UNIVERSIDAD DE LAS FUERZAS ARMADAS ESPE

DEPARTAMENTO DE CIENCIAS DE LA VIDA Y LA

AGRICULTURA
INGENIERA EN BIOTECNOLOGA
ENZIMOLOGA

Inhibicin enzimtica
Denyss Guilcazo
Octubre 2016 febrero 2017

Inhibidores Reversibles

Tres clases
fundamentales.
Clasificacin:
Inhibir es disminuir
PARCIAL o TOTALMENTE
la actividad enzimtica.

Inhibicin enzimtica

Importancia fisiolgica
Farmacologa

Qu es un inhibidor
enzimtico?
Son molculas que se
unen a las enzimas y
disminuyen su
actividad.
Mecanismos de accin
frmacos accin
inhibidora enzimas
especificas.

Inhibidores Irreversibles

Inhibidores Suicidas

Inhibidores Reversibles
se unen a las
enzimas mediante
interacciones
nocovalentes

Puentes de
hidrogeno
Interacciones
hidrofbicas
Enlaces inicos

no experimentan
reacciones
qumicas cuando
se unen a la
enzima

pueden ser
eliminados
fcilmente
pordilucino
pordilisis.

Inhibidores reversibles la unin E-I es dbil.

Inhibidores irreversibles la unin E-I es
fuerte
Inhibidores suicidas la unin E-I es
irreversible, generalmente covalente.

Tomando en cuenta el LUGAR y el MODO

DE UNIN de la Enzima - Inhibidor
Puedes distinguirse 3 clases de I

) Inhibicin Competitiva

Inhibicin especfica

El inhibidor compite con

el sustrato por el sitio
activo de la enzima

Inhibidor es en parte o
todo, un isstero

Isstero: son aquellas

molculas que tiene
forma y tamao
similares.

Km

k cat

E+S

ES

P
I

Kic

EI --------> E+P

Vic = kcat [ES]

Velocidad inicial en presencia
de inhibidor competitivo

Vmx= kcat [Eo]

Balance de masas
[E] [S]
[ES] =
----------Km
[E] [I]
[EI] =
-----------Kic

[E] [S]
Km =
-----------[ES]
[E] [I]
Kic =
-----------[EI]

vic V max

S
I

Km 1 S
Ki

Ecuacin representa el comportamiento cintico de un inhibidor competitivo puro

los valores de las cte de inhibicin, Ki, suelen ser

del mismo orden que las Km.
Oscilando entre 10-3 y 10-6 M.

Grado de Inhibicin:
Grado de inhibicin es un valor entre 0-1
()
(a) Razn entre la velocidad en presencia de I y en
ausencia I.

I
S

I Kic 1

Km

Vic
a
V
ic 1 a

Representacin de LinenweaverBurk

[I] >> 0

1/v

[I] > 0
[I] = 0

1/vic vs 1/[S]
La ecuacin de inversos es:

1
km AP 1
1

vic
Vmax S Vmax
- 1/Km
1/Vmax

-1/Kmap

1/[S]

) Inhibicin No Competitiva
El inhibidor se une a la
enzima en un lugar
diferente al centro
activo.
Km

El I se puede unir a [ES]

El S se puede unir a [EI]

kcat

E+S
P
I

Ki

ES ----------> E +
I

Ki

[ES] puede dar productos

EI

ESI ----------> P

Cuando
Ki=Ki

Balance de masas

* La deduccin de la velocidad de reaccin, en este caso, es

anloga a la realizada en el caso de la inhibicin competitiva:

vinc = kcat (ES)

V max ap

- En una inhibicin nocompetitiva, la Km de la

enzima por el sustrato no se
modifica, sin embargo, la
Vmax
s
se
modifica,
transformndose
en
una
Vmaxap.

V max
I
1
Ki

Ecuacin representa el comportamiento cintico de un inhibidor no competitivo

Representacin de LinenweaverBurk
1/vinc vs 1/[S]

(I) >> 0
1/vinc

La ecuacin de inversos es:

(I) > 0

Grado de Inhibicin:

1/Vmaxap

(I) = 0

1/Vmax
- (1/Km)

1/S

I
ki
V max
1
AP
V max

) Inhibicin A competitiva
El inhibidor se une
solamente al complejo
[ES].
Km

Se forma el complejo
[ESI]

Complejo ESI inactivo,

se distorsiona el sitio
activo; evita que ocurra
la reaccin

kcat

E+S

ES ----------> E +

P
I

Ki

ESI ----------> E +P

Balance de masas

Ecuacin representa el comportamiento cintico de un inhibidor acompetitivo

Representacin de LinenweaverBurk
1/vinc vs 1/[S]
1/vinc

(I) >> 0
(I) > 0

La ecuacin de inversos es:

(I) = 0
1/Vmaxap

1/Vmax

-1/Kmap

-1/Km

1/S

d) Inhibicin Mixta
El inhibidor se une
al mismo tiempo
tanto a la E como
al S.
Afecta la act.
Enzimtica pero no
la unin.
El grado de
inhibicin depende
de la [I]

Km

kcat

E+S
P
I

Ki

EI

ES ----------> E +
I

Ki

ESI

Representacin de LinenweaverBurk
1/vinc vs 1/[S]
Grado de
Inhibicin:

) Inhibicin por exceso de sustrato

Exceso de S - prdida de actividad enzimtica
Complejo [ES] puede unir a una nueva molcula de S
[ES2]
No da productos de rx.
Km

E+S

kcat

ES ----------> E +

P
S Ks

Suponemos que la constante de

disociacin del segundo complejo
[ES2] es diferente a la Km
Se denomina Ks

ES2 ----------> E + P

Eo = E + ES + ES2 Balance de Masas

v kcatEo

S
Km

S
S2
1

Km KmKs
1
S
v V max
S
S 2 Km
1

Km KmKs

La concentracin de sustrato
a la cual se obtiene el ptimo
de velocidad

Igualando a cero la
primera derivada
con respecto a la [S]

Vmax

S op KmKs
(S)op

(S)

Inhibidores Irreversibles

Km
No se ajusta al cintica
clsica de M M
[I] >> [E]

kcat

E+S
P
I

ES ----------> E +
I

Ki

Ki

Agentes teraputicos, herbicidas,etc

Se produce una modificacin

covalente denominada
COMPLEJO PUNTO MUERTO

ESI

EI
EI*

Inhibidores Suicidas
Altamente especficos.

Qumicamente inactivos en ausencia de la enzima.

Las molculas de estos inhibidores se activan especficamente por la enzima (inactivar)

Activa por la enzima- rx rpidamente con la protena - une covalentemente algn resto
AA e inactiva la Enzima
Se basan en la capacidad de alquilar un grupo nuclofilo de la protena enzimtica

Ornitina descarboxilasa
DFMO - sustrato
Sufre una
descarboxilacin
Se une
Covalentemente
a la prot enzimtica
en Cistena

Competitiva

No competitiva

Acompetitiva

Mixta

Km

cte

Vmax

cte

Reversible

Cuando [S]

No es posible

---------

No es posible

Balance masas

Eo=E+EI+ES

Eo=E+EI+ES+ESI

Eo=E+ESI+ES

Eo=E+ES+EI+ESI

Grado de inhibicin

Ecuacin

I
S

I Kic 1

Km

---------