INMUNOGENETICA

DOGMA
DOGMACENTRAL
CENTRALDE
DELA
LABIOLOGA
BIOLOGAMOLECULAR
MOLECULAR

Hebra
Hebramolde
molde
Transcripcin
Transcripcin

Traduccin
Traduccin

Splicing alternativo

 Receptores de Linfocitos T
principales protenas de membrana

se muestran las

BASE GENTICA DE LA FORMACIN DE

ANTICUERPOS:
- Hay tres loci o familias de genes distintos: para la cadena H,
para la cadena y para la cadena .
- Cada locus contiene los genes para las regiones Variable y
Constante de cada cadena.
- La regin variable se forma por la combinacin de dos o tres
tipos de genes (V, (D), J), y la constante por uno solo (C).

Organizacin de los locus de Ig. Humanas en

la lnea germinal:

Dominios de las protenas de las Ig y de los RLT

Organizacin de los locus de los RLT en la lnea germinal

 Diversidad de los genes de los receptores de Ag: a partir del mismo ADN
en la lnea germinal es posible generar secuencias de ADN recombinado y ARNm que
difieren de sius uniones V-D-J. En el ejemplo que se muestra se producen tres RNAm del

Recombinaci
n V(D)J

Fenmenos secuenciales durante la recombinacin V(D)J: La sinapsis y

la escisin del ADN en el lmite entre el heptmero y el segmento codificante est
mediada por Rag1 y Rag2. La horquilla final codificante es abierta por la endonucleasa
Artemisa y los extremos rotos son separados por la maquinaria de NHEJ.

Contribuciones de diferentes mecanismos a la

generacin de diversidad en los genes de las Igs
y de los RLT

TEORIA DE LA DIVERSIDAD DE LA
SINTESIS DE INMUNOGLOBULINAS
DESARROLLO DE LA DIVERSIDAD DE
ANTICUERPOS
El repertorio de anticuerpos (posibles
especificidades), basado en la variabilidad de la regin
hipervariable (CDR) surge mediante varios
mecanismos, siendo los tres primeros los bsicos:
1.- Multiplicidad de genes de la regin V en las
clulas germinales
2.- Recombinacin somtica o intracromosmica
o reordenamiento gnico al azar entre los
elementos que componen un gen de la regin V.
3.- Hipermutacin somtica.
4.- Conversin gnica: insercin de pseudogenes
para incrementar diversidad

La recombinacin somtica
Clula
embrionaria

RN
A
DNA
Vembrionario
C
Digestin
V

DNA de
mieloma
V
C
Digestin

1976 Tonegawa et al.: Usando RNAm purificado de un mieloma

como sonda, demostraron que la organizacin de los genes de
Ig era diferente para las cluas que producin anticuerpos
respecto a la linea germinal.

Tejido linfoide perifrico

Medula sea

La diversidad de las inmunoglobulinas se genera

durante el desarrollo y diferenciacin de los linfocitos
B
Pro-linfocito

Durante la maduracin de los linfocitos B,

B
los genes V se encuentran prximos, y se
renen por recombinacin del ADN
genmico al azar (reorganizacin de
genes). De este modo, el nmero de
combinaciones posibles es
Pre-linfocito
extremadamente alto.
B
- El proceso de recombinacin est
controlado, al menos en parte, por dos
genes activadores de la recombinacin
(RAG) (recombination activating
genes). Una vez que se produce la
reorganizacin somtica, un linfocito
y su progenie van a producir Ac de
Linfocito B
especificidad nica.
maduro
- La diversidad aumenta mediante
Estmulo por procesos de hipermutacin somtica:
el antgeno Las secuencias de aminocidos de la
regin variable de las Ig cambian
progresivamente conforme avanza la
respuesta inmunitaria. Estos cambios
Linfocito B
son el resultado de alteraciones en
activado
las bases dentro del segmento V y su
consecuencia es el incremento de
afinidad.
- Adems, un mismo linfocito puede
producir distintos isotipos de Ig
especficas para un Ag (diversidad de
anticuerpos en la zona efectora). El
cambio de isotipo est dirigido por
citoquinas
producidas por los
Plasmocito
Linfocito
B de memoria
linfocitos TH y ocurre tras el

El dominio variable
de la cadenas
pesadas y livianas de
los anticuerpos es
generado por la
recombinacin de
segmentos gnicos
V, D y J en el caso de
las pesadas y V y J en
el caso de las livianas

La recombinacin somtica depende de:

a) La existencia de regiones conservadas en los intrones que

separan los segmentos V, D, J y que guan el proceso de
recombinacin
b) La existencia de recombinasas especficas (RAG1, RAG2) que
solo se expresan en los linfocitos B y T.

DIVERSIDAD COMBINATORIA : Gran parte de la diversidad

de las Igs proviene de la recombinacin de distintas
copias de los segmentos gnicos V, D, y J
J

V3
: 29V x 4J = 126
: 40V x 5J = 200
H : 51V x 27D x 6 J= 8262

D9 J4
Combinacin o con H:
(126 + 200) x 8262 3 x 106
162 segm. 3 x 106 paratopes

DIVERSIDAD DE LIGACIN

Durante la unin de
segmentos V, D, J, se
producen variaciones o
introduccin de codones
debido a:
a) La flexibilidad en el corte
del bucle terminal que
introduce nucletidos
denominados P.
b) La accin de la enzima
TdT (deoxinucleotidil
transferasa terminal) que
incorpora nucleotidos (N) en
el extremo 3.
Diversidad de ligacin = 103:
cadena livianas (x10)
cadenas pesadas (x 100)

