MAOS-1

Unidad 3
Horas 9,10 y 11

Cadena Respiratoria
(Cadena de Transporte de Electrones)
y

Fosforilacin Oxidativa
 OBJETIVO
CONTENIDO
ESPECFICO 6

Explicarlas 1. Caractersticasgeneralesdelacadena
caractersticasdela respiratoria.
CADENA 2. Organizacinyfuncindeloscomponentesdela
RESPIRATORIAyde cadenarespiratoria.
laFOSFORILACIN 3. Acoplamientoentrelacadenarespiratoriayla
OXIDATIVA. fosforilacinoxidativa.
4. Energticadelafosforilacinoxidativa.Relacin
P/O.
5. Inhibicindelacadenarespiratoria,sitiosde
inhibicinyejemplosdeinhibidores.
6. Inhibicindelafosforilacinoxidativa,sitiosde
inhibicinyejemplosdeinhibidores.
7. Mecanismodeaccindelosdesacopladoresdela
3 horas cadenarespiratoriaconlafosforilacinoxidativa.
Ejemplos.
LA MITOCONDRIA

CARACTERSTICAS ESTRUCTURALES
 LA MITOCONDRIA
Partes que la constituyen
Membrana externa (MME):
LaMMEesmuypermeable,alamayorpartedelasmolculaspequeas
e iones, debido a que contiene muchas copias de una protena
transportadora llamada Porina, que forma poros que permiten la libre
difusin de molculas hasta de 10kDa . Estas molculas entran al EIM,
pero la mayora no atraviesa la impermeable MMI. Otras protenas
ubicadas en esta MME incluyen enzimas implicadas en el metabolismo
deloslpidos.
EIM: EselespacioentrelaMMEylaMMI.ElEIMesqumicamente
equivalentealdelcitosol.
Matriz: este gran espacio interno contiene una mezcla altamente
concentrada de cientos de enzimas, incluyendo aquellas requeridas
para la oxidacin del piruvato y los cidos grasos y las del ciclo del
acidoctrico.LamatriztambincontieneADNmitocondrial,ribosomas
mitocondrialesARNt,yvariosenzimasrequeridasparalaexpresinde
losgenesmitocondriales.
 Membrana Mitocondrial interna (MMI)

Estaplegadaformandoinvaginacionesllamadascrestas,loqueincrementa
grandemente su rea total. Es altamente especializada. Contiene una alta
proporcin de Cardiolipina un fosfolpido que ayuda a la MMI a ser
especialmente impermeable a iones y molculas polares. Es permeable
sloamolculaspequeasneutras,comoelO2,H2O,yCO2.

Contieneprotenascon3tiposdefunciones:

1) Las Enzimas que llevan a cabo la reacciones de oxidacin de la

cadena respiratoria, las cuales son esenciales para el proceso de
fosforilacin oxidativa, el cual genera la mayora del ATP de la clula
animal.

2)LaATP sintasa queproduceATPenlamatriz(fosforilacinoxidativa),y

3) Las Protenas de Transporte (Translocasas), que permiten el pasaje

demetabolitosatravsdelaMMI.
 Componentes y
Componentes y
funciones
funciones
mitocondriales
mitocondriales

Fuente: texto Lehninger

Principios de Bioqumica-4ta e
 laRespiracinCelular.
Sedivideen3etapasparasuestudio:
1

La 3 etapas de la
Respiracin celular
2

3
Descarboxilacin
Oxidativadel
Piruvato

Ciclo
del
Acido Ctrico
Entradadeelectronesdesdelaglicolisis,oxidacindel
piruvato,yCAC,alaCadenarespiratoria.
Cadena Respiratoria mitocondrial

Es la fuente principal de energa para

la sntesis de ATP en los animales y
otros organismos eucariontes.
 Membran mitocondrial
externa
Membrana mitocondrial interna ATP
sintasa

IV III I

CTE
fuera

entra

fuera
CAC

Acetil-CoA

Piruvat cidos grasos

o

Piruvat cidos grasos CITOSOL

o
Molculas alimenticias del citosol
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/
Texto: biology molecular the cell
 Combustin Oxidacin biolgica
H2 O2 H2 (*NADH o FADH2) O2

Se separan los e- de los H+

2H+ 2e-
La energa
es
almacenad
a
Explosin
en una
Libera energa calrica forma til
para la
clula, por
medio de
la cadena
el hidrgeno (H2) del respiratori
aire se mezcla con a
Oxgeno. el H2, se
oxida a una alta
H2O velocidad, la energa 2e- O2
se libera como calor. 2H+
lareaccindecombustines:
H2(g) + O2(g) H2O(l)+calor H2+ O2 H2O H2 O
1. Caractersticas generales de la Cadena respiratoria.

2. Organizacin y funcin de los componentes de la

Cadena respiratoria.

3. Acoplamiento entre la Cadena respiratoria y la

fosforilacin oxidativa
 Caractersticas de la
Cadena Respiratoria (CR)
Esunconjuntodecuatro (4) complejos enzimticos firmemente
unidosdentrodelaMMI,ademsdeUbiquinona y Citocromo c,
actuando todos en estrecha asociacin, como transportadores
electrnicos.

ElnombredeCadena Transportadora de Electrones(CTE)hace

nfasis en el hecho de que el sistema es una cadena de
reacciones redox en la que hay interaccin sucesiva de
transportadoresquetransfieren electrones.

La denominacin de CADENA RESPIRATORIA (CR) hace

referencia a que el transportador final de la cadena transfiere los
electronesaloxgeno, es decir el sistema consume oxgeno.
 Caractersticas de la
Cadena Respiratoria (CR)
LaCRREOXIDAlascoenzimasreducidasNADH y FADH2,y
los electrones que estas transportan , son conducidos al
Oxgeno (O2), elultimoaceptordeelectrones.

