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FACULTAD DE CIENCIAS

BIOLOGICAS
SEGUNDA ESPECIALIDAD EN
Microbiologa y Parasitologa
2016

CURSO DE

MICROBIOLOG
IA
Blgo. Ren Efran
Campana Quispe
CBP 3485 RNBE 0051

Las bacterias son la forma


de vida dominante en la
Tierra,
siempre lo han sido y
probablemente siempre lo
sern.
Stephen Jay Gould (19412002)

Microbiologa
La Microbiologa es
el estudio de los
microorganismos

microorganismos

BACTERIAS

VIRUS

HONGOS

PARASITOS

BACTERIAS

Estudio de la Microbiolgia

DIAGNOSTICO
MICROBIOLOGICO

En

medicina, una infeccin se define como la


invasin al organismo humano por cualquiera de
los agentes infecciosos conocidos incluidos los
virus, las bacterias, los hongos, los protozoarios,
los helmintos y los priones y la reaccin del
organismo en contra de ellos y sus toxinas.
Cuando la salud no se ve alterada por dicha
invasin, el proceso se denomina infeccin
subclnica. Cuando la salud se altera, el proceso
se conoce como enfermedad infecciosa.

PROPOSITO DEL DIAGNSTICO


MICROBIOLOGICO
colaborar estrechamente con los clnicos y
otros miembros del equipo de salud para
proporcionar el manejo ptimo de los
pacientes con enfermedades infecciosas, y
para prevenir la diseminacin de la
enfermedad a otros individuos

ESQUEMA DEL CICLO DIAGNOSTICO


Paciente con sntomas de Enfermedad
infecciosa consulta al mdico
Diagnstico clnico

El mdico interpreta el
informe y da el tratamiento

Se recogen muestras
para cultivo

Se prepara el informe
final y se enva al mdico

Se enva al Laboratorio
junto a un formulario

Puede
hacerse
informes
presuntivos

Antibiograma
Se examina subcultivos y
resultados de identificacin

Los datos se ingresan a un


terminal de computadora o
libro de registro

se examina los cultivos


y se emplea sistemas de
identificacin

La muestra se examina en
forma directa se realiza
tinciones

Se eligen los medios de


cultivo, se inoculan e
incuban

El laboratorio de Microbiologia
Es responsable de:

Fase

pre analtica
Fase analtica
Fase post analtica

FASE PRE ANALITICA

Recepcin y preparacin
del paciente.

Obtencin
Identificacin
Manipulacin
Conservacin
Transporte
Aceptacin y rechazo

muestras

FASE PRE ANALITICA


Solicitud de anlisis
Debe contener los datos personales del paciente, nmero de identificacin,
muestra que se solicita y tipo de anlisis (rutinario, anaerobios, parsitos,
etc.), informacin relevante (viajes, profesin, etc.), si el paciente ha estado
tomando antibiticos, etc...
Toma de muestra
Las muestras pueden ser tomadas por el propio paciente, por un ATS, por un
mdico, etc. Es fundamental que se cumpla con los requerimientos adecuados
(esterilidad, recipiente adecuado, volumen, mnima contaminacin con la
microflora normal, etc.)
Transporte de muestra al Laboratorio
Es fundamental que la demora sea mnima. Mantener la viabilidad de los
microorganismos durante el transporte. Medios de transporte, refrigeracin,
anaerobiosis, etc.

FASE ANALITICA

FASE ANALITICA

Aislamiento primario

Identificacin bacteriana

Susceptibilidad antimicrobiana

Deteccin de mecanismos de
resistencia

Pruebas moleculares

FASE POST ANALITICA

Reporte de los resultados


Ingreso sistemtico de los resultados positivos, al menos
con la siguiente informacin:

Nombre, apellido, fecha de nacimiento, sexo, servicio de


hospitalizacin
tipo de muestra y fecha de obtencin
Especie bacteriana aislada: Identificacin y sensibilidad
antimicrobiana

Revisin de la calidad de la informacin


Informacin mensual: Por muestra, por sitio de infeccin,
servicio etc.
WHONET 5.4.lnk

El laboratorio de Microbiologia
Diagnostico
etiolgico

Estudios de
susceptibilidad

Estudios de una
manera regular y
continuada
Informacion
epidemiologica

Deteccin de
mecanismos de
resistencia
Seguir la
evolucin de la
susceptibilidad
antimicrobiana

Oportunos
Confiables

RECOLECCION DE
MUESTRAS PARA ESTUDIO
MICROBIOLOGICO

RECOLECCION DE MUESTRAS
1.

