REMOTA

OTROS

COMO OPERAMOS UN EQUIPO DE

CROMATOGRAFA?

EL SOFTWARE
Muchos de los programas mas conocidos y empleados, son de Waters, y
Agilent, (sin hacer publicidad), ya que fueron los primeros en adoptar estas
medidas de seguridad en sus equipos, y que con relativa facilidad, se han
podido actualizar, sin la forzosa necesidad de cambiar por un equipo nuevo,
adems de ser compatibles, con muchos de los modelos de equipos de
cromatgrafos y otros equipos de modelos con aos en el mercado. Entre los
mas difundidos, se encuentran EMPOWER 2 y 3 (Waters), CHEMSTATION
(Agilent), Y SU VERSION PARA MANEJO DE DATOS VIA REMOTA CHEMSTORE
(Agilent), su versin actual o migracin, actualmente empleada en los equipos
de modelos mas reciente, EZChorme (Agilent), Galaxie (GC) (Varian Agilent),
existen como todo, otros modelos de software como CHROMELEON 7.2 (Dionex
Thermo Scientific), o para por ejemplo en Absorcin Atmica, SPECTRAA ,
(Varian), que cuentan con una estructura similar a de los de cromatografa.

IMPORTANTE
La estructura de cada programa varia, aunque se encuentren
jerarquizados, esta puede variar de proveedor a proveedor,
pueden existir subcategoras, o bien estar englobadas dentro de
una sola; considerar que un mismo programa puede operar
diversos modelos de equipos, como es el caso de CHEMSTATION
(actualmente en desuso).; que puede operar equipos de
cromatografa de lquidos, o bien de gases.
Las condiciones de uso se ajustan de acuerdo a los analitos a
analizar, asi que por lo general, el usuario (o el analista en este
caso), solo adopta una plantilla donde vienen establecidos, los
parmetros de analisis, el registro y adquisicin de datos, asi como
el procesamiento, dichas plantillas de analisis, son establecidas,
por un administrador del sistema, que crea por default, los
parmetros de operacin del equipo, previamente validados, y en
acuerdo con todos los analistas

EL PROYECTO
ES UN NIVEL O CARPETA CREADO DENTRO DEL SOFTWARE QUE
ENGLOBA TODOS LOS ARCHIVOS, Y/O PLANTILLAS DEFINIDOS
PARA LA OPERACIN DEL EQUIPO; PARA EL ANALISIS DE UN
ANALITO O PRODUCTO; SEGN SEA EL CASO
Es comn que se tenga que acceder a esta carpeta mediante una
contrasea y usuario designado por el administrador del sistema.

EZCHROME/EMPOWER 2

CREACION DE UN METODO DE
OPERACION
Una vez seleccionado el proyecto de trabajo, lo siguiente es seleccionar el mtodo con el
cual el equipo va operar, si eres el administrador o tienes privilegios de administrador,
podremos seleccionar las condiciones de trabajo, para el equipo, asi como la forma en la
cual el equipo adquiere los datos (El ajuste del detector).
Los canales, constituyen el modo en que el sistema de adquisicin de datos (la PC), se
comunica con los detectores, asi que es importante su correcto ajuste antes de la
operacin del equipo. Algunos equipos cuentan con varios detectores, asi que es
importante la configuracin de todos los parmetros, en la PC, para que se pueda cargar
el mtodo de manera apropiada, por lo general se cuenta con una interfaz, que regula la
operacin de cada detector.
Antes del ingreso al mtodo , dependiendo del software, tendrs que ingresar a ventanas
adicionales, o al modo online, segn sea el caso para acceder, o crear el mtodo de
trabajo segn sea el caso.
Empower tiene la particularidad, de poder ser empleado mediante un asistente de ayuda
visualizacin rpida (denominado Quickstart) o bien la versin completa del programa
denominada Empower Pro, u Open Acceses, segn sea el caso.