Este proceso es esencial para el metabolismo ya que

proporciona NAD+ y FAD que se puede dirigir a las vas
metablicas que los requieren para seguir funcionando,
comoporelejemplo,elCiclo del cido Ctrico.

LasReacciones de Oxidorreduccin quesedanenla

CR, liberan energa la cual se utiliza para producir
ATP.

 Caractersticas de la Cadena Respiratoria

Existen2puntosdeentradaalaCTE:
UnPuntodeentradaparalacoenzimaNADH(elcomplejoI)y
UnPuntodeentradaparalacoenzimaFADH2 (laCoQ)

Las reacciones de la CTE se ordenan segn el valor de sus

potenciales de reduccin , encontrndose el menos positivo en el
extremoizquierdo(-0,32V),yelmaspositivoaladerecha(+0,82V)
, por tanto los electrones fluyen sucesivamente a lo largo de la
cadenahastaquefinalmentesontransferidosaloxigeno(O2).

Por tanto los electrones pasan a travs de los 4 complejos desde los
potenciales de reduccin estndar mas bajos hacia los mas altos.

Contienenunasclasesespecialesdeprotenas:
1. FLAVOPROTENAS
2. PROTENASFE-S
2.CITOCROMOS.
 Componentes

de la

Cadena Respiratoria
 MME

Espacio
intermembrana Citc
e
e
e I III IV
MMI Q
e II
NADH NAD+
FADH2 FAD
H2O
O2 + 2H+
Matriz
mitocondrial
MAOS
 (I) Flavoprotenas (fp)
EnlaCRhay 2 flavoprotenas,estascontienen FMN o
FADfuertementeunidos,lascualesnosedisociandela
enzima durante su oxidacin y reduccin, por lo que se
comportancomogrupos prostticos.Estasson:

1. La enzima: NADH deshidrogenasa (tambin

llamada NADH-Q oxidorreductasa o Complejo I) ,
contieneFMNquerecibeloshidrgenosdelNADH.

2. La enzima: Succinato deshidrogenasa(tambin

llamada Complejo II), contiene FAD que recibe los
hidrgenosdelSuccinato.

Las dos enzimas estn fijadas a la MMI.

 (II) Protenas ferrosulfuradas
Proteinas con Centros hierro-azufre (Fe-S)

Protena

Protena

Fe2S2 Fe4S4
Los Centros hierro-azufre, son grupos prostticos no
hemo, consistiendodetomosdeFeunidosaSinorgnicoy
a4tomosdeS delosresiduoscistenadelaprotena.
stos centros Fe-S aceptan y liberan electrones, uno a la
vez.
 (III) Coenzima Q
tambin nombrada como, Ubiquinona, y abreviada: Q , CoQ10

La estructura de la Ubiquinona consiste en una 1,4

benzoquinonaquecontieneenlosmamferosunacadena
lateralhidrfobade10 unidades de isopreno (Q10) , que
lahaceSolubleen los fosfolpidos enlaMMIy,escapaz
dedifundirymoverselibrementeatravsdesta.
Se le llama Ubiquinona ( por su ubicuidad , es una quinona que se
encuentraentodaspartes)
Losanimalespuedensintetizarla
Es el nico transportador de electrones de la CR que no es una
protena.
Esuntransportadordetomosdehidrgeno(protones + electrones),
desdelasflavoprotenasComplejoIyII,hacialoscitocromos.
 Coenzima Q 1
(Ubiquinona) Ubiquinona (CoQ)
4
(forma oxidada)

(Unidad de Isopreno
de 5 Carbonos)
e (1)

Semiquinona (CoQ-)
(radical libre
O.

CH3

-CH2-CH=C-CH2 -
2H+ + e (2)

Unidad de Isopreno)
OH
1
Dihidroquinona (CoQH2) 4
(forma totalmente reducida)
OH
 (IV) Los Citocromos
Un citocromo es una protena transportadora de
electrones que contienen un grupo prosttico hemo,
conuntomo de hierro.
El tomo de hierro del hemo sufre una oxidorreduccin
reversible:
Reduccin
+ 1e
Fe +3 Fe+2
Hierro oxidado - 1e Hierro reducido
(frrico) Oxidacin (ferroso)

Hay5tiposdecitocromosenlaCR.
Loselectronessemuevenatravsdelos5 tipos de citocromos de
laCRenelsiguienteorden:
b c1 c a a3
La unidireccionalidad del flujo de electrones en la CR esta dictada
porlapropiedaddeloscitocromosatenerdiferentesEo
 Hemo tipo b Seencuentraencitocromos bdel
complejoUbiquinona-citocromoc
oxidorreductasa

Fe

Hierro (Fe)

Hemo tipo a
Fe
Seencuentraencitocromos
a y a3 dela
Citocromo c oxidasa

Fe

Hemo tipo c
Seencuentraencitocromoscyc1
La Fijacin de un grupo hemo al citocromo (protena)
es covalente
A excepcin de la CoQ y el Citocromo c
el resto de los
transportadores electrnicos
se asocian en forma de grandes
Complejos enzimticos
 Complejos enzimticos de la CR
No total
Complejo Enzimtico Grupos prostticos de
Subunidades

( Complejo I) 1. FMN
NADH deshidrogenasa 2. Centros Fe-S 43
o NADH-CoQ oxidorreductasa
( Complejo II ) 1. FAD 4
Succinato deshidrogenasa 2. Centros Fe-S
( Complejo III) 1. Hemo b
Ubiquinona- Citocromo c 3. Hemo 11
oxidorreductasa. c1 Fe-S
4. Centros

