NOI POSIBILITI DE UTILIZARE

TERAPEUTIC A CELULELOR STEM

PENTRU VINDECAREA LEZIUNILOR
FOCALE DE CARTILAJ ARTICULAR
Horea BENEA, Gheorghe TOMOAIA
UMF Iuliu Haieganu
Clinica Ortopedie-Traumatologie Cluj-Napoca
beneahorea@yahoo.com
 Scopul studiului

Scop: evaluarea comparativ a dou metode

care utilizeaz celule stem multipotente pentru
vindecarea defectelor focale de cartilaj articular
Obiectiv: efectuarea unui studiu preclinic
experimental comparativ in-vivo pe model
animal ovin de reparare a defectelor focale de
cartilaj articular prin metode care presupun
utilizarea de MSC
 Obiectivele studiului
1. Realizarea metodelor de recoltare de celule stem
din concentrat de aspirat din mduva osoas iliaca
(BMAC) i din esutul adipos (ADSC) pe model ovin i
caracterizarea populaiilor celulare obinute
2. Realizarea metodelor intervenionale pe 12 modele
ovine prin crearea defectelor de cartilaj la nivelul
condilului femural medial i trohleei femurale i
repararea prin tehnici specifice care implic MSC
3. Analiza comparativ la nivel macro i microscopic a
evoluiei leziunilor dup 6 luni, n absena
tratamentului i dup interveniile de reparare cu
implicarea celulelor stem.
 Stadiul actual al cunoaterii

n momentul actual, patologia i tratamentul leziuni-

lor focale de cartilaj reprezint un domeniu de cerce-
tare intens, att la nivel de laborator, ct i in-vivo
Dei exist mai multe proceduri terapeutice prin
care se ncearc repararea leziunilor de cartilaj,
problemele sunt legate de eficiena redus,
dificultatea tehnic sau preul de cost foarte ridicat
n acest context ctig tot mai mult teren
procedeele biologice care utilizeaz celule stem
multipotente (MSC), factori de cretere, cu sau fr
aplicarea local a unor scaffold-uri.
Stadiul actual al cunoaterii
Stadiul actual al cunoaterii
Stadiul actual al cunoaterii
 Material i metod

Studiu preclinic experimental comparativ in-vivo pe un lot

de 13 oi adulte (randomizare)
Se practic defecte condrale complete de 10 mm
diametru pe condilul femural medial (CFM) i alternativ pe
trohleea femural (TF)
Grupul BMAC (6 oi): BMAC + mb. colagen I/III
(ChondroGide) sigilat cu adeziv de fibrin
Grupul ADSC (6 oi): ADSC + PRP (plasm bogat n
trombocite) + mb. colagen I/III
1 oaie: practicare leziuni condrale fr reparare (model de
evoluie natural a leziunilor)
 Material i metod

BMAC
 Material i metod

ADSC
 Material i metod

Memebrana colagen I/III

 Material i metod

O singur intervenie chirurgical

Optimizarea procedurii de prelevare a aspiratului din
creasta iliac i din esutul adipos
Caracterizarea populaiilor celulare prin metode
specifice microscopice i imunohistochimice
Protocol ngrijiri postoperatorii identic
La 6 luni sacrificare i examinare (2 observatori)
Aspect clinic, funcie articular, complicaii, Rx
Macroscopic: inspecie direct, scoruri de evaluare
morfologic (Niederaurer, Fortier, ICRS)
 Material i metod

Microscopic:
Analiz histologic calitativ - vindecare prin cartilaj hialin cu
colagen II i proteoglicami, fr colagen I, fr fibrocartilaj
Analiz statistic a parametrilor cantitativi ICRS II-
2010 - morfologie tisular, coloraie Safranin-O, regularitatea suprafeei,
integritate structural, grosime, legarea de cartilajul adiacent, integrare
bazal, formarea unei liniei de demarcaie tidemark, anomaliile osului
subcondral/fibroza medular, regenerarea osului spongios, hipocelularitate,
aglomerarea condrocitelor, absena modificrilor degenerative n esutul
cartilaginos adiacent, evaluare global
Determinare imunohistochimic a ponderii
colagenului I i II.
 Rezultate ateptate