La muestra clnica debe ser material del sitio de


infeccin real

2.

Debe establecerse el momento ptimo para la


recoleccin de muestras

3.

Debe obtenerse una cantidad suficiente de la


muestra
Debe usarse dispositivos de recoleccin,
envases y medios de cultivo apropiados
Toda vez que sea posible debe obtenerse
muestras antes de la administracin de
antibiticos
El envase con la muestra debe de rotularse de
forma correcta

4.
5.

6.

Diagnstico de infeccin bacteriana en diferentes


sitios del cuerpo: Vas urinarias
Signos y sntomas

Muestra para
cultivo

Especies bacterianas
asociadas a la infeccin

Infeccin vesical
Piuria
Disuria
Hematuria
Dolor suprapbico
Infeccin renal
Dolor en la regin
renal
Sensibilidad en el
ngulo costovertebral

Recoleccin
de orina por
tcnica del
chorro medio

Enterobacterias
Escherichia coli
Klebsiella
Proteus
Enterobacter

Orina por
sondeo
Aspiracin
suprapbica

Enterococos
Pseudomonas aeruginosa
Staphylococcus saprophyticus

Recoleccin de muestras de sitios anatmicos y rganos


especficos

Recoleccin de orina con tcnica limpia de la parte


media del chorro

Recoleccin de muestras de sitios anatmicos y rganos


especficos

Aspiracin vesical suprapbica

Recoleccin de muestras de sitios anatmicos y rganos


especficos

Obtencin de orina por sondeo A: sistema abierto. B: sistema cerrado

Diagnstico de infeccin bacteriana en diferentes


Signos
y sntomas
para cultivo Especies bacterianas
sitios
del cuerpo: Muestra
Vas respiratorias

asociadas a la infeccin

Vas altas: nariz y senos


paranasales
Cefalea
Dolor y enrojecimiento
malar
Rinitis
Radiografa: consolidacin
sinusal

En forma aguda
Hisopado nasofarngeo
Lavado sinusal

Garganta y faringe
Enrojecimiento y edema
de mucosa
Exudacin de amgdalas
Formacin de
seudomenbrana
Agrandamiento de ganglios
cervicales

Hisopado de parte
posterior de la faringe

En forma crnica
Lavado sinusal
Biopsia quirrgica

Hisopado de amgdalas
(absceso)
Hisopado nasofarngeo

- Streptococcus pneumoniae
- Estreptococo beta-hemoltico
grupo A
- Staphylococcus aureus
- Haemophilus influenzae
- Klebsiella y otras
enterobacterias
- Bacteroides y otros
anaerobios
- Estreptococo beta-emoltico
grupo A
- Corynebacteriun diphteriae
- Bordetella pertusis
- Neisseria gonorrhoeae

Recoleccin de muestras de sitios anatmicos y rganos


especficos

Tcnica para obtener material para cultivo de garganta

Recoleccin de muestras de sitios anatmicos y


rganos especficos

Tcnica de toma de muestra de hisopado nasofarngeo

Recoleccin de muestras de sitios anatmicos y


rganos especficos

Puncin de seno
maxilar

Diagnstico de infeccin bacteriana en diferentes


sitios del cuerpo: Vas
respiratorias
Especies bacterianas
Signos y sntomas
Muestra para
Vas bajas: pulmones y
bronquios
Tos: con sangre o profusa
Dolor torcico
Disnea
Consolidacin pulmonar
Estertores y ronquidos
Ruidos respiratorios
disminuidos
Infiltrados radiolgicos
Lesiones cavitarias
empiema

cultivo

asociadas a la infeccin

Esputo
Sangre

- Streptococcus pneumoniae

Secrecin con
broncoscopio
Aspiracin
Transtraqueal
Biopsia
pulmonar

- Haemophilus influenzae
- Sataphylococcus aureus
- Klebsiella pneumoniae y
otras Enterobacterias
Especies de Legionella
- Fusobacterium nucleatum,
- Bacteroides sp.
- Plevotella y otras especies

anaerobias

Recoleccin de muestras de sitios anatmicos y rganos


especficos

Vista frontal y lateral de la tcnica de


aspiracin translarngea (transtraqueal)