( Complejo IV) 1. Hemo a

Citocromo oxidasa 2. Hemo a
3
8
3. CuA , CuB
Loscomplejosdeprotenasguanalos e-alolargode
la Cadena respiratoria , de manera que estos se
mueven secuencialmente desde uno a otro complejo
enzimtico.
 Ordenamiento
de la
Cadena Respiratoria
En las mitocondrias que respiran, cada molcula de
NADHlibera2electronesalaCadenaRespiratoria
; estos electrones en ltima instancia, reducen a 1
tomo de oxgeno (media molcula de O2), formando
unamolculadeagua(H2O).
 NADH Organizacinbsicadela
Cadenarespiratoria

NADH
DESHIDROGENASA
I
SUCCINATO
II
Q DESHIDROGENASA

CITOCROMO C
OXIDORREDUCTASA
III LaCTEestaformadapor4complejos
enzimticos(loscualesfuncionan
comotransportadoresdeelectronesy,
Cit c 3deellosfuncionancomo
bombasdeprotones.
Estoscomplejosestnconectados
CITOCROMO
OXIDASA IV mediantedostransportadoresmviles
deelectrones,estossonlaQyel
Citocromo c.

O2
 Organizacinbsicaysecuenciaquesiguenlos
electronesenlaCadenaRespiratoria

FADH2 (fp)

e-

e- e- e- e- e- e-
FMN (fp) Q cit b cit c1 cit c cit aa3 O2
CI CIV
CIII
e-

e- significa
NADH electrones
fp=flavoprotena

LoscomponentesdelaCRse ordenan segn el valor de sus potenciales de

reduccin,encontrndoseelmenospositivoenelextremoizquierdo(-0,32
V), y el mas positivo a la derecha (+0,82 V) , por tanto los electrones fluyen
sucesivamentealolargodelacadenahastaquefinalmentesontransferidosal
oxigeno(O2).
Reacciones de oxidorreduccin
de los complejos enzimticos
de la Cadena Respiratoria
 Reaccin catalizada por el
Complejo I, NADH deshidrogenasa:
Catalizasimultneamentedosprocesosacoplados:
1. La transferencia exergnica de 2e- y 1H+ (un ion
hidruro) del NADH y 1 H+ (un protn) de la matriz,
hastalaUbiquinona(Q).
los 2 electrones fluyen desde el NADH al FMN y luego a
FeSquepuedeaceptarloselectrones,perounocadavez,
ydeaquhastalaQ(Ubiquinona).

2.Ocurrelatransferenciaendergnicade4protonesdela
matrizhaciaelEIM.Portanto,el complejo I es una bomba
de protones impulsadaporlaenergadelatransferenciade
los2electrones.
 MME
Espacio intermembrana + 4H+

MMI FeS II QH2 MMI

FMN 2e
Q
2e

2H+ Matriz
NADH

H+ + NAD+ Reaccin redox neta catalizada por el

Complejo I (NADH deshidrogenasa):

NADH + 5H+ + Q NAD+ + QH2 + 4H+

(reducido) matriz (oxidado) (oxidado) (reducido) EIM
 Reaccin catalizada por
el Complejo II, o Succinato deshidrogenasa:

1.LaSuccinato deshidrogenasa,quecomprendeel Complejo IIdela

CR,eslaenzimaqueoxidaunamolculadeSuccinatoaFumaratoenel
Ciclo del cido Ctrico, y se encuentra unida a la membrana interna
mitocondrial.

2.Los2 electronesliberadosenlaconversindeSuccinatoaFumarato
se transfieren primero al FAD, luego a FeS, y finalmente a la CoQ,
formandoCoQH2.

3.AunqueelG,paraestareaccinesnegativa,laenergaliberadaNO
es suficiente para el bombeo de protones. Por lo tanto NO hay
translocacindelosprotonesatravsdelamembranaporelComplejo
II.
 MME
Espacio
intermembrana + 4H+

FMN
FeS I QH2
MMI

2e

2e Q
FeS
2e II Matriz
FAD
2H+
NADH
Succinato
H+ + NAD+
Reaccin redox neta catalizada por
el Complejo II, Succinato deshidrogenasa:

Succinato + Q Fumarato + QH2

(reducido) (oxidado) (oxidado) (reducido)
 Adems de la Succinato deshidrogenasa, otras deshidrogenasas
mitocondriales dependiente de FAD, pasan electrones y protones a la
Ubiquinona , pero No a travs del Complejo II.
Glicerol Acil-CoA deshidrogenasa FAD
3-P (1.enzimadela-oxidacin
deloscidosgrasos)
H2
Glicerol 3-fosfato -matriz- EFT-
deshidrogenasa FAD
Cext-MMI EFT:Ubiquinona Oxidorreductasa
(esta enzima (FADH2) Cint-MMI
es parte de FAD
una lanzadera
para reoxidar
el NADH
H2 Q QH2
citoslico)

EFT=Flavoprotena FAD
TransferidoradeElectrones H2
Cext = cara externa de Succinato deshidrogenasa
la MMI (Complejo II)
Cint = cara externa de (ciclodelcidoctrico)
la MMI
MME
Espacio
intermembrana Glicerol-3P
Glicerol-3P
Deshidrogena
Deshidrogena Cara
sa
sa externa

FAD
FMN
FeS
2e
I Q
EFT-Q
EFT-Q
2e II Oxidorreductas
Oxidorreductas Cara
2e a interna
a
MMI FAD FAD
FAD

Matriz
La Succinato Deshidrogenasa, la Glicerol-3P Deshidrogenasa, y la
EFT-Q Oxidorreductasa, todas estas transfieren , electrones a la
Coenzima Q, pero no abarcan la membrana y no tienen un
mecanismo de bombeo de protones.
 Reaccin catalizada por
el Complejo III, Ubiquinona-Cit c-oxidorreductasa:
1.QH2dona2e-alComplejoIII.Dentrodeestecomplejolos
electrones se transfieren a una protena FeS , de aqu a 2
Citocromos tipo b,yluegosontransferidosalCitocromo c1.