ALGUNAS OBSERVACIONES
Dentro de la creacin o adquisicin del mtodo, los principales parmetros, de operacin
incluyen, el canal con el cual el detector se comunicara con el equipo de computo, si es un
detector de UV/Visible, seleccionar la longitud de onda a la cual va a trabajar, el ajuste en
cero, cuando la lnea base se encuentre estable, (si es el caso), la seal ruido del sistema, el
flujo de trabajo, la presin de trabajo, y la presin maxima ( ya se por gradiente, o isocratico)
de la fase mvil, la seleccin de las lneas de trabajo,(se debe incluir, el volumen y la
composicin en los reservorios de fase mvil), en el caso de HPLC, tambin incluye la
temperatura de trabajo de la columna, (entrada y salida), el volumen de inyeccin, el
volumen de enjuague, la temperatura a la cual se encontraran los viales, el tiempo de la
corrida de nuestra secuencia. Creacin de rampas de temperatura para columnas, y el horno
en GASES, flujo de los gases acarreadores, etc.
Los equipos actuales, tienen la ventaja de estar automatizados, as que antes de empezar a
analizar el equipo debe de alcanzar las condiciones de trabajo, deseadas, por lo que se puede
programar el tiempo al cual el equipo comenzara a trabajar en dichas condiciones , asi como
el tiempo de anlisis.

RECORDAR
Es importante considerar, que por Buenas practicas, tomar en cuenta, la composicin de la
fase mvil, o fases mviles empleadas, asi, como su pH, el flujo el cual se va a trabajar, ya
que en muchos casos, se trabaja con solventes o buffers que son incompatibles, lo que
puede modificar el flujo de trabajo del sistema, lo que puede modificar la respuesta de la
seal del equipo, o de los parmetros cromatgraficos (de la Adecuabilidad) o bien en el
caso de buffer provocar la precipitacin de las sales de los buffers en las lneas, por lo que es
recomendable, tener acceso, a la purga de las bombas y de los sistemas de lneas para su
lavado, de manera peridica.
Es importante el ajuste adecuado, de los parmetros de trabajo para el acondicionamiento,
de la columna cromatografica, considerar tambin el volumen muerto, al cual el solvente de
trabajo puede generar una respuesta, para el calculo del numero de platos tericos, (en la
Adecuabilidad), asi como la longitud y tamao de particula de nuestra columna.
Es importante que durante la creacin de una secuencia de inyeccin, se establezca el orden
de inyeccin (estndares, blancos, muestras, Adecuabilidad del sistema), por lo general por
buenas practicas, se establece la Adecuabilidad del sistema con dos o mas estndares, e
intercalar estndares intermedios cada 6 inyecciones (recomendable), o 10 inyecciones.

ADECUABILIDAD Y CUANTIFICACION
El promedio de dos estndares se considera, (5 o 6 inyecciones del estndar 1, y 2
inyecciones del estndar 2), junto con el valor del rea obtenida, de cada estndar para ver
el estado de nuestro sistema cromatgrafico durante las inyecciones, si no cumple con los
parmetros, establecidos, se debe preparar un tercer estndar para realizar el promedio de
los tres estndares, o sino se reinicia la secuencia cromatografica, verificar que adems del
valor de los estndares, estos cumplan con las condiciones como platos tericos, factor de
capacidad, de simetra, resolucin, tiempo de retencin de los picos, etc. En todo momento.
El intercalamiento de estndares entre inyecciones se conoce como Bracketing, y se
recomienda realizarlo en corridas muy largas, y la cuantificacin con el estndar se realiza
con el promedio de todos los estndares intercalados, (es la mejor practica, y se tiene la
certeza del comportamiento de la secuencia durante todas las inyecciones), aunque tambin
es valido, utilizar el promedio de los estndares inyectados de manera inicial, por lo que si
se utiliza, se debe de repetir la inyeccin de estndares, como si se tratara de la
Adecuabilidad, y realizar el calculo de la cuantificacin con estos, (verificar que cumplan con
las condiciones antes mencionadas).

PORQUE TANTAS INYECCIONES?

