METODOS GENERALES DE ANALISIS DE

LOS ACIDOS NUCLEICOS

El anlisis es un aspecto fundamental en la
investigacin ya que solo a travs del
conocimiento de los detalles estructurales de
una molecula se puede conseguir establecer
relaciones entre como es y el cmo actua
 Niveles Analticos
Tecnicas de uso mas frecuente y objetivos de los distintos niveles analiticos

NIVEL
ANALITICO OBJETIVO TECNICAS
Fotometria
Deteccion Localizacion y seguimiento del compuesto UV/Fluorescencia
Analisis de Fotometria
pureza Grado de pureza y deteccion de contaminantes UV/Electroforesis
Rendimiento del proceso y estimaciones Fotometria
Cuantificacion cuantitativas UV/Electroforesis

Caracterizacion Determinacion de parametros estructurales Electroforesis/Otros

 Electrofotometria
Se basa en el comportamiento de las distintas estructuras y
grupos funcionales cuando interaccionan con radiaciones
electromagnticas.
 Electroforesis
La electroforesis es una tcnica de separacin enormemente
importante en el trabajo con biopolmeros y cidos nucleicos, se
basa en la migracin de macromolculas disueltas en un
determinado medio (gel), como resultado de la accin de un
campo elctrico.
En las cmaras de electroforesis vertical el corrimiento
de la muestra sigue la gravedad, ya que el polo positivo
se encuentra en la parte inferior de la cmara
En la electroforesis horizontal debe cuidarse que el
nodo se coloque hacia el extremo del gel donde
corren las muestras, de lo contrario las muestras se
saldrn del gel
 Electroforesis en gel de agarosa
La agarosa es un polisacrido de estructura
lineal, componente principal del agar, que se
obtiene de algas marinas. Es insoluble a
temperatura ambiente pero se disuelve bajo
temperatura entre 50 - 100C, cuando se
enfra forma un gel. En sus poros se desplazan
molculas de cidos nucleicos cuando se le
coloca un campo elctrico.
 Durante la electroforesis, los cidos nucleicos
lineales con un peso molecular alto migran al
nodo con ms lentitud que los de menor
peso molecular. Esto se debe a que los cidos
nucleicos de peso elevado tardan ms tiempo
en atravesar los poros de agarosa,