2.Por ltimo, los 2 electrones se transfieren desde el

Citocromo c1 a dos molculas de la forma oxidada del
Citocromo c, formandoCitocromo creducido.

3.LavadeloselectronesporestetramodelaCRescomplejo.Peroel
efectonetoessimple:1 QH2 seoxidaaQ,yalavez2 Cit c sereducen.

El G para esta reaccin es lo suficientemente negativo para que 4

protones sean translocados desde la matriz mitocondrial a travs de la
membranainternaparacadapardeelectronestransferidos.
MME
Espacio
intermembrana 4H+ 4H+

2e
FMN FeS I QH2
2e
FeS Cit b
2e
MMI
2e Q Cit c1
2e
FeS
III
2e
FAD
NADH 2H+ II
Matriz
H+ + NAD+ Succinato
Reaccin redox neta catalizada por el
Complejo III, Ubiquinona-Cit c-oxidorreductasa:

QH2 + 2 Cit c1 (Fe

(Fe )) + 2H
++3
+3
Q + 2 Cit c1 (Fe
(Fe )) + 4H
+ +2
+2

(reducido) (oxidado) (matriz) (oxidado) (reducido) (EIM)

 Reaccin catalizada por
el Complejo IV, Citocromo oxidasa:
1. Este Complejo IV transporta electrones desde el Citocromo c al
Oxgenomolecular,reducindoloaH2O.

2. EnesteComplejosetrasporta1nicoelectrnalavez.

3. La transferencia de electrones a travs del complejo IV , es como

sigue:
. primero los electrones pasan del Cit c a un par de iones de cobre
(CuA), a continuacin, al Citocromo a, luego a un centro Citocromo
a3-CuB,yfinalmenteaO2,elltimoaceptordeelectronesdelaCR.

. Porcada2electronesquepasanporelcomplejo,esteutiliza2H +
comosustratoyproduce1molculadeagua(H2O).

4.Tambinutilizalaenergadeestareaccinredoxparabombear 1H+ por

cada electrn quepasa.
5. La transferencia de cada electrn debe ocurrir sin la liberacin de
especiesreactivasdainasparalaclula.
MME

Espacio 2H+
intermembrana Cit c 2e
2H+
2e

2e 2e Citc c1
CuA IV
IV
QH2 FeS Citc b
a
MMI
III a3 CuB
Matriz 2e

O2 + 2H+
Reaccin redox neta catalizada por
H2O
el Complejo IV, Citocromo oxidasa:

2 Cit c (Fe ) + 4H + O2
+3 + 2 Cit c (Fe
(Fe )) + 2H + H2O
+2
+2
+

(reducido) (matriz) (oxidado) (EIM)

 Lareaccinfinalenlacadenarespiratoria,la reduccin
de O2 a H2O tiene un potencial de reduccin estndar
(Eo) de + 0,816 V, el ms positivo en toda la cadena
respiratoria,yporlotantoestareaccin,tambintiende
aocurrirhacialaderecha.
Eo

O2 + 2H+ + 2e- H2O +0,816V

2 protones son tomados de la matriz y 2 electrones que son cedidos por el Cit a3,
se unen a un tomo de oxigeno para reducirlo hasta agua.

Comosediscutianteriormente, el oxgeno molecular es un aceptor

terminal de electrones ideal, debido a su alta afinidad por los
electrones,proporcionaunagranfuerzaimpulsoratermodinmica.
 Se libera energa en la Cadena respiratoria?

Cunta energa se libera?

Cmo se conserva de forma eficiente esta energa?

En que se utiliza esta energa liberada?

 Eo (V) Cadena respiratoria: flujo de los electrones y potencial de reduccin estndar de
componentes mviles (en rojo), y cantidad de energa liberada en cada complejo.
- 0,4
NADH NAD+ + H+ (- 0,320 V)
NADH 2e-

Complejo I
- 0,2 Eo = 0,360 V
Go = - 69,5 kJ/mol
(+0,031V)
Succinato FADH2 Complejo Q (+0,045 V)
0 Succinato Q
II

fumarato Complejo III

fumarato
Eo = 0,190 V
Go = - 36,7 kJ/mol
+ 0,4
Citocromo c (+ 0,235 V)
Citocromo c

+ 0,6 Complejo IV
Eo = 0,580 V
Go = - 112 kJ/mol
2e-
+ 0,8
MAOS-
Fuente de los datos
Texto bioqumica de Voet
O2 + 2H
O2 + 2H+
+ H2O
H2O
(+ 0,816 V)
 El flujo de electrones desde el NADH al O2 es un proceso
exergnicoqueliberalacantidadde220 kJ/mol (52Kcal/mol)

NAD+/ NADH. Eo = - 0,320 V

O2 / H2O.. Eo = + 0,816 V

REACCIN DE OXIDORREDUCCIN NETA de la Cadena Respiratoria :

NADH + H+ + O2 NAD + + H2O

Go = - n F Eo
Go = - 2 (96,5 kJ / V. mol) (1,14 V)
Go = - 220 kJ/mol (de NADH)

Esta energa producto de la transferencia de electrones se

conservaeficientementeenunGradientedeProtones.
 El flujo de electrones desde el FADH2 (de la oxidacin del
succinato a fumarato) al O2 es un proceso exergnico que
liberalacantidadde150kJ/mol

