Diseo y simulacin de la produccin

de PHB por Ralstonia Eutropha a

partir de Fructosa.

Karen Daz
Leidy Gualdrn
Alejandra Gualdrn
Sergio Pea
Grupo: PHB-J2
 SUSTRATO - CEPA

CEPA: RALSTONIA
EUTROPHA

SUSTRATO:

1
 OPERACIN BATCH

Se realiza utilizando un
En la fase de
volumen fijo de medio.
crecimiento
exponencial la
bacteria se replica a Los nutrientes y el
una velocidad inculo son adicionados
determinada, hasta al comienzo de la
llegar al agotamiento fermentacin.
de nutrientes, la
velocidad de Las nicas lneas de
crecimiento entrada y salida son las
disminuye y la de aireacin.
+ + +
poblacin celular se
mantiene estable.

= -PHB
2
 OPERACIN EN CONTINUO

Los estudios que se han

llevado a cabo con el
Microorganismo Ralsthonia
Eutropha no indican proceso
en Continuo debido a que el
No se lleva a cabo
microorganismo al producir porque al finalizar un
intracelularmente el PHB proceso la bacteria
requiere ser sometido a un sufre lisis celular para
proceso de Lisis celular, es extraer el PHB.
decir finalizado el
crecimiento bacteriano con
produccin interna del PHB la
clula debe morir para poder
obtener el producto.

3
 OPERACIN EN FEDBATCH

Este sistema es Se inicia como

utilizado cultivo batch, para
principalmente para luego agregar una
disminuir efectos de alimentacin en
inhibicin por pulsos o controlada
sustrato o represin para mantener una
catablica mediante cierta concentracin
la adicin residual de fuente de
intermitente de carbono en el medio.
nutrientes, llegando
a mejorar la
productividad de la

+
fermentacin.
+ + +
= +P
HB
4
 ELECCIN

La principal desventaja del proceso Batch es

que debido al agotamiento de nutrientes, las
concentraciones celulares alcanzadas,
generalmente no son altas. La cepa emplea
ms tiempo en empezar a producir el
biopolmero.

El proceso Fed-Batch es una buena

alternativa para lograr una alta densidad de
biomasa conteniendo la mayor cantidad
posible de PHB en menos tiempo que el
Batch, logrando reduccin de los costos en
los procesos de separacin de PHB.
El Ks para Fed-Batch indica que hay mayor
afinidad del microorganismo con el sustrato.
5
 Birreactor agitado con nica
entrada

BIOMAS
A LIBRE

RESPIRACI
N
AEROBIO

CULTIVO
PARA
MEDIO
LQUIDO

AGITACI
N
MECANI
CA

6
Factores que intervienen en el diseo y
operacin del bioreactor

1. 6. Optimizacin
Requerimiento de costes de
del bioproceso produccin

2.
Caractersticas
e impacto del 5. CIP/SIP
diseo del
proceso.

3. Geometra
4. Seleccin y
de un reactor y
diseo de los
seleccin del
accesorios
agitador

7
Requerimientos del Caractersticas de la clula:

METABOLISMO CELULAR: Por sea aerobio se

determinar aspectos como la aireacin o el control de
pH en el interior del bioreactor.
bioproceso
TIPO DE CLULA: Influir directamente en el tipo de
agitacin y el control de temperatura en el interior del
bioreactor.

Modo de operacin:

Fed-Batch o alimentacin intermitente.

Condiciones de esterilidad:

Evitan la aparicin de contaminacin, ya sea qumica o

microbiolgica. Los materiales deben garantizar la
inocuidad total, deben ser inertes qumicamente y
deben ser resistentes a las soluciones de lavado y los
procesos de desinfeccin.
8
 Temp
Mtod eratur
o de a
mezcla const
y ante
agitaci y
n homo
El diseo gnea Mtod
Distrib
del sistema ucin o de
control
deber unifor
me de de
temper
garantizar clula
s atura
Mnim
en todo el Ausenci o
volumen del a de
sedime
gradie
nte de
equipo los ntacin conce
y de ntraci
siguientes floculaci n de
Mtodo
aspectos: n nutrie
ntes de
Mtod control
o de de [O2]
contro o
l de mtodo
pH de
aireaci
n 9
 AGITACIN

Crea o acelera el
contacto entre dos o
varias fases.