Diagnstico de infeccin bacteriana en diferentes


sitios del cuerpo: Tracto Gastroin-testinal
Signos y sntomas

Muestra para
cultivo

Diarrea
Disentera
purulenta
mucosa
sanguinolenta
Calambres
abdominales

Muestra de
material fecal
Hisopado
rectal o moco
rectal

Especies bacterianas
asociadas a la infeccin

- Campylobacter jejuni
- Salmonella sp.
- Shigella sp.
- Escherichia coli (EPEC,
EIEC, EHEC, ETEC,
EAEC, DAEC)
Hemocultivos
- Vibrio cholerae y otras
(fiebre tifoidea)
especies de vibrio
- Aeromonas sp.
- Plesiomonas shigeloides
- Yersinia enterocolitica
- Clostridium difficile

Diagnstico de infeccin bacteriana en diferentes


Especies
bacterianas asociadas a
del cuerpo:
Heridas
Signos y sntomassitios
Muestra
para
Secrecin: serosa o
purulenta
Absceso: subcutneo
o submucoso
Enrojecimiento y
edema
Crepitacin
(formacin de gas)
Dolor
Ulceracin o
formacin de un
tracto sinuoso

cultivo

la infeccin

Aspiracin de
material
drenado

- Staphylococcus aureus
- Streptococcus pyogenes
- Enterococos sp.

Hisopado
profundo de
drenaje
purulento

- Clostridium sp.
- Bacteroides sp. y otras
bacterias anaerobias

Biopsia de
tejido

- Enterobacterias: E. Coli,
Klebsiella, Enterobacter,
Citrobacter, Proteus.
- Pseudomonas aeruginosa y
otros BGN no fermentadores

Diagnstico de infeccin bacteriana en diferentes


sitios del cuerpo: Meninges

Signos y sntomas

Muestra para
cultivo

Especies bacterianas asociadas a


la infeccin

Cefaleas
Dolor de cuello y
espalda
Cuello rgido
Nuseas y vmitos
Estupor o coma
Erupcin cutnea
petequial

Lquido
cefalorraqudeo

- Neisseria meningitidis
- Haemophilus influenzae
- Streptococcus pneumoniae
- Estreptococos betahemoltico del grupo A y B
- Listeria monocytogenes

Aspiracin
subdural
Hemocultivos
Cultivo de
garganta o esputo

- Enterobacterias: pacientes
debilitados, lactantes y poscraneotoma
- Cryptococcus neoformans
(pacientes con VIH)

Recoleccin de muestras de sitios anatmicos y rganos


especficos

Tcnica de puncin lumbar para obtener LCR

Diagnstico de infeccin bacteriana en diferentes


sitios del Muestra
cuerpo:
Aparato
genital
Especies bacterianas asociadas a
Signos y sntomas
para
Hombres
Secrecin uretral: serosa
o purulenta
Sensacin quemante al
orinar
Ulcera genital
Mujeres
Secrecin vaginal
purulenta
Sensacin quemante al
orinar
Dolor, espasmo y
sensibilidad abdominales
bajos
Chancro o chancroide
mucoso

cultivo

la infeccin

Secrecin uretral
Secreciones
prostticas

- Neisseria gonorrhoeae
- Especies de Chlamydia
- Haemophilus ducreyi
- Treponemma pallidun (sfilis)

