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Mecanismo de Transcripcin

y de Traduccin

Dra. Mara Mercedes Sobern L.

Enrique

Diagnstico de
Juanita:
TUBERCULOSIS

Juanita

Juanita est tosiendo por ms de 15 das y


ha perdido peso.

Medicamentos bsicos en todo tratamiento


contra la tuberculosis:
isoniazida (INH)
rifampicina (RIF)
etambutol (EMB)
pirazinamida (PZA)

Cul es la accin BIOQUMICA de la


Rifampicina?
Inhibe a laRNA
polimerasabacteriana

Qu es la RNA
polimerasa?
Dnde y cmo
funciona en un
organismo vivo?

RNA polimerasa interviene en el proceso de


Transcripcin
Transcripcin: Proceso de sntesis de RNA

Caracterstica de la Transcripcin
Lugar: Ncleo, matriz
mitocondrial

No requiere de un
cebador
Necesita de una hebra
de DNA como molde

RNA polimerasa

Direccin de
sntesis: 5 3
Requiere 4
ribonuclesidos
trifosfatos (ATP, CTP,
GTP, UTP); incorporacin
de los nucletidos con
el fosfato en alfa y se
libera pirofosfato.

Tipo RNAs
mRNA
(2 % RNA total)
rRNA
(80 % RNA total)
tRNA
(15 % RNA total)

Funcin
Cadena simple
Informativo: codificacin de
protenas
(madurado a partir de hnRNA)
Cadena simple
Estructural (ribosoma)
Cataltico
Cadena simple
(hlice en bucles intracatenarios)
Abundancia de bases modificadas
Adaptador del cdigo gentico

Tipo RNAs
RNA
pequeos
(3 % ? RNA
total)

Funcin
Cadena simple
Ricos en U
Estructural (partculas snRNP)
Cataltico (eliminacin de intrones)

RNA de alto peso molecular, tambin


conocido como transcrito primario del
RNA, ya que es el RNA recin
sintetizado por la RNA polimerasa en el
RNA
proceso de transcripcin. En el ncleo de
heterogne
las clulas eucariotas acta como
o nuclear
precursor de los dems tipos de RNA que
(hnRNA)
se encuentran en el citoplasma. La
fragmentacin del hnRNA para formar

Diferencias en la transcripcin de organismos


procariotas y organismos eucariotas
Procariota

Eucariota

Una RNA polimerasa

3 RNA polimerasas

RNAm maduro desde su sntesis

RNAm se sintetiza en ncleo


como pre RNA, luego se procesa
para transformarse en RNAm
maduro

RNAm es accesible para los


ribosomas desde el momento
que comienza su sntesis.
Mayora de RNAm es
policistrnico (traduce varias
protenas).

RNA es monocistrnico (traduce


para una sola protena).

Transcripcin y traduccin son

Proceso de Transcripcin y

RNAm de clula procariota es policistrnica

RNA pol I transcribe los


genes de los RNAr (excepto
RNAr 5S)

Tipos de RNA
polimerasa en
Eucariotas

RNA pol II sintetiza RNAm y


encargada de transcribir
mayora de genes
codificadores para protenas.

RNA pol III transcribe los


genes de los RNAt, algunos
genes de RNA pequeo nuclear,
y el gen de RNAr 5S

Procesamiento
de RNAs en
eucariotas

Reacciones de corte
y empalme

RNA pol II
eucariota

Regulacin por
fosforilacin
mltiple

2 subunidades grandes
RPB1 (220 kD), RPB2 (150 kD)

P
RPB2: unin a DNA

RPB1: unin a NTPs


(cataltica)

1. Iniciacin

Etapas del
proceso de
transcripcin

2. Elongacin
3. Finalizacin
4. Liberacin de la
cadena

1. Iniciacin
Reconocimiento de la secuencia de un
PROMOTOR en el molde de DNA

PROMOTOR

En EUCARIOTAS, presencia de

Factores generales de transcripcin


(GTF),
intensificadores o potenciadores
(enhancers),
activadores (factores proteicos).
Estos a su vez reclutan a la RNA pol II
Funcin de los GTF:
Activar el proceso de transcripcin.

Un potenciador o intensificador es un
fragmento de ADN no codificante, que
puede encontrarse a cerca del gen o
alejado de ste -incluso a miles de
nucletidos de distancia- y que
presente unos lugares especficos de
unin para los factores de
transcripcin, que son un tipo
determinado de protenas. Cuando los
factores de transcripcin se unen al
potenciador , el gen se activa,
producindose la transcripcin.

El esquema representa la regin del inicio del gen (lnea negra).