Fase gaseosa:
Fase slida:
Fase lquida: Proporciona un
Clulas individuales, reservorio para el
Sales disueltas, agregados celulares,
sustratos y suministro de
sustratos insolubles o oxgeno, para la
metabolitos. productos del eliminacin del CO2 o
metabolismo que para el ajuste de pH.
precipitan.

Un
agitador
mecnico,
montado
en un eje
y
accionado
por un
1
GEOMETRA DEL
BIORREACTOR

Configuracin cilndrica vertical.

Fondo toriesfrico tipo Koppler.
Volumen reactor 3 Litros
Volumen de medio de cultivo 2
Litros
Agitador de 200 rpm
Altura reactor: 0.25m =250 mm
Dimetro del reactor: 0.122m= 122
mm

1
 GEOMETRA DEL
BIORREACTOR

http://www.horfasa.com/utilidades.php?ide=41&card=3 1
 Los ms habituales
son aceros
inoxidables de alta
MATERIAL DE calidad, vidrio
revestido de acero. El
FABRICACIN Sulfato de Amonio
(SAM) contiene
Amonio y Azufre en
forma de Sulfato es
un producto de pH
cido.
La carga se
efecta a travs Deben
de conexiones presentar un
en la tapa del
reactor. Los
acabado pulido,
vapores y gases tanto interior
tambin se como exterior,
alimentan a que evite la
travs de acumulacin de
conexiones en la partculas.
parte superior.
No reactivo y
resistente a la
esterilizacin y a
los reactivos de
limpieza., vidrio o
aleaciones para las
partes en contacto
con producto.
1
 IMPULSOR DEL AGITADOR: Flujo
axial

Posibilidad de montaje tanto en

fondo superior como inferior.
Bajo poder de cizalladura de las
paredes celulares.
Fcil drenabilidad para que los
patrones de flujo que permiten la
homogeneidad del contenido.
Crean las turbulencias necesarias
para la correcta mezcla.
Se suele colocar a 1/3 de la base.

1
 NICA ETAPA O MLTIPLES
ETAPAS?

En muchos casos,
estos cultivos por lote
alimentado son
llevados a cabo en
nica etapa pero
como una
fermentacin de dos
fases.

En la segunda fase
En la primera fase, las
solo se adiciona la
clulas son cultivadas
fuente de carbono
hasta un mximo de
para la acumulacin
densidad celular que
de PHB y empieza la
puede hacerse en un
limitacin de
medio mnimo cultivo.
nutrientes.

1
 Lazo de Control:
Procedimiento

Medida y control totalmente

automtico

Control de pH, cido y base.

Control del rango de PH, para esto

se establece un determinado rango
permitido (Set point), tambin se
establece la precisin que se
desee .

Alarma automtica.

El sensor de pH transmite
una seal continua. 1
pH-metro

Dispositivo de medida
del punto de consigna
(Set Point) para que
indique cuando el
reactor posee
variaciones de pH al
introducir cada
alimentacin nueva de
sustrato.

1
 Vlvula de bola:

Se utilizar la
vlvula
neumtica de
bola que es
perfecta para
aplicaciones
en la industria
Vlvula de control operada por aire (3-15 psi
de aire). qumica.

FUente :JORDAN VALVE,2013

1
 Corrientes de
entrada al
bioreactor Fed-
Batch.
Sustrato:
Fructuosa

Corrient
es de
entrada
Inyecci
Sulfato n de
de aire
amonio

La mayor parte de los microorganismos crecen ptimamente a

pH comprendidos entre 5,5 y 8,5. Concretamente, las bacterias
crecen a pH neutro y los hongos a pH cido. Para mantener
constante el pH y que su variacin no perjudique el crecimiento,
debe realizarse la medida de pH. El set point que se estableci
para el bioreactor es un pH de 6
1
 Forma del lazo de
Control de pH

Se mide el nivel cido o bsico dentro el bioreactor con el pH-metro.