Hisopado de
Cuello uterino
Recto (hisopado
de esfnter anal)
Hisopado uretral

- Neisseria gonorrhoeae
- Gardnerella vaginalis
especies de Mobiluncus y
otros anaerobios
No bacterias:
- Trichomona vaginalis
- Candida albicans
- Especies de Mycoplasma
- Especies de Chlamydia
- Virus del herpes simple

Examen con
campo oscuro

Recoleccin de muestras de sitios anatmicos y rganos


especficos

Tcnica para obtener


material endometrial
para cultivo

Diagnstico de infeccin bacteriana en diferentes


sitios
del cuerpo:
Bacteremia
Signos y sntomas
Muestra
para
Especies bacterianas asociadas a la
Fiebre en picos
Escalofrios
Endocarditis
Petequias en piel y
mucosas
Hemorragias en
astillas en uas y
Malestar general

cultivo

infeccin

Sangre: 2 a 3
cultivos /da con
intervalos de 1
hora o ms

- Especies de estreptococos
Grupo A: todas las edades
Alfa-hemolticos (endocarditis)
Grupo A, B, D en neonatos
- Staphylococcus aureus
- Streptococcus pneumoniae
- Escherichia coli
- Bacteroides fragilis y otras
bacterias anaerobias
- Pseudomonas auruginosa
- Listeria monocytogenes
- Haemophilus influenzae
- Salmonella typhi

Cualquier sitio
primario
sospechoso de
infeccin:
- LCR
- Vas urinarias
- Heridas
- Vias respiratorias

Recoleccin de muestras de sitios anatmicos y rganos


especficos

Tcnica de venopuncin para obtener sangre


para hemocultivo

Diagnstico de infeccin bacteriana en diferentes


sitios del cuerpo: Ojos
Signos y sntomas Muestra para
cultivo

Especies bacterianas asociadas a


la infeccin

Secrecin
conjuntival: serosa
o purulenta
Enrojecimiento
conjuntival: ojo
rosado
Dolor y
sensibilidad
oculares

- Especies de Haemophilus
- Especies de Moraxella
- Neisseria gonorrhoeae
- Staphylococcus aureus
- Streptococcus pneumoniae
- Streptococcus pyogenes

Secrecin
purulenta
Fondo de saco
inferior
Canto interno

- Pseudomonas aeruginosa

Diagnstico de infeccin bacteriana en diferentes


sitios del cuerpo: Odo medio
Signos y sntomas

Muestra para cultivo

Especies bacterianas
asociadas a la infeccin

Drenaje seroso o
purulento
Dolor profundo en el
odo y articulacin
temporomandibular
Cefalea purstil
Tmpano rojo o que
abomb.a

En forma aguda
No cultivo
Hisopado
nasofarngeo
Aspiracin tinpnica

En forma aguda
- Streptococcus pneumoniae
y otros estreptococos
- Haemophilus influenzae

En forma crnica
Drenaje del
conducto auditivo
externo

En forma crnica
- Peseudomonas
aeruginosa
- Especies de Proteus
- Bacterias anaerobias

Diagnstico de infeccin bacteriana en diferentes


sitios del cuerpo: Huesos y articulaciones
Signos y sntomas

Muestra para
cultivo

Especies bacterianas
asociadas a la infeccin

Tumefaccin articular
Enrojecimiento y
calor
Dolor con
movimientos
Sensibilidad con la
palpacin
Radiografias:
sinovitis u
osteomielitis

Aspiracin
articular
Biopsia sinovial
Aspiracin de
espculas seas o
mdula sea

- Staphylococcus aureus
- Streptococcus pyogenes
- Haemophilus influenzae
- Neisseria gonorrhoeae
-Streptococcus pneumoniae
- Enterobacterias
- Micobacterias

TRANSPORTE DE MUESTRAS

TRANSPORTE DE MUESTRAS
El objetivo primario en cuanto al transporte de
muestras para diagnstico consiste en mantener la
muestra lo ms cerca posible de su estado original
con un deterioro mnimo.
Las muestras deben trasladarse al laboratorio lo
antes posible. En un contexto hospitalario, se
aconseja un lmite de 2 horas entre la recoleccin y
la llegada de las muestras al Laboratorio. A menudo
es necesario un medio de transporte. Los medios de
transporte de Stuart, Amies y Cary-Blair son los que
se usan con ms frecuencia.