DEBIDO A LA NATURALEZA DEL SISTEMA EN CROMATOGRAFIA, y EN SISTEMAS ANALITICOS;
QUE EMPLEAN UNA GRAN CANTIDAD DE MUESTRAS ANALIZADAS; como el COT; se debe
garantizar, que nuestro sistema se encuentra dentro de un rango aceptable de
reproducibilidad. EN cromatografa son muchas la variables que afectan a nuestro sistema (la
fase mvil, su composicin, el flujo, la temperatura, la presin, el volumen de inyeccin de la
muestra, el volumen del vial, por lo que la reproducibilidad de la seal generada es variable.
Estas consideraciones se pueden tomar en cuenta, ya que el equipo puede hacer de manera
automtica, si se realizan los clculos (como se menciona mas adelante en la presentacin), o
bien se realizan de manera manual. Dentro de los parmetros de operacin tambin se puede
solicitar dentro del mtodo, que el equipo haga inyecciones considerando la Adecuabilidad, y
el braketing durante las inyecciones, o bien nosotros se lo definamos por default durante la
creacin de la secuencia de corrida. Todos estos son parmetros establecidos durante la
creacin del mtodo de trabajo, por parte del administrador, del sistema (preferentemente
apegado a GMPs), o bien definidos por el usuario del sistema siguiendo el mtodo de analisis.

NUESTRA SECUENCIA
DOS BLANCOS (Verificar antes la estabilidad de la lnea base).
ESTANDARES DE ADECUABILIDAD (DOS O MAS SEGN SEA EL CASO) INCLUYE:
*5 o 6 INYECCIONES DEL ESTANDAR 1 (usar el promedio para la confrontacin)
*DOS INYECCIONES DEL ESTANDAR 2 (usar el promedio para la confrontacin)
*DOS INYECCIONES DEL ESTANDAR 3 si es requerido
Si se utilizan estos para cuantificar, repetir las inyecciones en el mismo orden para el promedio del estndar 1 (5 o 6 inyecciones)
*LAS MUESTRAS, IDENTIFICADAS DE ACUERDO A GMPs (Las muestras se identifican con el No. De lote, No, consecutivo, iniciales de la prueba
realizada. API, Ej: Lote. 95607 SUSTANCIAS RELACIONADAS, MELOXICAM, las muestra se identificaran: 95607 01 SUSRELMELOX , en el caso de
realizar muchas inyecciones es valido tomar nicamente los ltimos 3 o 2 dgitos del lote, las iniciales de la prueba, y el API , y un no. Consecutivo Ej.
60701SRMX ( Mas de 30 o 50 inyecciones recomendable).
*INTERCALAR EL ESTANDAR 1 si se emplea bracketing, en corridas, (cada 6 inyecciones de muestra) muy muy largas, de mas de 100 inyecciones se
considera, intercalar un segundo estndar. Se debe cerrar con un estandar el final de la secuencia,
*NUESTRA SECUENCIA DE LAVADO.
La reproducibilidad de las inyecciones debe de tener un C.V. no mayor al 2% o en algunos casos no mayor al 1.5%

CONSIDERACIONES
*En algunos corridas, como las empleadas en el seguimiento de la pureza cromatografica, en
la determinacin de impurezas (en la industria qumica), se emplea estndares intermedios de
confrontacin, para evaluar el comportamiento de nuestro sistema.
En el caso de determinacin de trazas, o en algunos mtodos como sustancias relacionadas,
es importante adicionar una muestra que contenga una solucin que determina el limite de
cuantificacin (el 0.05% de la concentracin relativa del API), incluida ya sea al inicio o
intermedio, de la corrida, que sirve como referencia para determinar que seales obtenidas
(las reas), son descartadas durante la cuantificacin, de nuestros analitos,(impurezas no
detectables, o trazas no cuantificables), abajo del valor de la seal de nuestra solucin para
el limite de cuantificacin. (es importante que la seal ruido sea mnima y la lnea base sea
estable).
En el caso de sustancias relacionadas, antes de la corrida con nuestras muestras es
recomendable realizar una corrida nicamente con los estndares para determinar los
tiempos de retencin relativos, de las impurezas que se van a detectar, verificar el
comportamiento de nuestros estndares con impurezas, de corridas anteriores, para ver que
no se haya movido, el tiempo de retencin. (Critico para pureza cromatografa, sustancias
relacionadas, y estabilidades).