El valor ledo se compara con el set point y se produce un error que
produce una seal elctrica en el controlador, ya que la seal que
sale del controlador es elctrica y la vlvula que se va a a utilizar es
una vlvula de control accionada por aire a presin se requiere
cconvertir esta seal a neumtica, para ello se usa un transductor.
Una vez convertida la seal, sta llegar a la vlvula la cual se 2
Lazo de Control de
pH

2
 Lazo de pH:

SET
POINT
pH= 6
ERROR = SET POINT -
VALOR MEDIDO POR
EL pH-METRO

Error > 0 Error < 0

Error = 0 Seal a la
Seal a la vlvula
Condiciones vlvula para
para aumentar el
deseadas, No disminuir el
caudal de sulfato
se enva seal caudal de sulfato
de amonio
de amonio.
2
 BLANCES NECESARIOS PARA EL
PROCESO

Biomasa:
Sustrat
o:
Producto:

2
 RECORDANDO: Modelo de
Shahhosseini

: Velocidad mxima de crecimiento microbiano.

: Constante de Saturacin.
: Relacin
: Concentracin de sulfato de amonio en el bioreactor (g/L).
: Concentracin de fructosa en el bioreactor (g /L).
: Valor de cuando
: Constante adimensional.

2
 PARMETROS CINTICOS
Parmetro o constante Valor numrico
0,210

0,042

Fructosa 0.2363
Fructosa 0.634
0.634
Sulfato de Amonio 0.0264
0.0264
Sulfato de Amonio 5.64
5.64
0.01766
0.01766
1.532
1.532
2.772

n 2.772
20.857
n 0.2
20.857
0.2
0

Fructosa 0
6.5
Sulfato de Amonio
D para la Fructosa
1.23
6.5
0.365
2
 DESCRIPCIN DE LA
HERRAMIENTA COMPUTACIONAL
EMPLEADA
Simulink es un paquete de software para modelar,
simular y analizar sistemas dinmicos. Soporta
sistemas lineales y no lineales, modelados en
tiempo continuo, discontinuo, muestreados.
Proporciona un entorno grfico que facilita el
diseo y el anlisis de sistemas con una interfaz
que resuelve clculos matemticos.

2
2
2
 Linea Morada: Fructosa
Linea Azul: Amoniaco
Linea Amarilla: Biomasa
Residual
resultados Linea Roja: PHB
 CONCLUSIONES

A velocidades de D muy bajas, pequeos incrementos de la

velocidad de dilucin producen un cierto incremento de la
densidad del cultivo debido a que se aportan ms nutrientes
al medio y el microorganismo no ve limitada su tasa de
crecimiento ().

La velocidad de crecimiento aumenta ( aumenta y

disminuye) cuando la energa aportada por los nutrientes
entrantes supera la energa de mantenimiento de los
microorganismos del cultivo.

A valores bajos de D la concentracin de nutriente limitante

(S) en el efluente es baja porque es consumido casi
completamente por los microorganismos del cultivo que
alcanzan unas poblaciones de gran tamao creciendo a una
tasa () baja porque se encuentran en condiciones de
limitacin de nutrientes (S). 2
COSTOS BIORREACTOR

3
 El costo Modular para el Biorreactor fue calculado con el mnimo valor
de volumen permitido por el PECE, por tanto, para el volumen que se
requiere se realiz una aproximacin del costo de este equipo con el
Factor de escala.

Mediante el Mtodo de Factor de Escala, se estima el costo

modular del equipo para el Volumen que se requiere. Teniendo un
n=0.6, valor heurstico empleado para el mtodo.

El dlar est en un precio de

COP$= 3,058

3
 BIBLIOGRAFA
BIBLIOGRAFA

[1] SHULER, Michael. KARGI, Fikret. FED-BATCH

OPERATION Bioprocess Engineering Basic Concepts.
Second Edition. Editorial Prentice-Hall, Inc. 2002 Pgina
256-261.

[2] PRATAP R. patnaik, DISPERSION OPTIMIZATION TO

ENHANCE PHB PRODUCTION IN FED-BATCH CULTURES OF
RALSTONIA EUTROPHA Institute of Microbial Technology,
Bioresource Technology 97 (2006) 19942001

[3] LZARO, Ana. Tecnologa de los bioprocesos

Diseo de biorreactores y fermentadores pdf.