RECHAZO DE MUESTRA PARA


ESTUDIO BACTERIOLOGICO
Si las solicitudes y/o las muestras no cumplen los
requisitos mnimos indispensables para su
correcto procesamiento el laboratorio deber
aclarar las discrepancias con el servicio que las
envo, previo a su realizacin y en algunos casos
ser imposible su procesamiento hasta tanto se
enve la muestra correcta.
Los siguientes son algunos ejemplos de ello:

Cualquier muestra recibida en formol


Frotis de secrecin cervical, vaginal o anal para
deteccin con tincin de Gram de Neisseria
gonorrhoeae
Un solo hisopo enviado para mltiples estudios
Remisin de un envase inapropiado, no estril u
obviamente contaminado
Placas para cultivo recibidas de fuentes externas
que tienen sobrecrecimiento
Muestras obviamente contaminadas con sustancias
extraas
Muestras inaceptables para cultivo de anaerobios:

1.
2.

3.
4.
5.
6.
7.

Lavado gstrico
orina de chorro medio
secrecin prosttica
Material fecal (excepto para Clostridium difficile)
Muestras de garganta
Piel superficia

Diagnostico de enfermedades infecciosas por medio


del examen de muestras
Muestra

Enfermedad
sospechada

Procedimiento de
laboratorio

Hallazgos positivos

De
garganta

Difteria

Tincin de Gram

Bacilos grampositivos
pleomorficos con
disposicin en letras
chinas
Bacilos teidos de color
azul claro con
prominentes grnulos
metacromticos
Cocos fluorescentes en
cadenas

Tincin con azul de


metileno
Faringitis
estreptoccica
aguda
lceras
orofaringeas

Enfermead de
Vincent

Tcnica con
anticuerpos
fluorescentes directa
Tincin de Gram

Presencia de bacilos
gramnegativos y
delgados bacilos en
forma de espiral

Diagnostico de enfermedades infecciosas por medio


del examen de muestras
Muestra

Enfermedad Procedimiento de
sospechada laboratorio

Esputo
Neumonia
bacteriana
Aspirado
transtraqueal
Lavados
Tuberculosis
bronquiales

Micosis
pulmonar

Tincin de Gram

Tincin
acidorresistente
Tincin de Gram
Tincin de Giemsa
o Gram-Weiger

Hallazgos positivos
Variedad de tipos
bacterianos el S,
pneumoniae con
cpsula es diagnstico
Bacilos
acidorresistentes
Levaduras con brotes
Seudohifas, hifas
verdaderas o cuerpos
con frutos

Diagnostico de enfermedades infecciosas por medio


del examen de muestras
Muestra

Enfermedad
sospechada

Procedimiento de
laboratorio

Hallazgos positivos

Heridas

Celulitis
bacteriana

Tincin de Gram

Variedad de tipos
bacterianos, sospechar de
especies anaerobias

Gangrena
gaseosa
(mionecrosis)

Tincin de Gram

Bacilos grampositivos
sospechosos de Clostridium
perfringens

subcutneas

o drenaje
purulento
de tractos
subcutneos

Montaje salino
Micetoma
Tincin de Gram o
actinomictico
para
acidorresistencia
Tincin de Gram o
Micetoma
montaje con azul
eumictico
de algodn
lactofenol

Grnulos de azufre
Filamentos grampositivos
ramificados, Nocardia es
acidorresistente
Granos negros, blancos o
grisseos

Diagnostico de enfermedades infecciosas por medio


del examen de muestras
Muestra

Enfermedad Procedimiento de
sospechada laboratorio

Liquido
Meningitis
cefalorra- bacteriana
qudeo

Tincin de Gram

Pequeos bacilos gramnegativos


pleomorficos (Haemophilus)
Diplococos gramnegativos
(Neisseria meningitidis)
Diplococos grampositivos (S.
pnumoniae)

