Fibra diettica

Herrera Vlez Francisco Manuel

Qu es?
Se define como tal a los polisacridos y lignina que no son

digeridos por enzimas humanas; se trata de sustancias de

origen vegetal que forman un conjunto heterogneo de
molculas complejas.
No puede ser digerida por los las enzimas del tracto digestivo
humano pero puede ser fermentada parcialmente por las
bacterias del colon.

 Fibra diettica total: incluye a la totalidad de todos los

compuestos, fibrosos o no, que no son digeribles por las

enzimas del intestino humano como:
Polisacridos estructurales o polisacridos no-almidn:
Celulosa, Hemicelulosa, Pectinas, Afinosa, Estafinosa.
-Polisacridos no estructurales: Gomas,Muclagos.
- Sustancias estructurales no polisacridos: Ligninas.

Fundamento
El aislar la fraccin de inters (fibra diettica) por medio de

precipitacin selectiva y despus determinar el peso. En este caso, la

muestra es gelatinizada con pancreatina trmicamente estable y luego
digerida enzimticamente para remover la protena y el almidn. La
fibra diettica soluble es precipitada por la adicin de etanol, el
residuo total se filtra, se lava, se seca y se pesa. Para corregir el valor
obtenido, se determin protena y cenizas.
La enzima pancreatina degrada aquellos carbohidratos que son
digeribles para nosotros dejando la fibra.

 Los cambios de temperatura son muy importantes ya que la

pancreatina acta entre los 60-70C, y a temperatura de

ebullicin ocurre la gelatinizacin
Sirve para estabilizar el pH del medio siendo el pH ptimo de
la enzima y de esta manera evitar que
se pueda desnaturalizar, manteniendo su estructura y con ello
cumpliendo su funcin

Pesar por 1g de muestra en

matraces de 500 mL. El peso
de las muestras no debe diferir
en ms de 20 mg.

Adicionar 5 mg de proteasa
(disolver 50 mg de proteasa en
1mL de buffer de fosfatos.
Adicionar 0.1mL de la solucin
a cada matraz)

Adicionar 280 mL de etanol

95% precalentado a 60C.
Dejar en reposo 1 h. Aplicar
succin

Adicionar 50 mL de buffer de
fosfato 0.08M pH 6.0.Medir pH
y ajustar a pH 6 0.2 si es
necesario

Cubrir el matraz con papel

aluminio y colocarlos en un
bao a 60C por 30 minutos
con agitacin continua.

Pesar el crisol conteniendo la

celita.Humedecer y redistribuir la
cama de celita con etanol 78%.
Mantener la succin y
cuantitativamente transferir el
precipitado de la digestin
enzimtica.

Adicionar 0.1 mL de la solucin de

amilasa. Cubrir el matraz con papel
aluminio. Colocarlo en un bao a
ebullicin durante 15 min. Agitar
suavemente cada 5 minutos.El
contenido debe llegar a 95-100C

Enfriar a temperatura
ambiente, adicionar 10 mL de
HCL 0.325N . Ajustar el pH a
4.0-4.6

Lavar el residuo con 3

porciones de 20 mL de etanol
78% . Lavar con 2 porciones
de 10 mL de etanol 95%

Enfriar a temperatura ambiente

y ajustar pH a 7.5 0,2 con
aproximadamente 10 mL de
NaOH 0.275N

Adicionar 0.1mL de
amiloglucosidasa .Incubar a
60C por 30 minutos con
agitacin continua.

Lavar con 2 porciones de 10 mL de

acetona. Si se forma una forma una
goma, mover con la esptula para
mejorar la filtracin. Secar el crisol
conteniendo el residuo toda la noche
a 70C

Enfriar en desecador y
pesar. Restar el peso del
crisol con la celita para
conocer el peso del residuo

Analizar protena a uno de

los crisoles

Analizar cenizas al otro crisol

Corregir el residuo
restndole las cenizas y
protena correspondiente