Fumarato / Succinato. = + 0,031 V

O2 / H2O.. = + 0,816 V

Go = - n F Eo
Go = - 2 (96,5 kJ/V. mol) ( 0,847 V)
Go = - 150 kJ/mol

Estaenergaproductodelatransferenciadeelectronesseconserva
eficientementeenunGradientedeprotones.
 Resumen:
Cuandolos electrones pasan a travs de 3 Complejos
proteicos,que contienen afinidad cada vez mayor por
lo electrones(potencialesdereduccinestndarenaumento)en vez
de pasar en forma directa al O2, esto permite que el
gran cambio de energa libre total se divida en 3
paquetes mas pequeos, cada uno de los cuales se
ACOPLA con la sntesis de ATP enunprocesollamado
Fosforilacin oxidativa.
 Eo (V) Cadena respiratoria: flujo de los electrones y potencial de reduccin estndar de
componentes mviles (en rojo), y cantidad de energa liberada en cada complejo.
- 0,4
NADH NAD+ + H+ (- 0,320 V)
NADH

Complejo I ADP+Pi
- 0,2 Eo = 0,360 V
Go = - 69,5 kJ/mol ATP
(+0,031V)
Succinato FADH2 Complejo Q (+0,045 V)
0 Succinato Q
II

fumarato Complejo III ADP+Pi

fumarato
Eo = 0,190 V
Go = - 36,7 kJ/mol ATP
+ 0,4
Citocromo c (+ 0,235 V)
Citocromo c

+ 0,6 Complejo IV ADP+Pi

Eo = 0,580 V
Go = - 112 kJ/mol ATP
2e-
+ 0,8
MAOS-
O2 + 2H
O2 + 2H+
+ H2O
H2O
(+ 0,816 V)
 Inhibidores de la Cadena respiratoria
Inhiben la transferencia de electrones y, como consecuencia de
ello, tambin interrumpen la fosforilacin oxidativa.
Estas sustancias pueden producir rpidamente la muerte

I)I)Inhibidores
Inhibidoresdel
delcomplejo
complejoI I
Rotenona: veneno de peces , e insecticida
extrado de plantas
Amital (barbitrico)
Amobarbital (barbitrico)
Piericidina A (antibiotico)
II)II)Inhibidores
Inhibidoresdel
delcomplejo
complejoIIIIII
Antimicina A: un antibitico de hongos,
bloquea la Cadena respiratoria en el paso entre
elcitocromobyelcitocromoc1
 Inhibidores de la Cadena respiratoria

III) Inhibidores del complejo IV

seunenalFe+3delaCitocromooxidasa,porloqueevita
queeloxigenopuedaunirsealaCitocromooxidasa.

Cianuro (CN-)

N-3 : Azida

Monxido de carbono (CO)

H2S
INHIBIDORES DEL FLUJO DE ELECTRONES HASTA EL OXGENO

Inhibidores: Inhibidores:
Rotenona Inhibidor: Cianuro
Amital Antimicina A Azida
Amobarbital Monxido de carbono

C CI CI
c
I CII
Q
II V
O2 +
MME 2H+
H2O
ADP + Pi
ATP

Espacio intermembrana

MMI citosol
Formacindeespeciesreactivasde
oxgeno(radicales libres) durantela
reaccindelcomplejoenzimtico
Citocromo oxidasa
 MME

Espacio intermembrana
4H + 4 H+ 2 H+
e Cit c

e
e I III IV
MMI QQ
2e
NAD+ Matriz
NADH

Generacindeespecies O2 + 2H+ H2O

reactivasdeoxgenoporla
cadenadetransporteelectrnico
mitocondrial.
Los derivados txicos del oxgeno molecular, tales como superxido
radicales son rescatados por enzimas protectoras

Aunque la citocromo c oxidasa y otras protenas que reducen el O2 son

un xito notable en no liberar intermedios, se forman inevitablemente
pequeas cantidades de anin superxido y perxido de
hidrgeno.
Superxido, perxido de hidrgeno, y las especies que se pueden
generar a partir de ellos, tales como OH se denominan colectivamente
como especies de oxgeno reactivas o ROS.

Cules son las estrategias de defensa celular contra el dao oxidativo

por ROS?
El principal de ellos es la enzima superxido dismutasa. Esta enzima
elimina los radicales superxido por catalizar la conversin de dos de
estos radicales en perxido de hidrgeno y oxgeno molecular.
El principal productor de radicales de oxgeno en los organismos
aerobios es la mitocondria
utiliza aproximadamente el 98% del O2 que ingresa en la clula
reducindolo a agua a nivel del citocromo a3 de la cadena de
transporte de electrones
una pequea parte del O2 incorporado por la mitocondria, sufre una
reduccin monovalente y genera especies reactivas de oxgeno, tales
Por tanto, al ser las mitocondrias la fuente ms importante de
como el radical superxido (O2 ), el perxido de hidrgeno (H2O2),
especies reactivas de oxgeno, es obvio que el DNA mitocondrial
y se
radical hidroxilo
encuentra (OH) que el DNA nuclear a sufrir lesiones
ms expuesto
oxidativas severas que pueden conducir a mutaciones y supresiones
en su propia cadena
Eloxgenomolecular(O2)esunbirradicalquetraslaadicinsecuencial
de 4 electrones y 4 protones en la cadena de transporte electrnico
mitocondrial,generaagua(H2O).
En este proceso, en el que se produce gran cantidad de energa (ATP),
pueden tambin generarse, como subproductos, molculas parcialmente
reducidas con 1, 2 y 3 electrones. Estas son, el radical superxido, el
perxidodehidrgenoyelradicalhidroxilo,respectivamente.
Estos tres , se denominan especies reactivas de oxgeno y causan
lesiones oxidativas a las macromolculas celulares (lpidos, protenas y
DNA).
DNA mitocondrial codificapara:
Complejo Enzimtico No. total No. de Subunidades
de Subunidades Codificadas por el ADN
mitocondrial
( Complejo I) 43 7
NADH deshidrogenasa
o NADH-CoQ oxidorreductasa
( Complejo II ) 4 0
Succinato deshidrogenasa
o Succinato-CoQ
oxidorreductasa
( Complejo III) 11 1
Ubiquinona-citocromo c
oxidorreductasa.
Citocromo c 13 3
( Complejo IV)
Citocromo oxidasa
8 2
Nota: las laminas desde el 54 al 59 no sern evaluados
en el examen parcial de esta unidad 3
 Fosforilacin
Oxidativa