Tincin con Azul de


metileno
Tincin con
naranja de acridina

Formas bacterianas que se


tien azul-negro
Formas Bacterianas que se
tien de color naranja brillante
con luz UV
Celulas de levaduras
capsuladas con brotes unidos
por tallos delgados
Delicados bacilos
grampositivos

Montaje con tinta


Meningitis
criptoccica china o nigrosina
Listeriosis

Hallazgos positivos

Tincin de gram

Diagnostico de enfermedades infecciosas por medio del


examen de muestras
Muestra

Enfermedad
sospechada

Procedimiento
de laboratorio

Hallazgos positivos

Orina

Infeccin
bacteriana
Infeccin por
levaduras
Leptospirosis

Tincin de Gram Variedad de tipos


bacterianos
Tincin de gram Seudohifas o levaduras
con brotes
Espiroquetas mviles
Examen con
campo oscuro

Secrecin
uretral

Gonorrea
Infeccin por
Clamidia

Tincin de Gram Diplococos gramnegativos


intracelulares
Cuerpos elementales
Tincin directa
con anticuerpos
fluorescentes

Diagnostico de enfermedades infecciosas por medio


del examen de muestras
Muestra

Enfermedad
sospechada

Procedimiento de
laboratorio

Hallazgos positivos

Ojos

Conjuntivitis
primaria

Tincin de gram

Variedad de especies
bacterianas

Tracoma
Heces

Enterocolitis
purulenta
Clera

Enfermedad
parasitaria

Tincin de Giemsa
de raspados de
cornea
Tincin de Gran
Montaje directo
con agua de
peptona alcalina
Montaje directo
salino o con Yodo

Inciciones intracelulares
perinucleares en racimo
Neutrfilos y agregados
de estafilococcos
Bacilos con rpida
movilidad, no hay
neutrofilos
Huevos, quistes, larvas
y trofozoitos de
parsitos

Diagnostico de enfermedades infecciosas por medio


del examen de muestras

Muestra

Enfermedad
sospechada

Raspado
Dermatofitsis
cutneo,
fragmentos
de uas o
Tinea versicolor
cabellos

Sangre

Procedimiento de
laboratorio

Hallazgos positivos

Montaje con KOH


al 10%

Fragmentos de hifas o
racimos de esporas

Montaje con KOH


al 10% o Azul
algodn-lactofenol
Tincin de Wright
Fiebre
o Giemsa
recurrente
Examen con
(Borrelia)
campo oscuro
Tincin de Wright
Parsitos
o Giemsa
sanguneos:
Eaxamen directo
paludismo,
tripanosomiasis de sangre
anticoagulada
filariasis

Hifas y esporas

Espiroquetas con
morfologa atpica

Parsitos intracelulares
(paludismo, babesiosis)
Formas extracelulares:
tripanosoma o
microfilarias

Tincin de Gram

Tincin de Gram

Tincin de Gram

Evaluacin con tincin de Gram de frotis de esputo

Tincin de Gram

Identificacin bacteriana basada en la morfologa celular microscpica

Tincin de Gram

Tincin de Ziehl Neelsen

Tcnicas de inoculacin

Alambres en asa y recto usados para La inoculacin y traspaso de cultivos

Tcnicas de inoculacin

Patrn en estras para inocular placas para


aislamiento de colonias bacterianas

Tcnicas de inoculacin

Patrn en estras para inocular medios para recuento


semicuantitativo de colonias

Tcnicas de inoculacin

Tcnica para inocular un tubo de caldo de cultivo

Tcnicas de inoculacin

Inoculacin de medios diferenciales en pico de flauta

SELECCIN DE MEDIOS DE
CULTIVO

PREPARACIN DE MEDIOS DE CULTIVO

PESAR (seguir las recomendaciones del fabricante)


HIDRATAR (agua destilada
CALENTAR

pH 7)

(disolver por completo)

AUTOCLAVAR (120 C x 15 min.)


