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UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTA

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

ESCUELA PROFESIONAL DE TECNOLOGA MDICA

INTRODUCCIN AL LABORATORIO CLNICO Y


ANATOMIA PATOLOGICA

Lic. T.M. Carlos Alfredo Snchez Rafael


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IMPORTANCIA Y TRASCENDENCIA DEL


TECNOLOGO MEDICO EN EL LABORATORIO DE
HEMATOLOGIA Y HEMOSTASIA
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Objetivos:

Conocer la organizacin de un Laboratorio de


Hematologa y Hemostasia.
Explicar y conocer la labor del Tecnlogo Mdico en un
Laboratorio de Hematologa y Hemostasia.

Conocer la
Responsabilidad del
Tecnlogo Mdico
en el Laboratorio de
Hematologa y
Hemostasia
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Hematologa

Hematologa proviene
de las palabras
griegas ("haima'')
que significa "sangre"
y ('' logos''), una
raz comnmente
empleada para
denotar un campo de
estudio.
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La Hematologa se ocupa del estudio de la sangre

La Hematologa comprende el estudio de la


etiologa, diagnstico, tratamiento, pronstico y
prevencin de enfermedades de la sangre.

El trabajo en el Laboratorio de Hematologa que


aborda el estudio de sangre es realizado por un
Tecnlogo Mdico.
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TIEMPO DE APLICACIN DEL


TRONIQUETE:
Se recomienda 1 a 2 minutos.

Tiempos prolongados pueden


producir hemoconcentracin.
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PACIENTES CON VAS:

Extraer en el brazo opuesto de la va.

Si se extrae con catter, eliminar 2 mL


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El Tecnlogo Mdico debe saber:


-Cmo se obtiene una muestra correcta?
-Cmo identificamos inequvocamente la muestra?
-Cmo logramos la trazabilidad de las muestras en todo el
proceso del laboratorio?
-Cules son los distintos tipos de muestras segn los analitos a
ensayar?
-Cul es el uso correcto de anticoagulantes?
-Cules son los volmenes correctos para cada caso?
-Qu recipientes se deben usar?
-Cules son los criterios para aceptar o rechazar una muestra?
-Cul es la bioseguridad en el manejo de las muestras?
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Identificacin del paciente:


- La identificacin de este procedimiento
debe ser con un 0% de error.
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ANTICOAGULANTES:
Tipo de tubo a utilizar en la toma de
muestras.
Interferencias con algunas determinaciones.
Relacin de anticoagulante/volumen.

Sangre entera con EDTA K3


Relacin: 1 gota cada 2.5 ml de sangre
Importante: en todos los casos
homogeneizar correctamente la muestra
para favorecer el contacto
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Identificacin del paciente:
- Informtico
- Escrito
CON EL FIN DE EVITAR ERRORES EN LA
TRANSCRIPCIN DEL NOMBRE DEL PACIENTE.
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INTERNACIONAL
CDIGO
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Stopper Mechanism of
Anticoagulant/additive Specimen type/use
color action
Red (glass) None Serum/chemistry and N/A
serology
Red Clot activator Serum/chemistry and Silica clot activator
(plastic/Hem serology
ogard)
Lavender K 3EDTA in liquid form Plasma/hematology Chelates (binds)
INTERNACIONAL

(glass) calcium
Pink Spray-dried K 2EDTA Plasma/blood bank Chelates (binds)
calcium
White EDTA and gel Plasma/molecular Chelates (binds)
CDIGO

diagnostics calcium
Light blue Sodium citrate Plasma/coagulation Chelates (binds)
calcium
Light Lithium heparin and gel Plasma/chemistry Inhibits thrombin
green/black formation
Green Sodium heparin, lithium Plasma/chemistry Inhibits thrombin
heparin formation
Royal blue Sodium heparin, Na2EDTA Plasma/chemistry/toxic Heparin inhibits
ology thrombin formation
Na2EDTA binds
calcium
Gray Sodium fluoride and lithium Plasma/glucose testing Inhibits glycolysis
iodoacetate
Yellow/gray Thrombin Serum/chemistry Clot activator
and orange
Red/gray Clot activator separation Serum/chemistry Silica clot activator
and gold gel