Promotor (flecha negra) recluta factores generales de transcripcin
(GTFs, valos rosas). Complejo mediador (valos celestes, rojos y
amarillos) acta de puente entre los coactivadores que recluta a el
potenciador (enhancer, valos verdes) y los GTFs.
Esto permite a la RNA polimerasa II reconocer regin promotora del
gen e iniciar la transcripcin.

Porcin crtica del PROMOTOR se localiza 24 y 32


bases corriente arriba: CAJA TATA o caja Pribnow
(5-TATAAA-3).
Caja TATA de DNA, punto donde se ensambla complejo
de pre-inicio (GTFs + RNA pol II).

RNA Polimerasa de E. coli: subunidades

Ncleo central con dos cadenas tipo (PM = 40.000),


una (PM = 155.000) otra ' (PM = 165.000), se une
a DNA.
o factor (PM = 95.000) necesaria para
reconocimiento de promotor. Una vez iniciada la
transcripcin, se libera y el ncleo central prosigue
con elongacin del RNA.

Funcin de RNA polimerasa

Busca en el DNA los puntos


de iniciacin
(SITIO PROMOTOR).
Desenrolla y abre un
pedazo del DNA para
obtener una cadena
sencilla.
Selecciona el ribonucletido
trifosfatado y cataliza la
formacin del enlace
fosfodiester.

Proceso es
unidireccional.
Detecta las seales
de terminacin.
Interacciona con
activadores y
represores que
modulan la velocidad
del proceso.

Procesos iniciales de la transcripcin procariota

a) Reconocimiento: RNA
pol. con factor se fija
a regin promotora del
DNA

b) Iniciacin: Complejo
se abre y el primer
nuclesido se alinea con
el DNA

Procesos iniciales de la transcripcin procariota

c) Formacin del primer


enlace fosfodister y
liberacin de factor

d) Elongacin: La sntesis
del RNA naciente avanza
con el movimiento de la RNA
pol. a lo largo del DNA. Se
vuelve a formar la doble
hlice

Transcripcin en eucariotas
Iniciacin.Factores de transcripcin
generales (TFIIA, TFIIB, TFIID,
etc.) se unen al promotor del gen, que
posee una secuencia denominada caja
TATA que se encuentra en la posicin
-25 del promotor.

Los factores son necesarios para


que la RNA polimerasa se fije al
promotor y comience la
transcripcin del gen una vez
fosforilada.

Iniciacin. Los factores de transcripcin


generales (denominados TFIIA, TFIIB,
TFIID, etc.) se unen al promotor del gen,
que tambin posee una secuencia
consenso denominada caja TATA por la
secuencia rica en T y A que se encuentra
en la posicin -25 del promotor. Los
factores son necesarios para que la ARN
polimerasa se fije al promotor y comience
la transcripcin del gen. La unin del factor
TFIID junto con otros factores promueve la
unin de la ARN polimerasa II al promotor.
En particular es la subunidad TBP
(TATA binding protein) del factor TFIID la
que promueve la unin especficamente de
la ARN polimerasa II a la caja TATA. A
continuacin, otros factores formarn el
complejo de iniciacin de la transcripcin,
que ser caracterstico segn el tipo de
promotor que lleve el gen.

Transcripcin en
eucariotes

Liberacin y
defosforilacin
de RNA pol II

Desenrollamiento
DNA para producir
complejo abierto

Terminacin

Factores
elongacin
Fosforilacin
RNA pol II, inicio

Elongacin

Terminacin de la
transcripcin independiente
del factor rho

Se encuentra una secuencia


consenso: un palndromo rico en
G-C que precede a una secuencia
de 6-7 residuos de U en la
cadena de RNA.
Tallo rico en G + C

Secuencia de Us no apareada

Resultado: RNA transcrito forma


una horquilla que desestabiliza el
complejo RNA-DNA obligando la
separacin de la RNA pol.

Maduracin de una molcula de RNA

7-metil
guanos
ina

1. Casquete, caperuza
o cap del RNAm

ESTRUCTURA DEL CAP: 7 metil


guanosina se aade en la primera fase
de la transcripcin
Enlace 5
-5trifosfato

A veces
metilad
o

A veces
metilad
o

FUNCIN DEL CAP 5:


- Protege al mRNA de las nucleasas
- Facilita la unin del mRNA al ribosoma
para iniciar la traduccin

2. Adicin de
cola de
nucletidos de
Adenina
Aprox. 200
nucletidos de
Adenina en extremo
3 de RNAm

Funcin: proteccin
contra degradacin
enzimtica

Seales que pueden alterar la transcripcin


de un gen puede ser de varios tipos:
Seales hormonales:
La cascada de transduccin de
seal subsiguiente produce un
regulador de transcripcin
especfico.
Seales nutricionales

e inicas:

Contactos intercelulares:
Especialmente durante el
desarrollo embrionario. La sinapsis
tambin pertenece a este grupo.