PLAQUEAR ( <45 C)
ALMACENAR (4 - 8 C)

FLORA COMENSAL Y BACTERIAS PATGENAS DE LAS VAS


RESPIRATORIAS
Flora comensal

Patgenos potenciales

Medios de aislamiento
aconsejados

Streptococcus mutans
S. Salivarius
S. Pneumoniae
Estreptococos
betahemoltico no del
grupo A
Staphylococcus aureus
S. epidermidis
Especies de Haemophilus
Especies de Neisseria
Especies de Moraxella
Difteroides
Escherichia coli y otras
Enterobacterias
Anaerobios

Estreptococos beta-emoltico
del grupo A
Streptococcus pneumoniae
Klebsiella pneumoniae y
enterobacterias
Pseudomonas aeruginosa
Neisseria gonorrhoeae y N.
meningitidis
Staphylococcus aureus
Haemophilus influenzae tipo b
Corynebacterium diphteriae
Bordetella pertusis

Agar sangre (de carnero)

Micobacterium sp.
Legionella pneumophila

Agar sangre y agar


MacConkey
Agar Thayer-Martin
Agar sangre (de caballo)
Medio de Loeffler y agar
suero-telurito
Agar-papa de BordetGengou
Medio de LwensteinJensen
Agar carbn extracto de
levadura

FLORA COMENSAL Y BACTERIAS PATGENAS DE LAS VAS


URINARIAS
Flora comensal
(contaminantes)

Patgenos potenciales

Medios de aislamiento
aconsejados

Estafilococos
coagulasa negativos
Bacilos difteroides
Escherichia coli y otros
coliformes
Especies de
Lactobacillus
Estreptococos alfahemolticos
Especies de Bacillus

Escherichia coli
Especies de Klebsiella
Enterobacter Serratia
Proteus mirabilis y otras
especies de Proteus
Enterococos del grupo D
S. Aureus y
S.saprophyticus
Especies de Acinetobacter
Pseudomonas aeruginosa
y otros no fermentadores

Agar MacConkey o
EMB

Agar con 5% de
sangre de carnero
Agar MacConkey o
EMB

FLORA COMENSAL Y BACTERIAS PATGENAS DEL APARATO


GENITAL
Flora comensal
(contaminantes)

Patgenos potenciales

Medios de aislamiento
aconsejados

Escherichia coli y otros


coliformes
Enterococos del grupo D
Especies de
Lactobacillus
Estafilococos coagulasa
negativos
Bacilos difteroides
Muchas especies de
anaerobios

Neisseria gonorrhoeae

Medio de ThayerMartin
Agar 5% de sangre
de carnero
Agar sangre para
anaerobios

Estreptococos Betahemoltico del grupo B


Ciertos anaerobios
Virtualmante cualquier
microorganismo con alta
concentracin y en
cultivo puro

Agar sangre, agar


MacConkey u otro
medio especial

FLORA COMENSAL Y BACTERIAS PATGENAS DEL TUBO


DIGESTIVO
Flora comensal

Patgenos potenciales

Medios de aislamiento
aconsejados

Escherichia coli y
otros entricos no
patgenos
Especies de
Pseudomonas y
otros No
fermentadores
Estafilococos
coagulasa negativo
Enterococos del
grupo D

Especies de Salmonella
Especies de Shigella
EPEC, ETEC,
EHEC, EIEC
Especies de Campylobacter

Agar MacConkey o EMB


Agar Hektoen o XLD
Agar SS
Caldo GN o selenito
Agar-sangre CNA o PEA
Agar-sangre Campy
Agar TCBS

Muchos anaerobios

Vibrio cholerae y otras


especies de Vibrio
Especies de Aeromonas
Plesiomona shigeloides
Yersinia enterocoltica
Clostridium difficile

Agar CIN
Agar cicloserinacefoxitina- yema de
huevo

Flora comensal y bacterias patgenas en LCR


Flora comensal
(contaminantes)

Patgenos potenciales

Medios de aislamiento
aconsejados

Estafilococcos
coagulasa negativos
Muchos estreptococos
Difteroides
Lactobacillus
Especies de
Propionibacterium
Escherichia coli y
otras enterobacterias