Continua
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Laboratorio de Hematologa
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Laboratorio de Hematologa
Un equipo automatizado nos
permite en conjunto con la
revisin al microscopio de los
extendidos sanguneos, realizar
el conteo de las clulas
sanguneas, mejor conocido
como Biometra Hemtica
completa de 27 parmetros,
(leucocitos y su conteo
diferencial, eritrocitos e ndices
eritrocitarios, plaquetas e ndices
plaquetarios), as como el
conteo de reticulocitos y
fraccin de maduracin.
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A pesar del enorme desarrollo tecnolgico que ha tenido


lugar en los laboratorios cientficos, el conteo visual con
hematocitmetro o cmara de Neubauer sigue siendo el
mtodo de conteo ms extendido desde el siglo XIX.
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Para el recuento de Leucocitos,


Hemates y plaquetas se utiliza la
Cmara de Neubauer
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Para el recuento de Leucocitos se


utiliza la Cmara de Neubauer
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Reticulocitos
Se evidencian sobre unos frotis
gracias a ciertos colorantes
supravitales como el azul de
metileno o azul de cresil brillante,
que permite observar los organoides
citoplasmticos que an llevan y
que han desaparecido en los
glbulos rojos adultos: es la
sustancia reticulofilamentosa.
La tcnica ha de realizarse a ser
posible antes de que transcurra 2
horas de la extraccin, con un
mximo de 24 horas.
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Las tinciones hematolgicas tipo


Romanowsky utilizan azul de metileno
y sus productos de oxidacin (azur A,
azur B y azur C) como colorantes
bsicos, combinndolos con la eosina
como colorante cido.
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Laboratorio de Hematologa

Un equipo automatizado nos permite en conjunto con la


revisin al microscopio de los extendidos sanguneos, realizar
el conteo de las clulas sanguneas, mejor conocido como
Biometra Hemtica completa de 27 parmetros, (leucocitos y
su conteo diferencial, eritrocitos e ndices eritrocitarios,
plaquetas e ndices plaquetarios), as como el conteo de
reticulocitos y fraccin de maduracin.
Para valorar la velocidad de sedimentacin globular existe en
el mercado un equipo automatizado que nos brinda un
resultado en un lapso de tiempo ms corto y evita los errores
analticos propios de la prueba cuando se realiza de forma
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H
e
m
a
t
o
p
o
y
e
s
i
s
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De este modo, obtenemos una


tincin diferencial, es decir, una
tincin que es capaz de
discriminar entre las distintas
estructuras celulares segn se
tian stas con el colorante
cido, con el bsico o con la
mezcla de ambos.

Segn la proporcin de azul de


metileno y de eosina que
compongan el colorante
tendremos distintos mtodos de
tincin. Entre ellos, los ms
conocidos son el mtodo de
Giemsa, el de Wright, el de
Leishman y el pan ptico de
Pappenheim.
Los eritrocitos se
tien de color rosa
asalmonado y las
plaquetas de color
violeta.

Los neutrfilos
presentan el
ncleo de color
azul violeta, el
citoplasma rosa y
la granulacin de
un color violeta
rojizo.
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Laboratorio de Hematologa
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Del Hemograma
Manual al
Hemograma de
Cuarta
Generacin
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Laboratorio de Hemostasia
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Hemostasia
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El sistema hemosttico,
Laboratorio de Hemostasia
como mecanismo de
defensa, trata de impedir la
prdida de sangre y detener
la hemorragia cuando se
produce una lesin. Para
que ello sea posible se
necesita una correcta
integridad del rbol vascular,
unas plaquetas normales
tanto en nmero como en
actividad funcional y un
adecuado funcionamiento
de los mecanismos de
coagulacin y fibrinlisis.
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Laboratorio de Hemostasia

Tiempo de sangrado
Evala la respuesta plaquetaria y vascular a la injuria, es decir la
habilidad para formar un tapn plaquetario efectivo. Si se realiza
en forma correcta, es la prueba de muestreo ms adecuado para
evaluar funcin plaquetaria. El mtodo de Ivy modificado es el
ms recomendado, mucho ms sensitivo y especfico que el
mtodo de Duke, pues este ltimo puede dar valores normales en
pacientes con trastornos moderados de funcin plaquetaria,
prolongacin del tiempo de sangrado ocurre en trastornos
cualitativos de las plaquetas, Trombocitopenia, Drogas, Uremia,
Enfermedad de von Willebrand, etc.
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Laboratorio de Hemostasia