Y PARA GASES
DEBIDO A LA SENSIBILIDAD QUE TIENE EL METODO DE GASES ES
IMPORTANTE TENER ALGUNAS CONSIDERACIONES:
Durante la creacin de un mtodo, existen parmetros que
requieren ser ajustados especficamente para cada analito, como la
temperatura de la columna, (creacin de un rango de temperaturas,
conocido como rampa), la temperatura de acondicionamiento del
horno, y de trabajo, una temperatura limite. El flujo de los gases
acarreadores, y su presin,(Hidrogeno, Aire comprimido;
Nitrgeno), sensibilidad del inyector, y el volumen de inyeccin, su
temperatura (la del vial antes de inyectarse), tambin se puede
configurar si se realiza un inyeccin completa, o fraccionada, (A
esto conoce como Split/Splitless), adems del inyector. esto
dependiendo de la naturaleza el analito, (esto se realiza en
muestras liquidas o con solventes lquidos poco volatiles).

LA REPRODUCIBILIDAD DE LA
INYECCION ES CRITICA EN GASES
Cabe hacer notar que la inyeccin es un parmetro que se debe de cuidar, en el desempeo
del sistema cromatografico en gases, esto debido a la naturaleza del analito y del mismo
sistema, ya que son compuestos de alto peso molecular o que son muy voltiles, por lo que la
correcta inyeccin en el sistema cromatografico, es critica. Se han ideado diversas soluciones,
esto con diversos sistema de inyeccin, que son suspectibles a ser configurados durante la
creacin del mtodo de operacin, por lo regular tienen sus propios mtodos de operacin.
Entre los sistema de inyeccin, automatizados, estn los de vlvulas de inyeccin de gas, los
de desorcion trmica, y los mas utilizados conocidos como Headspace, cada uno de estos
sistemas tienen parmetros especficos de operacin. Headspace, es un mtodo de inyeccin
especifico, y comnmente utilizado y diseado para mtodos como Solventes Residuales, es
un accesorio, que se incluyen en el equipo, o de manera independiente y tiene la ventaja de
realizar el manejo de mas de 100 inyecciones en corridas con un periodo de tiempo largo, y
que garantizan reproducibilidad.

HEADSPACE
Es aplicable al anlisis directo de contaminantes voltiles en muestras solidas o
liquidas.
El fundamento de este sistema de inyeccin consiste en analizar una alcuota
de la atmosfera que se encuentra en contacto con la muestra, con el fin de
determinar en ella la fraccin vaporizada de los componentes que se
encuentran en equilibrio con la muestra slida o liquida.
Para realizar el anlisis por medio de esta tcnica, la muestra se introduce en
un vial hermticamente cerrado y se somete a una temperatura previamente
fijada suficiente para que las fases de los compuestos analizar alcancen el
equilibrio, es decir que la presin parcial de cada componente en la atmosfera
del vial sea igual a su presin de vapor a la temperatura de trabajo.
En esencia el sistema de inyeccin Headspace consta de un horno que tiene
una fuente de calor y que se mantiene a una temperatura constante.

SOFTWARE GALAXIE (GC)

GALAXIE (GC)

UN GC CON EL ACCESORIO DE
HEADSPACE DE AGILENT

DE NUEVO
El Accesorio puede ser configurado desde su propio mtodo de
operacin, o bien desde el mismo, los parmetros de operacin
comnmente utilizados, son el tamao del vial utilizado, el volumen de
la muestra de inyeccin, (De la fraccin de la vaporizacin), la
temperatura del termostato del horno del accesorio (Headspace), el
tiempo de calentamiento de la muestra, el tiempo de operacin, la
calibracin del brazo robtico, (Por ello es importante el ajuste del
tamao de los viales)

HEADSPACE
Los sistemas de inyeccin mas comunes, en Headspace, una
jeringa automatizada termostizada, y un sistema de
desplazamiento por despresurizacin:

LA SECUENCIA
5 blancos, (verificar dentro de lo posible la estabilidad de la lnea base)
6 o 5 inyecciones del estndar para cuantificacin
*si se utilizan estndares internos, o para limite de cuantificacin, verificar que durante la
inyeccin exista al menos una resolucin no menor a 1 y una reproducibilidad no mayor al
15%. (Para solventes residuales)
La muestras con estndar interno, considerar una reproducibilidad entre inyecciones no
mayor de 15% (C.V.).