Neisseria meningitidis
Haemophilus influenzae
grupo b
Streptococcus
pneumoniae
Listeria monocytogenes
Escherichia coli
Flavobacterium
meningocepticum
Mycobacterium
tuberculosis

Agar chocolate
Agar chocolate con
estra estafiloccica
Agar 5% de sangre de
carnero
Agar MacConkey
Agar 5% de sangre de
carnero
Medio LwensteinJensen

FLORA COMENSAL Y BACTERIAS PATGENAS DE MUESTRAS DE


HERIDAS
Flora comensal
(contaminantes)

Patgenos potenciales

Medios de aislamiento
aconsejados

Especies de
Corynebaterium
Estreptococos alfa
hemolticos
Estafilococos
coagulasa-negativos
Especies de
Propionibacterium
Especies de Bacillus

Staphylococcus aureus
Estreptococos Betahemoliticos
Enterococos
Escherichia coli
Especies de Proteus
Pseudomonas aeruginosa y
otros no fermentadores
Anaerobios:
Peptoestreptococcus
Especies de Bacteroides
Clostridium perfringens
Actinomyces israelii
Mycobacterium marinum

Agar 5% de sangre de
carnero

Agar MacConkey

Placas de agar sangre


para anaerobios

Lwenstein-Jensen

INCUBACIN DE LOS CULTIVOS

INCUBACIN DE LOS CULTIVOS ANAEROBIOS

INTERPRETACIN DE LOS
CULTIVOS
A partir de las observaciones iniciales se debe
evaluar el crecimiento de las colonias y decidir
si son necesarias pruebas adicionales
Observar las caractersticas y nmero relativo de
cada tipo de colonia recuperadas en los medios
de agar
Determinar la pureza, coloracin de Gram y
morfologa de las bacterias en cada tipo de
colonia
Observar cambios en el medio que rodea las
colonias, que reflejan actividades metablicas
especficas de las bacterias recuperadas

Caractersticas de colonias usadas para


identificar bacterias
-

Tamao: dimetro en mm
Forma: puntiforme, circular, filamentosa
Elevacin: plana, convexa, umbilicada
Margen: entero, ondulante, filamentoso
Color: blanco, amarillo, negro, etc.
Superficie: brillante, opaca
Consistencia: cremosa, viscosa,
membranosa, quebradiza
Hemlisis en agar sangre : Alfa, Beta,
gamma
Produccin de pigmento

Morfologa de colonias

UROCULTIVO

UROCULTIVO

MUESTRA DE ORINA

SIEMBRA CON ASA CALIBRADA POR


DISPERSIN AGOTAMIENTO
INCUBACIN 37 X 18-24 Hras.

CONTAMINADO
- Flora polimicrobiana
- Sedimento normal
- Sedimento con clulas
epiteliales
-Paciente asintomtico
sin enfermedad de
base

SE SOLICITA NUEVA
MUESTRA

POSITIVO
- Flora monomicrobiana
- Sedimento patolgico
- Ausencia de clulas
epiteliales
- Recuento elevado
- Paciente sintomtico

Paciente con
enfermedad de base

NEGATIVO
- Recuentos bajos o
negativos
- Sedimento normal
- Paciente asintomtico
sin enfermedad de
base

CULTIVO NEGATIVO
TIPIFICACIN
YANTIBIOGRAMA

UROCULTIVO
Puntos de corte para la interpretacin del recuento microbiano en el
diagnostico de la infeccin urinaria en diferentes poblaciones

UFC/ ml

Tipo de paciente

102

Mujeres

103

Pacientes

104

Nios

105

Mujeres

sintomticas
Bacteriuria asociada con catteres
del sexo masculino
Pacientes bacteriemicos

asintomticas
Mujeres con pielonefritis aguda

HEMOCULTIVO

La proporcin entre el volumen de sangre


obtenida y el volumen del caldo de cultivo debe
estar en una relacin de 1:5 - 1:10

El volumen de sangre depender de la edad del


paciente, por cada venopuncin se recomienda:
Adultos:
10 - 30 ml
nios:
1 - 5 ml
Lactantes 1 - 2 ml
neonatos
0.5 - 1 ml