Es el proceso por el cual el NADH y FADH2

producidos por la oxidacin de nutrientes SE OXIDAN
y simultneamente ocurre la SNTESIS de ATP .
 Ecuacin bsica de la Fosforilacin oxidativa

ATP sintasa
ADP + Pi ATP + H2O
Go = + 30,5 kJ/mol

Laenergalibrerequeridaparasintetizar 1mol de ATP a

partir de ADP + Pi es de 30,5kJ (*), en condiciones
bioqumicasestndares.
Si la energa libre estndar producto de la oxidacin del
NADH al O2, esta acoplada a la sntesis de ATP, es por lo
tantosuficienteparaconducirlaformacindevariosmoles
deATP.

(*)encondicionesintracelularesrealesesde50kJ/mol)
 Mecanismo que explica el
Acoplamiento energtico del
Transporte de electrones a la Sntesis de ATP

TeoraquimiosmticadelDr.PeterMitchell(1961)
PremioNobeldequmicaen1978

quimiosmtico: este trmino describe las reacciones enzimticas en

las que interviene simultneamente una reaccin qumica y un
proceso de transporte.
 Mecanismo que explica el Acoplamiento energtico del
transporte de electrones a la Sntesis de ATP:

1. La energa libre de la transferencia de electrones, se

utilizaparaunbombeo de Protones (H+)desdelamatriz
delamitocondriahaciaelEIM.
2. Estemovimientodeprotonesgenera:
. unGradiente de concentracin de protones (esdecir,una
diferenciadepH)atravsdelaMMI.

. UnGradiente de carga electrica (esdecir,unadiferenciade

cargas) a travs de la MMI. Siendo positivo (+) el lado
externodelaMMIynegativo(-)elladointerno.
3.Juntosestosdos gradientes (deconcentracindeH+ydecargas)
ALMACENANla energa libre resultante de latransferencia
deelectrones,yesllamadafuerza protn motriz.
4.Elregreso de los protones hacialamatrizatravs
deComplejodelaATP sintasa ,estaACOPLADOala
Sntesis de ATP. Proporcionando este flujo, la
energanecesariaparaunirunPialADP.

5.Lamembrana interna mitocondrialesimpermeable

alosIonesH+.Deotromodosedisiparaelgradiente
deconcentracindeprotones.

Comoseacoplalaenergalibredelatransferencia
deprotonesalasntesisdeATP?
MME

Espacio intermembrana
4H + 4H+ 2H+
Cit c
+ + + + + + + + + + + + + + + + + + + +
e
MMI
e
I QQ III IV
2e

NAD+
NADH
MATRIZ O2 + 2H+ H2O

Durante el transporte de electrones:

los Complejos enzimticos I , III y IV, bombean Protones ( H+ )
desde la matriz de la mitocondria, hacia el espacio intermembrana
(flechas verdes).
 El bombeo de H+ es un proceso endergnico.
La molculas NADH y FADH2 transfieren electrones a la CR, y se
libera energa durante el proceso , parte de sta es utilizada para
bombear protones desdelamatrizalEIM.
Este bombeo de H+ tiene dos consecuencias:
1. Se genera un Gradiente de concentracin de protones (pH) a
travsdelaMMI,conelpH ms alto (mas alcalino) en la matriz,que
enelEIM.
2.SegeneraunGradiente de carga ()(=diferenciadepotencial)a
travsdelaMMI,conelinterior negativo yel exterior positivo(como
resultadodelasalidanetadeionespositivos).
En conjunto la pH y la constituyen un
gradiente electroqumico , el cual almacena la energa
del
. transporte de electrones.
3.Aestaenergaalmacenadaenestegradienteelectroqumicosele
denominaFUERZA PROTON MOTRIZ.
Letra del alfabeto griego (Psi)
 La perdida de protones de la Matriz por el bombeo al
Espacio Intermembrana (EIM) , vuelve a la
Matriz mas negativa y al EIM mas positivo.

Alta [ H+ ] El EIM es Mas cido

H+

H+ H+
H+ H+ H+ H+ Espacio
H+ H+ H+ intermembrana

+++++++++++++++++++++++++++
MMI
OH- OH- OH- OH - OH- OH-
OH- Matriz
OH -
H++
H H+
H
H++ H++
H H++
H

potencial de membrana= La Matriz Mas alcalina

diferencia de carga
elctrica a travs de una (elpHes0,75unidadesmayorqueelEIM)
membrana
Para que se pueda mantener este gradiente
electroqumico a travs de la membrana interna , se
debendarlassiguientescondiciones.

1. Que la membrana mitocondrial interna se mantenga

intacta y no se haya hecho permeable con agentes
fsicosoqumicos.

2. Que la transferencia de electrones sea continua, es

decir que sustratos como el NADH, el FADH2 y el
oxigenosehallendisponibles.
 ATP sintasa
Es unaATPasa de tipo F . El tipo F proviene de la identificacin
deestaATPasacomounFactor deacoplamientodeenerga.
Esuncomplejo enzimticodelamembranainternamitocondrial
que cataliza la sntesis de ATP a partir de ADP y Pi,
acompaadoporelflujodeprotonesdesdeelEIMalamatriz.

Estacompuestapor2componentesfuncionalesFoyF1.

Fo :Esunaprotena integral ubicadaenlaMMI,queformaun

poro (canal) transmembrana para protones. La letra del
subndiceoindicasuinhibicinporlaOLIGOMICINA.