Se pueden realizar n cantidad de inyecciones hasta verificar la Adecuabilidad del sistema,

antes de proceder con la secuencia con las muestras, pero es recomendable, y acuerdo,
con el mtodo de solventes residuales 6 Inyecciones, cada laboratorio considerar realizar
inyecciones adicionales, considerar que se realizan cuantificacin con un estandar o
estndares internos.
Considerar los dems parmetros cromatograficos como no.de platos, factor de capacidad,
de simetra, tiempo de retencin, y tiempo de retencin relativo.

PROCESAMIENTO DE DATOS
Es importante establecer, como el sistema de datos (el equipo de
computo), adquiere y procesa, los datos obtenidos (la seal) durante una
corrida cromatografca, es importante considerar que nuestros datos
cumplen con las condiciones de Adecuabilidad del sistema, para
garantizar, que la corrida cumple con las condiciones que garantizan la
reproducibilidad cada inyeccin de la secuencia.
La seal debe de tener la caracterstica, de tener un comportamiento
gaussiano, adems de cumplir con bajo nivel de seal ruido, una lnea
base estable, y otras caractersticas, consideradas en cromatografa,
como la simetra, la resolucin, el ancho de pico, el coleo, el numero de
platos tericos, etc. Entre otros.

MTODOS DE ANLISIS
CUANTITATIVO
Existen cinco mtodos comnmente para realizar clculos
cuantitativos en un analisis cromatograficos. Dependiendo de las
caractersticas del analisis, de la precisin y exactitud que se
requiera es el mtodo que se utilizara para efectuar los clculos.
NORMALIZACION DE AREAS
FACTOR DE RESPUESTA
CALIBRACION ABSOLUTA
ESTANDARIZACION INTERNA
ADICIONES DE PATRON.

LOS CALCULOS
Cada uno de los mtodos de cuantificacin se ajustan de acuerdo al mtodo de
anlisis, as como para obtener la mejor respuesta analtica, es muy comn que
el programa haga la cuantificacin por alguno de estos mtodos, as que es muy
comn el ingreso de los datos, como pesos de los estndares, valores de la
seal, (reas, etc), para la cuantificacin, el mtodo de procesamiento de los
datos, de igual forma, se establece por un administrador del sistema. En el
reporte analtico, se debe de anexar a los cromatogramas, los clculos por parte
del programa.
La integracin de la seal, es un parmetro critico para la cuantificacin, los
diversos criterios de integracin se denominan comnmente como eventos de
integracin. Es todo un grupo de parmetros, para considerar como se realiza el
procesamiento de las seales adquiridas; en muchas ocasiones la seal no tiene
un comportamiento gaussiano, por lo que deben considerarse algunos ajustes al
realizar la integracin.

LOS EVENTOS INTEGRACION

Los eventos temporizados de integracin se utilizan para personalizar la
integracin de ciertos picos o regiones del cromatograma.
Existen dos formas de agregar los eventos de integracin temporalizados, a un
mtodo de procesamiento. De forma manual adicionando los eventos a una tabla
de integracin, o bien de manera grafica en el cromatograma. (Empower
2/Ezchrome). La configuracin de la tabla varia de acuerdo al programa utilizado,
pero en ella se adicionan bsicamente todos los eventos que se van a emplear
durante la integracin del cromatograma.

ALGUNOS DE LOS MAS UTILIZADOS

Width: (Anchura), Este evento es usado para calcular un valor de agrupamiento o
alisamiento, entre el inicio y el fin de un pico.
Threshold (Umbral o limite). Este parmetro es la primera derivada , que se utiliza
para permitir que el algoritmo de integracin para distinguir el arranque y parada
de los picos de ruido de lnea de base y la deriva.

OTROS EVENTOS

LOS EVENTOS DE INTEGRACIN

CADA PROGRAMA ESTABLECE PARAMETROS ESPECIFICOS PARA LA
INTEGRACION DE LA SEAL; POR EJEMPLO; MIENTRAS QUE
CHEMSTATION E EZCHROME DEJAN ABIERTO LOS VALORES QUE SE
PUEDEN ESTABLECER PARA LA INTEGRACION; EMPOWER 2
ESTABLECE PARAMETROS POR DEFAULT, COMO EL ANCHO, Y EL
VALOR UMBRAL CONSIDERADO COMO SEAL RUIDO. (AUNQUE
PUEDEN SER MODIFICADOS SI SE MANEJA UNA CUENTA CON
PRIVILEGIOS DE ADMINISTRADOR.