Ipoteza: sub influena factorilor locali, celulele stem

multipotente implantate vor fi direc ionate spre linia
condrocitar i vor permite refacerea local cu esut
cu caracteristici de cartilaj hialin i cu structur i
proprieti asemntoare cartilajului sntos
Celulele stem vor continua s secrete local factorii de
cretere cu rol n regenerarea tisular (aproximativ 7
zile)
Concentraia i activitatea MSC este probabil mai
mare la nivelul BMAC dect la nivelul ADSC, avnd
astfel un potenial regenerativ mai mare
 Concluzii

Studiul va aduce reale beneficii pe plan tiin ific,

pornind de la promisiunea acestor terapii cu celule
stem, care reprezint o speran pentru viitor n
tratamentul defectelor focale de cartilaj articular i
nu numai, exemplele putnd merge ctre
tratamentul artrozelor, pseudartrozelor sau infec iilor
osteoarticulare.
 Impactul studiului

Impact - introducerea n practica clinic curent a

tehnologiilor ce utilizeaz MSC, cu urmtoarele
scopuri:
Scurtarea timpului de recuperare dup intervenii
chirurgicale
Scderea ratelor de morbiditate i a eecului
chirurgiei tradiionale
Diminuarea invaziviti procedurilor
Limitarea sau chiar evitarea interveniei
chirurgicale
 Bibliografie
1. Gobbi A, Karnatzikos G, Scotti C, Mahajan V, Mazzucco L, Grigolo B. One-Step Cartilage Repair with Bone Marrow
Aspirate Concentrated Cells and Collagen Matrix in Full-Thickness Knee Cartilage Lesions: Results at 2-Year Follow-
up. Cartilage. 2011;2:286-299
2. Kim SH, Park DY, Min BH. A New Era of Cartilage Repair using Cell Therapy and Tissue Engineering: Turning Current
Clinical Limitations into New Ideas. Tissue Engineering and Regenerative Medicine. 2012;9(5):240-248
3. Kon E, Filardo G, Roffi A, Andriolo L, Marcacci M. New trends for knee cartilage regeneration: from cell-free scaffolds
to mesenchymal stem cells. Current Reviews in Musculoskeletal Medicine. 2012;5(3):236-43
4. Buda R, Vannini F, Cavallo M, Grigolo B, Cenacchi A, Giannini S. Osteochondral lesions of the knee: a new one-step
repair technique with bone-marrow-derived cells. J Bone Joint Surg Am. 2010;92:2-11
5. Fortier LA, Potter HG, Rickey EJ, Schnabel LV, Foo LF, Chong LR, et al. Concentrated bone marrow aspirate improves
full-thickness cartilage repair compared with microfracture in the equine model. J Bone Joint Surg Am. 2010 Aug
18;92(10):1927-37
6. Fernyhough ME, Hausman GJ, Guan LL, Okine E, Moore SS, Dodson MV. Mature adipocytes may be a source of
stem cells for tissue engineering. Biochemical and Biophysical Research Communications 2008;368:455457
7. Maumusa M, Manferdini C, Toupeta K, Peyrafitte JA, Ferreira R, Facchini A, Gabusi E, Bourin P, Jorgensen C, Lisignoli
G, Nol D. Adipose mesenchymal stem cells protect chondrocytes from degeneration associated with osteoarthritis.
Stem Cell Research 2013;11:834844
8. Manferdini C, Maumus M, Gabusi E, Piacentini A, Filardo G, Peyrafitte JA, Jorgensen C, Bourin P,Fleury-Cappellesso
S, Facchini A, Noel D, Lisignoli G. Adipose-Derived Mesenchymal Stem Cells Exert Antiinflammatory Effects on
Chondrocytes and Synoviocytes From Osteoarthritis Patients Through Prostaglandin E2. Arthritis&Rheumatism,
2013;65(5):12711281
9. Van Lent PLEM, Van den Berg WB. Mesenchymal stem cell therapy in osteoarthritis: advanced tissue repair or
intervention with smouldering synovial activation? Arthritis Research & Therapy 2013;15:112
10. Toupet K, Maumus M, Peyrafitte JA, Bourin P, Van Lent PLEM, Ferreira R, Orsetti B, Pirot N, Casteilla L, Jorgensen C,
Noel D. Long-Term Detection of Human Adipose-Derived Mesenchymal Stem Cells After Intraarticular Injection in
SCID Mice. Arthritis&Rheumatism, 2013;65(7):17861794
 Acknowledgement

Acest articol a fost publicat prin Fondul Social

European, Programul Operaional Dezvoltarea
Resurselor Umane 2007-2013,
contract nr. POSDRU /159/1.5/S/138776.
V MULUMESC!