La diversidad combinatoria y de ligacin

concentran la diversificacin en el CDR3
N

CDR1

Dominio
CDR1
CDR2
variable

CDR3

CDR2

CDR3

Dominio
constante

Ig, cadena pesada

(protena)

Dj

mRNA
(gen)

Exclusin allica: solo uno de los alelos de la

cadena pesada y de la liviana se expresa

Tejido linfoide perifrico

Medula sea

Desarrollo de linfocitos B
Pro-linfocito
B

No hay expresin de
Ig

Pre-linfocito
B

Expresin de
cadena +
sustituto de
cadena liviana

Rearreglo del gen de

la cadena pesada

Rearreglo del gen de

la cadena liviana

Linfocito B
maduro

Co-expresin de IgM e
IgD
Estmulo por
el antgeno

Linfocito B
activado

Plasmocito

Linfocito B de memoria

El proceso de recombinacin somtica es central

al funcionamiento del sistema inmune adaptativo

Por la generacin de diversidad que da produce el repertorio

bsico de inmunoglobulinas
Por que el fenmeno de exclusin allica, genera linfocitos
monespecficos, lo cual es necesario para que ocurra el
proceso de seleccin clonal.

La hipermutacin somtica es un elemento

adicional de generacin diversidad
Recombinacin
somtica (mdula
sea)

Hipermutacin somtica
(organos linfoides
secundarios)

Hipermutacin somtica : proceso de introduccin de mutaciones

puntuales en la regin variable de los genes de las cadenas livianas y
pesadas que expresa el linfocito B.
La tasa de mutacin es 109 superior a la que ocurre en otras clulas, y
no afecta la regin constante de las Igs.

 Como producen los linfocitos B distintas

clases de inmunoglobulinas ?
VDJ

C C1 C

C2 C4 C

C2

El switch de
clases
permite la
secrecin
de distintos
isotipos de
Ig a medida
que
transcurre
la respuesta
inmune.

Desarrollo de linfocitos B
No hay expresin de
Ig

Tejido linfoide perifrico

Medula sea

Pro-linfocito
B

Mayormente Ig de
secretadas de varios
isotipos (clases)

Rearreglo del gen de

la cadena pesada

Pre-linfocito
B

Rearreglo del gen de

la cadena liviana

Expresin de cadena +
sustituto de cadena
liviana

Cambios en el
procesamiento del RNA

Linfocito B
maduro

Co-expresin de IgM e
IgD
Estmulo por
el antgeno

Linfocito B
activado
Cambio de
clase y
diferenciacin

Plasmocito

Mayormente Ig de
membrana de varios
isotipos (clases)

Ig de membrana de
varios isotipos
Linfocito B de memoria (clases)

La forma de generacin de
diversidad del receptor T.

tim
o

Linfocitos T vs
proceden de un
precursor comn, y no
se conocen las seales
que determinan cual se
expresar.

RESUMEN: Formas en que se genera la diversidad

en el dominio variable de las Inmunoglobulinas.
-Diversidad de la lnea germinal
-Recombinacin somtica
Diversidad combinatoria (rearreglo V,D,J)
Diversidad de ligacin
Combinacin de cadenas livianas y pesadas
Diversidad potencial = 109-1011

-Hipermutacin somtica

Receptor T:

Mecanismos similares operan en el caso del TCR, con

excepcin de la hipermutacin somtica que no existe.

Durante su desarrollo los linfocitos expresan diferentes

receptores necesarios para su proliferacin y maduracin
continua.

Deteccin de MAMP por TLR y NLR : MAMP detectados por TLR y NLR y su relacin con la respuesta inmune
adaptativa. Los MAMP son detectados extracelular e intracelularmente por los TLR y en el citosol por los NLR.
Dominios de TLR y NLR: LRR, TIR; NLR, BIR. Los MAMP incluyen RNAds, Poly I:C, LPS, RNAss, resiquimod (R848),
deoxinucletidos con motivos CG (CPG), PGN, el sistema de secrecin tipo III (T3SS) y el sistema de secrecin tipo IV
(T4SS) bacteriano.9 Los TLR y NLR expresados en APC reconocen sus ligandos, activando e induciendo liberacin de
citocinas y expresin de epitopos sobre MHC, que sern reconocidos por clulas T, lo cual dirige a una respuesta Th1
o Th2.6,8

Va de activacin intracelular de los receptores NLR : Va de activacin de NLR que reconocen a sus ligandos especficos.
La oligomerizacin de Nod-1 y Nod-2 recluta la proteina cinasa RICK, que activa a NF-B, a travs de las MAPK. La activacin de
Ipaf y de la criopirina permite la formacin del inflamasoma, la oligomerizacin de NLR, el adaptador ASC y la proteasa caspasa-1.
El reclutamiento de estas protenas en el inflamasoma causa activacin proteoltica de la caspasa-1, rompiendo las pro-IL-1 y la
pro-IL-18, para madurarlas y secretarlas.

Teoras sobre el inicio de la respuesta inmune. A. 1959: Modelo de discriminacin propio vs no propio.
B. 1969: El LB requiere una seal de ayuda del LTh. C.1975: El LTh requiere una seal coestimuladora 2 de la APC.
D. 1989: Modelo de discriminacin propio vs no propio infeccioso; la APC requiere estimulacin va PRR. E. 1994:
Modelo del peligro; la APC requiere estimulacin por seales de peligro derivadas del tejido infectado o lesionado.