MTODOS DE REPORTE
Una vez establecido el mtodo de cuantificacin, y de procesamiento de la seal, lo siguiente
es establecer una plantilla o mtodo de reporte, que pueden ser de forma sencilla, con la
informacin bsica, o bien plantillas avanzadas, con toda la informacin requerida en los
reportes farmacuticos, la informacin bsica necesaria incluye los siguientes datos: NOMBRE
DEL API, O MEDICAMENTO, NOMBRE DE LA DETERMINACION: (EJ. SUSTANCIAS
RELACIONADAS), NO. DE LOTE, SUSTANCIAS DE REFERENCIAS USADAS, NOMBRE DE LA
MUESTRA (BLANCO, ESTANDAR, ETC.), PUREZA, EQUIPOS, DETECTOR, LONGITUD DE ONDA (SI
APLICA), NOMBRE DE LA SECUENCIA, DIRECCION DEL ARCHIVO, DE LA SECUENCIA, ASI COMO
DE CADA ARCHIVO INDIVIDUAL, FECHA DE LA CREACION, Y ADQUISICION DE LOS DATOS DE
LA SECUENCIA, ORDEN DE INYECCION DE CADA MUESTRA (por lo regular estos datos se
presentan en forma tabulada, para una mejor visualizacin), JUNTO A ELLOS SE REPORTA, LOS
VALORES DE LA SEAL, (AREAS), LOS PARAMETROS CROMATOGRAFICOS, COMO FACTOR DE
CAPACIDAD, SIMETRIA, PLATOS TEORICOS, COEFICIENTE DE VARIACION, PROMEDIO PARA EL
CASO ESTANDARES, Y POR SUESTO LOS CROMATOGRAMAS, YA PROCESADOS.

OBSERVACIONES
Recordar que para poder hacer una modificacin al mtodo de reporte, en el
caso de Empower 2 se debe de tener acceso al registro de Audit trail, para poder
modificar la fecha de registro, (Por GMPs), el programa guarda una hora de
registro en la adquisicin de la seal, en el caso de Ezchrome este parmetro
queda abierto, si se emplea una cuenta con privilegios de administrador,
Recordar que se tienen que imprimir reportes de cromatogramas de blancos,
estndares, y muestras, asi como uno de las inyecciones de Adecuabilidad.
El reporte que se genera en GC, es variable dependiendo, el programa utilizado,
pero si se emplea el equipo para solventes residuales, la secuencia mencionada,
en esta presentacin es una recomendacin por parte de la USP, y la
farmacopea europea, asi que se puede modificar numero de inyecciones del
estandar, y el C.V. dado la alta variabilidad en la reproducibilidad del mtodo, en
el reporte de gases, en el caso de operar con headsapce, se deben de reportar
los parmetros de operacin, de este sistema de inyeccin, para el reporte de
solventes residuales.

BIBLIOGRAFIA
Parte I
NOM-059-SSA1-2013:
http://www.dof.gob.mx/nota_detalle.php?codigo=5307536&fecha=22/07/2013
CFR 21 Parte 1 (buenas practicas de laboratorio) disponible en:
https://www.accessdata.fda.gov/scripts/cdrh/cfdocs/cfcfr/cfrsearch.cfm
Sistemas electrnicos:
(LIMS)
http://www.labware.com/es
(SAP)
http://go.sap.com/latinamerica/index.html
(Trackwise)
http://www.spartasystems.com/trackwise

BIBLIOGRAFIA
Parte II y III:
CFR 21 parte 11 (Sistemas, registros y firmas electrnicas)
https://www.accessdata.fda.gov/scripts/cdrh/cfdocs/cfcfr/cfrsearch.cfm
Manual de Usuario de Empower 2:
http://www.waters.com/webassets/cms/support/docs/71500031503ra.pdf
Guia de Uso rpido Ezchrome:
http://www.agilent.com/cs/library/usermanuals/public/User's%20Guide.pdf
*Manual de usuario de Galaxie Varian:
http://puhep1.princeton.edu/~
mcdonald/dayabay/Lu/rpc_cdroms/1.9SP2B/Manuals/91494700.pdf