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UNIVERSIDAD PARTICULAR DE CHICLAYO

FACULTAD DE MEDICINA
ASIGNATURA: MICROBIOLOGIA - PARASITOLOGIA

MTODOS DE SIEMBRA EN MEDIOS DE


CULTIVO

Lic. Blga. SONIA FIESTAS PURIZACA


OBJETIVOS:

Al trmino de la practica el alumno ser capaz de:


Adquirir la manualidad y destreza en la siembra de
microorganismos que le permitan la obtencin de cultivos
puros.
Obtener colonias aisladas o cultivos puros mediante
trasplante en medios de cultivos, Agar inclinado y agar por
picadura o caldos,.
SIEMBRA

Procedimiento por el cual se


pone en contacto el
microorganismo con el medio de
cultivo, para que en condiciones
ptimas de temperatura y
tiempo de incubacin pueda
desarrollarse y multiplicarse in
vitro
La siembra puede realizarse en medio
lquido, slido o semislido, utilizando
punta, ansas, hisopos o pipeta estril.
Las siembras pueden ser:
Primarias: cuando el material es inoculado
en los medios por primera vez
Secundarias: cuando el material a inocular
procede de una siembra primaria
Siempre debe trabajarse
cerca del mechero para
flamear la boca del tubo o
la placa petri con el
medio, antes y despus
de sembrar para evitar
contaminaciones
Para sembrar en placa
petri es necesario que
la superficie del medio
este completamente
seca
MATERIALES

Muestras para cultivar


Tubos y placas petri
con medios de cultivo
Asas de siembra en aro
y en punta
Mechero
METODO DE DISPERSION: AGOTAMIENTO POR ESTRAS EN MEDIO
SLIDO (PLACA)

Con un asa
bacteriolgica, se pasa
una porcin de la
muestra a la superficie
de un medio de cultivo
hecho a base de agar y
se siembra en el medio
por estras en
cuadrantes.
TCNICA DE SIEMBRA POR ESTRAS EN PLACA

El asa de siembra debe ser esterilizada


en la llama ( flameada) y enfriada.
Tomar una pequea muestra con el asa
de siembra.
El asa debe ser sostenida suavemente
entre los dedos con cuidado de no
hundirla en el medio.
Sembrar en el medio slido en placa petri
inoculando la muestra en el medio y
distribuyndola homogneamente en los
cuatro cuadrantes de la placa.
SIEMBRA POR ESTRAS EN
SUPERFICIE:
Esta se realiza en la superficie de el agar

inclinado en un tubo de ensayo, la

muestra se extiende por toda la superficie

con el asa bacteriolgica, previamente

esterilizada y haciendo estras no muy

amplias, pero tampoco muy estrechas. Se

inicia por la parte ms profunda de la

superficie inclinada y se termina la estra

en la parte ms cerca de la boca del tubo.


SIEMBRA POR ESTRA EN MEDIO SLIDO EN
TUBO

El asa de siembra debe ser


esterilizada en la llama ( flameada) y
enfriada.
Tomar una pequea muestra con el
asa de siembra.
Deslizar el asa de siembra
suavemente en zigzag en el tubo
con medio slido, empezando desde
el fondo del tubo.
SIEMBRA POR PICADURA O PUNCIN (EN
MEDIO SEMISLIDO)

Con una aguja se toma el material que se quiere

sembrar y se lo introduce en el tubo, con medio

semislido. Introducir la aguja hasta el fondo,

formando un canal de puncin, trayecto por el cual la

retiraremos luego. Este mtodo se utiliza para estudiar

la movilidad de las bacterias.


METODO POR PUNTURA EN MEDIO SEMISLIDO EN TUBO

El asa de siembra debe ser esterilizada


en la llama (flameada) y enfriada.
Tomar una pequea muestra con el asa
de siembra.
Sembrar en el medio semislido
introduciendo la aguja en forma vertical.
Debe tenerse cuidado en hacer que el
trayecto de salida sea el mismo que el
de entrada.
SIEMBRA POR PICADURA Y ESTRAS EN
SUPERFICIE:

Se siembra por picadura en

profundidad y estras en superficie, se

utiliza para estudiar los cambios que

ocurrirn en superficie y profundidad.

A lo largo del canal se desarrollan los

microorganismos, y segn lo hagan en

la parte superior o inferior del tubo,

estarn indicando su comportamiento

frente a los azucares,


MTODO POR INOCULACIN EN MEDIO LIQUIDO

El asa de siembra debe ser

esterilizado en la llama (flameada

y enfriada.

Tomar con el asa de siembre una

cantidad suficiente de muestra.

Introducir el asa de siembra con la

muestra hasta el fondo del tubo

con medio lquido, sin tocar las

paredes del mismo


LECTURA E INFORME DE LAS MUESTRAS CULTIVADAS

Una vez sembrada la muestra, se rotula

completamente para identificarla y se

incuba a 37C. Por 24 hrs, al termino

del cual los cultivos se sacan de la

incubadora, y se observa su crecimiento

estudiando sus caractersticas.

Algunos microorganismos requieren

atmsfera con 3 a 5% de CO2 y otros

como los anaerobios no requieren de

oxgeno
MORFOLOGIA DE LA COLONIA
Las colonias son masas visibles de clulas que se

forman por divisin de unas o varias clulas, a

menudo estas tienen forma y aspecto

caracterstico.

El tamao, forma textura y color de la colonia es

propia de cada organismo.

La morfologa de la colonia puede variar segn el

medio en que crezca la bacteria.


POR LA FORMA DE LA COLONIA
POR LA ELEVACIN
POR EL MARGEN
KLEBSIELLA SP E. coli SERRATIA SP

PROTEUS SP B. anthracis PSEUDOMONA


S SP
MICROCOCCUS
SP
Posteriormente de una de las colonias, se debe realizar una
coloracin GRAM para determinar:
Morfologa,
Caractersticas de la tincin
Agrupacin
El aislamiento y pureza de la cepa aislada son indispensables.
Debe pasarse a distintos sustratos para:
Llegar a la identificacin por pruebas bioqumica
Realizar pruebas de sensibilidad antibitica.