F1:Esunaprotenaperifricademembrana, que mira hacia el

interior de la matriz, contieneelsitio cataltico para la sntesis
de ATP . Elsubndice1indicaquefueelprimerfactoridentificado
comonecesarioparalafosforilacinoxidativa.
 Estructura de la
ATP sintasa
tambin llamada
Fo - F1 ATPasa,
o Complejo V
MATRIZ
MITOCONDRIAL

MEMBRANA INTERNA

ESPACIO INTERMEMBRANA
 DIAGRAMA QUE REPRESENTA LA CADENA DE TRANSPORTE DE ELECTRONES
Y LA FOSFORILACIN OXIDATIVA

MME

ESPACIO
INTERMEMBRANA

MMI

MATRIZ
ATP
SINTASA

Fuente: texto de Lehninger 4ta Ed.

 Sistemas de transporte a travs de la
Membrana mitocondrial interna

1. Adenina- Nucletido Translocasa.

Esunaprotenatransportadora.ElADPescotransportadoconelATP
en direcciones opuestas por esta protena . (ElADP hacia dentro y el
ATPhaciafueradelamatriz).
Estetranslocadoresinhibidoporunglucsidotxicollamado
Atractilsido(delaplantaAtractylis gummifera)yelcidobongkrkico
(antibiticoproducidoporunhongoquedescomponelalechedecoco).

2.Transportador de Fosfato
 Translocasasdelamembranamitocondrialinterna(MMI)
quetransportanADP ,ATP ,y Fosfato inorgnico
Espacio MM +

intermembrana I Matriz
+
+

ATP ATP
ANT
ADP + ADP
+
+

Gradiente ATP
de
concentraci
H +
sintasa H+
n +
de protones

H2PO-4
+
H2PO-4
H+ +
+
FT H+
+

ANT = Adenina-Nucletido Translocasa FT = Fosfato Translocasa

H2PO-4 = Fosfato inorgnico = Pi MAOS
 Importancia del transporte mitocondrial

En los tejidos aerbicos casi todo el ATP se sintetiza

dentro de la mitocondria. Sin embargo este se utiliza
fueradeella.
 Relacin P/O

Es la proporcin de ATP sintetizado por tomo de

OxigenoreducidoaH2O.

Esta relaciones P/O estn sujetas a revisin

 Cuntos protones han de entrar a travs del
Complejo Fo F1 (ATP sintasa) para impulsar la
sntesis de ATP?
El valor consenso de los protones que se bombean
haciaafueraporcada2e- es:de10paraelNADHy
de6 paraelSuccinato.

El nmero de protones necesarios para impulsar la

sntesis de una molcula de ATP esde4 (deestos1
segastaentransportarPiyADPatravsdelaMMI).

La razn P/O cuando un NADH es el dador de

electrones,esde2,5(10/4)y1,5 (6/4)cuandoloesel
Succinato.

Losvalores 2,5 y 1,5,ylosvalores 3 y 2 paralarazn

P/O,seutilizanenlostextosdebioqumica.
Fuente: texto de Lehninger 4ta Ed.
La oxidacin de un NADH se acopla a la sntesis de ATP, y
generalasntesisaprox.de3ATP.
En consecuencia la eficiencia termodinmica de la
fosforilacinoxidativaes3x30,5kJ/molx100/220kJ/mol=
42% bajo condiciones bioqumicas estndares.

Sin embargo bajo condiciones fisiolgicas en las

mitocondrias activa (donde las concentraciones de los
reactivos y los productos as como el pH se alejan de las
condiciones estndares), se cree que esta eficiencia
termodinmica es de 70%.Encomparacinlaeficienciade
unmotordeautomviltpicoesde<30%.

Texto de Bioqumica
Autor. Voet-Voet 3ra. Edicin. cap 22.pag.835
Sisoloseutilizaaproximadamenteel42%delaenerga
delaoxidacindelNADHoFADH2paraLasntesisde
ATP,Qusucedeconelrestodelaenerga?
Partedeestaenergasepierdeenforma de calor.
Porconsiguientelacadenarespiratoriaesnuestraprincipal
fuentedecalor
 Nota:
Si la eficiencia en el proceso de sntesis de ATP
acoplada con la oxidacin de NADH , fuera de
100% , seria en teora posible sintetizar 7,51 moles
de ATP por cada mol de NADH oxidado a NAD+ ,
bajo condiciones estndares.
 LA ENERGA SE GASTA EN :

1) Bombeo de protones desde la matriz a EIM

(porc/2electronestransferidosalO2sebombean4protonesporelCI;
4porelCII,y2porelCIV).

2) La Sntesis de ATP.

3) El transporte de Piruvato, ADP y Pi desde el EIM

hacia la matriz

4) El transporte de ATP desde la matriz hacia el EIM.

 Regulacin de la fosforilacin oxidativa
ElcontroldelavelocidaddelaFosforilacin oxidativaestaligadaala
demandadeenergacelular.
El consumo de O2 (tasa respiratoria) esta controlado por la
concentracin de ADP,lacualesunamedidadelestadoenergtico
delaclula.