Mecanismo de Traduccin

Caso clnico
Paciente varn de 21 aos de edad, mestizo, natural de Sullana.
Horas despus de su arribo a la ciudad de Casapalca (localidad
minera ubicada a 4200 msnm) presenta un cuadro agudo de dolor
abdominal tipo clico de progresiva intensidad, localizado en el
cuadrante superior izquierdo, asociado a vmitos de contenido bilioso
Se realiza una ecografa abdominal la cual informa Esplenomegalia.
La TAC abdominal mostr reas hipodensas, no captadoras de
contraste en el interior del Bazo. La prueba Eco Doppler confirman
4 reas con ausencia de flujo compatibles con zonas de Infarto
Esplnico.
Pruebas de laboratorio:
Electroforesis de Hemoglobina: Determinacin de Hb A1 : 59%
(VN: 94-99%) Hb A2: 2.3% (VN: 1,0-3,5%) Hb Fetal: 1.7%, Hb
S: 37.0% (VN:0%), conclusin: Heterocigoto de Hemoglobina S
DIAGNSTICO: sndrome doloroso abdominal por infarto
esplnico asociado a enfermedad heterocigota de clulas
falciformes, condicin que deber tenerse en cuenta en los
cuadros de dolor abdominal agudo asociado a la exposicin de
grandes alturas.

Qu son las clulas falciformes?


Enfermedad: Anemia falciformes

Cul es la accin BIOQUMICA del antibitico


Estreptomicina?

Inhibe la sntesis proteica


bacteriana a nivel de subunidad 30S
ribosomal.

Por eso se
necesita
aprender el
proceso de
traduccin

Estructura de los ribosomas

Conformacin de un ribosoma
Subunidad
pequea

Subunidad
grande

Sitio unin Sitio unin


del RNAm del RNAt

Transferasa
de peptidilo,
(ribozima)
componente
de subunidad
grande
ribosomal

Clulas que llevan a cabo


una sntesis proteica
muy activa, ribosomas en
cadena: POLISOMAS

1. Iniciacin

Etapas de la
biosntesis de
protena en eucariotas

2. Elongacin

3. Terminacin

Etapa: Iniciacin
Paso 1.
Factores de iniciacin:
IF1, IF3 se unen a subunidad 30S.
IF-2 se une a GTP.
IF-1 bloquea sitio A para asegurar que Met-RNAt
slo se pueda acoplar al sitio P y que ningn otro
aminoacil-RNAt pueda acoplarse al sitio A durante la
iniciacin.
IF-3 Se une a subunidad 40S Estimula la unin del
RNAm a subunidad pequea, bloquea sitio E y evita
que las dos subunidades se asocien.

Iniciacin de la
biosntesis de
protena eucariota

Elongacin de la biosntesis
de protena eucariota

Elongacin de la biosntesis de
protena eucariota

Terminacin de la biosntesis
de protena eucariota

Secuencia Shine-Dalgarno

Met --- Arg --- Ala --- Phe --- Ser

Unin de subunidad ribosomal pequea a RNAm en


codn AUG (codn de inicio).
Secuencia del extremo final 3' del RNAr 16S,
complementaria de la secuencia Shine-Dalgarno
situada antes del codn AUG.

El elemento Shine-Delgarno se encuentra en el lado 5'


de cada codon iniciador AUG en los mRNAs
procariticos policistrnicos.
Este elemento es complementario a las secuencias
presentes cercanas al extremo 3' de los 16S rRNA del
ribosoma procaritico.

Inhibicin de la Sntesis de Protenas


COMPUESTO

ACCIN

Estreptomicina

Impide la iniciacin de la sntesis.

Tetraciclina

Bloquea el lugar A del ribosoma e impide


la unin del aminoacil-RNAt

Cloranfenicol,
cicloheximida
Puromicina

Bloquean la accin de la peptidil transferasa


Anlogo estructural del aminoacil-RNAt.
Peptidil transferasa forma enlace covalente
entre la puromicina y la cadena polipeptdica
naciente.
Como puromicina no interacciona
con el RNAm, no hay nada que le impida
abandonar el lugar A del ribosoma con la cadena
polipeptdica incompleta unida a ella. De esta

Fin de la
clase!