Agregometra plaquetaria
En todo paciente con tiempo de sangra prolongado en el que se
sospecha un trastorno cualitativo de las plaquetas est indicado
realizar pruebas de agregacin plaquetaria. Este estudio se hace
utilizando un agregmetro, que es en realidad un fotmetro, en el
cual, plasma rico en plaquetas es centrifugado a temperatura
controlada y varios agentes agregantes en diferentes
concentraciones como: Epinefrina, ADP, colgeno, ristocetina, etc.
son aadidos.
La agregometra es tambin de gran utilidad para evaluar el
efecto de medicamentos antiagregantes como la aspirina y el
clopidogrel.
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Laboratorio de Hemostasia
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Laboratorio de Hemostasia
Pruebas para evaluar la
hemostasia secundaria
El TP y el TTP se utilizan
para medir todos los
factores plasmticos de
la coagulacin, con la
nica excepcin del FXIII.
A la hora del diagnstico
es adecuado dividir los
mecanismos de
coagulacin en vas
extrnseca, intrnseca y
comn, aunque existen
muchos datos recientes
que demuestran que
esta divisin es poco
realista.
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Laboratorio de Hemostasia

Pruebas para evaluar la


hemostasia secundaria

La va intrnseca incluye las


reacciones del factor tisular y el
FVII que llevan a la conversin
del FX en FXa. En la va
intrnseca intervienen los
factores VIII, IX, XI, XII,
precalicreina y ciningeno de
alto peso molecular. La va
comn incluye los factores V y
X, la protrombina, el
fibringeno y el FXIII.
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Laboratorio de Hemostasia

Pruebas para evaluar la


hemostasia secundaria

Una vez encontrada alteracin


en las pruebas primarias y en
conjunto con la informacin
clnica ser necesario realizar la
determinacin de uno o varios
de los factores de coagulacin
para establecer el diagnstico.
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Laboratorio de Hemostasia
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Laboratorio de Hemostasia
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Laboratorio de Hemostasia

Pruebas para evaluar el sistema fibrinoltico

Las condiciones asociadas a un mayor riesgo de


trombosis venosas y/o arteriales se conocen
como Trombofilias, en ste trmino se incluye un
grupo heterogneo de alteraciones, congnitas y
adquiridas, que no deben ser consideradas como
enfermedades sino como "factores de riesgo".
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Laboratorio de Hemostasia
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Laboratorio de Hemostasia

Entre las Trombofilias actualmente conocidas y factibles de ser


detectadas por anlisis de laboratorio se encuentran:
Mutaciones en genes especficos que originan un cambio en la
actividad enzimtica o en la cantidad de protena, tales como la
mutacin del Factor V de Leiden, del gen 20210 A de la
Protrombina, de la protena C, la S y la Antitrombina III.
Polimorfismos como el del inhibidor del activador del Plasmingeno
tipo 1 (PAI-1).
Anticuerpos contra las protenas de la coagulacin y otras
condiciones adquiridas como: Hiperhomocisteinemia y el sndrome
de anticuerpos antifosfolpidos.
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Laboratorio de Hemostasia

La frecuencia de estas condiciones es variable,


depende de la poblacin estudiada y de la
Trombofilia que se busca. En forma colectiva
estn presentes aproximadamente en el 15% de
la poblacin europea; siendo en los pases
occidentales la resistencia a la protena C
activada debida a la mutacin del Factor V, la
causa ms frecuente de trombosis.
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Citometra de Flujo
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Citometra de Flujo

La Citometra de Flujo (CMF) es una tcnica de anlisis celular


multiparamtrico cuyo fundamento se basa en hacer pasar una
suspensin de partculas (generalmente clulas) alineadas y de
una en una por delante de un haz de lser focalizado. El impacto
de cada clula con el rayo de luz produce seales que
corresponden a diferentes parmetros de la clula y que son
recogidos por distintos detectores. Estos convierten dichas
seales en seales electrnicas que posteriormente sern
digitalizadas para permitir la medida simultnea de varios
parmetros en una misma clula.
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Las ventajas que proporciona la CMF frente a otros mtodos que emplean
fluorocromos incluyen la objetividad, elevada sensibilidad, velocidad de anlisis
y posibilidad de realizar mediciones simultneas sobre una sola clula. Es por eso
que la Citometra de Flujo es una metodologa potente y verstil que nos permite
realizar distintos estudios como:
Inmunofenotipo de leucemias agudas y sndromes linfoproliferativos crnicos.
Cuantificacin de enfermedad mnima residual.
Contenido celular de ADN, (evaluacin del ciclo celular e identificacin de
ploidia).
Cuantificacin de clulas tronco.
Cuantificacin de subpoblaciones de linfocitos.
Anticuerpos anti-plaquetarios.
Pruebas cruzadas de histocompatibilidad.
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Control de Calidad
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carlosalfredosr@hotmail.com