La velocidad de la respiracin celular aumenta si la concentracin

de ADP es alto,comosucedecuandolosrequerimientos de energa
por la celular son altos, hay un aumento de la velocidad en la
degradacin ATP a ADP +Pi,por tanto hay mayor disponibilidad de
ADP para la Fosforilacin oxidativa y aumenta la velocidad de la
Cadena respiratoria, y la fosforilacin de ADP, lo que da lugar a la
regeneracin de ATP.
El ATP de forma a la misma velocidad en que es requerido por la
actividadescelulares,,
 UNAUMENTOEN LA UTILIZACIN DE ATP PORLACLULA

PRODUCEUNAUMENTO DE LA CONCENTRACIN DE ADP

AUMENTALA FOSFORILACIN DEL ADPPORLAATPSINTASA

AUMENTAEL FLUJO DE PROTONES DEREGRESOALAMATRIZ

AUMENTA EL FLUJO DE ELECTRONES,YELBOMBEODEPROTONES

HACIAELEIM

YPORTANTOAUMENTA EL CONSUMO DE OXIGENO

 INHIBIDORES DE LA
FOSFORILACIN OXIDATIVA

La oligomicina un antibitico producido por un

hongo se une a la protena F0 de la ATP sintasa,
impidiendoelnormalmovimientodeprotoneshacia
lamatriz.
Bloque completamente la oxidacin y la
fosforilacinenlasmitocondriasIntactas.
 INHIBIDORES DEL TRANSPORTE DE LOS
NUCLETIDOS DE ADENINA EN LA
MEMBRANA MITOCONDRIAL INTERNA

1. Atractilsido : glucsidovegetal

2. cido bongkrekico: antibiticoproducido

porunhongo.
 Desacoplamiento entre la Cadena respiratoria
y la Fosforilacin Oxidativa
por qumicos desacoplantes
(desacoplamientodetiponofisiolgico)

Los desacopladores son compuestos que aumentan

la permeabilidad de la membrana a los protones.
DESACOPLAMIENTO DE LA FOSFORILACION OXIDATIVA
Mecanismo de accin:
Los desacopladores tienen como efecto desconectar la
fosforilacin oxidativa de la transferencia de electrones.
Por tanto puede funcionar la cadena respiratoria sin tener lugar la
sntesis de ATP,enestasituacinlaenergaquenormalmentesehubiera
conservadoenlaformacindelATP,se pierde ahora en forma de calor.

ejemplodedosdesacopladoresqumicos:
2,4-dinitrofenol(DNP)
Carbonil-cianuro-p-trifluorometoxifenilhidrazona
(FCCP)
Dicumarol
Ambossonionforos,cidosliposolublesdbilesqueseunenalosH+enel
EIM,difundenatravsdelamembrana,ylosliberanenlamatriz.
 VELOCIDADDELA
CADENARESPIRATORIA
DESACOPLANTE (OXIDACIN)

FOFORILACINDEADP
 Efectos fisiolgicos de los desacopladores :

1. Aumenta la Tasa metablica,

2. Aumenta el Consumo de oxigeno

3. Aumenta la Produccin de calor (fiebre).

4. Causa Perdida de Peso

Estos dan por resultado una respiracin no controlada, La

concentracin de ADP ya no limita la velocidad de la respiracin
 Desacoplamiento fisiolgico
entre la Cadena respiratoria y la
Fosforilacin Oxidativa

Termognesis adaptativa

Condiciones en las que ocurre:

En respuesta al frio
En periodos de Hibernacin
Ingestin de alimentos

Lugar : exclusivamente en tejido adiposo marrn

Generacin de calor (termognesis) en el Tejido adiposo
marrn.LasMitocondriasdesacopladasdeltejidoadiposomarrn
producencalor,bajocontrolhormonal,
Paramantenerlatemperaturacorporal
calor
enlos: calor

1. AnimalesRecin nacidos de algunas especies, que nacen sin

pelaje (incluyendo al humano)
2. Animales hibernantes ( distribucin de la grasa marrn: en su
cuello y parte superior de la espalda)

3. Animales de hbitat frio

4. Seres humanos adultos, en poca cantidad (distribucin de la
grasa marrn: parte dorsal del trax, parte inferior de los omplatos, alrededor de
las adrenales, riones, corazn, regin perianal e inguinal).
 La funcin fisiolgica del TEJIDO ADIPOSO MARRN (grasa parda),
es generar calor .

es un tejido con una gran cantidad de triacilglicridos, es rico en

mitocondrias cuyos citocromos le confieren el color marrn. Contiene
protenas de desacoplamiento (UCP).
M

LV= gota de
grasa
M=
M
Adipocito mitocondria
Adipocito
de grasa blanca
de grasa parda N= ncleo
La TERMOGENINA tambin llamada Protena desacopladora 1 (UCP-1)
estaubicadaenla MMI del adipocito marrn ,formaunacanalpordonde
losprotonessonconducidosderegresoalamatriz,sinpasaratravsde
la ATP sintasa, desacoplando la CTE de la Fosforilacin Oxidativa, esto
permite la oxidacin continua de combustible, sin sntesis de ATP , y
disipandolaenergaenformadeCALOR.

UCP = Uncoupling protein

 Histologa del ADIPOCITO MARRN y presencia de la
Termogenina (UCP1) en la mitocondria

M M

M B)

A)
UCP1
A) Elcitosoldeladipocitomarrnescaracterizadopornumerosasmitocondriasy
gotitasdegrasa.B) Ampliacindeunamitocondriadeunadipocitomarrn,se
muestranCrestasenparaleloylaUCP1(puntosnegros).
http://journal.frontiersin.org/Journal
 Mecanismo de termognesis
Mitocondria desacoplada en el tejido adiposo marrn
1
Noradrenalina FRIO Adipocito
TAG
marrn
2
+ cidos Grasos Libres
(AGL) 3
CALOR

H+ UCP1
H+
Desacoplamiento
H+
+
Desacoplamiento
(canaldeprotones)
Acoplamiento (canaldeprotones)
Acoplamiento
(FosforilacinOxidativa)
ADP+Pi 5
(FosforilacinOxidativa) ATP FADH2 AGL
Disminuy NADH -Oxidacin
e H+ 4
Esta va matriz
CTE
H+

H+
H+
MMI
H +
 FIN DE LA UNIDAD 3

CO2 (g)
O2 (g
)

Respiracin H 2O
celular
aerbica

Combustibles Energa
(azcares, grasas, protenas) celular