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Actualizacin en Bacilos Gram-

positivos aerobios, no esporulados de


importancia clnica
Marisa N. Almuzara
Docente Facultad de Farmacia y
Bioqumica.UBA
Jefe de Unidad Bacteriologa. Hstal Eva Pern.
San Martn
Bacilos gram-positivos aerobios
Bacterias corineformes: Comprenden bacilos
gram-positivos irregulares aerobios, no
esporulados, no cido resistentes.
Adems de Corynebacterium, incluye muchos
otros gneros relacionados.
Bacilos gram-positivos regulares: Bacillus,
Listeria, Lactobacillus, Erysipelothrix, Kurthia
Bacilos gram-positivos aerobios
Actinomicetos aerobios: Dos grupos:
- AR ( Nocardia, Rhodococcus, Mycobacterium,
Gordonia, Tsukamurella)
- No AR
Incluye gneros anaerobios que contienen algunas
especies aerotolerantes: Clostridium tertium.
Bacilos gram positivos
Identificacin
Pruebas de 1 lnea

Gram
Catalasa
Metabolismo
Lipofilicidad
Pigmento
Hemlisis
Bacilos gram positivos aerobios
Catalasa
+ -

Corynebacterium y gneros Lactobacillus


relacionados Erysipelothrix
Propionibacterium spp Actinomyces *
Bacillus Arcanobacterium
Listeria* Gardnerella
Kurthia Actinobaculum
Actinomicetos aerobios P. propionicum
Bifidobacterium
* Existen excepciones
Clostridium spp
(especies aerotolerantes)
Corynebacterium especies
Lipoflicos
La determinacin del carcter lipoflico constituye un requisito
esencial para la caracterizacin de las especies de Corynebacterium
Se puede definir una corinebacteria como lipoflica cuando su
crecimiento es frecuentemente estimulado en medios que contienen
una cantidad significativa de lpidos (Tween 80 o suero 0.1 al 1%)
Las corinebacterias lipoflicas crecen en la mayora de los medios,
tales como agar sangre, pues stos contienen pequeas cantidades
de lpidos, pero las colonias son puntiformes y a veces se requiere
de 48-72 hs. para visualizarlas.
Algunas especies (C. accolens) o cepas de Corynebacterium
lipoflicos pueden mostrar satelitismo sobre el crecimiento de
Staphylococcus aureus
Microorganismos corineformes

No Lipoflicos-Fermentadores

No Lipoflicos-No Fermentadores

Lipoflicos
Corynebacterium spp
Caracteres culturales
Fcil desarrollo o no lipoflicos C. diphtheriae: (C. mitis, C. gravis, C. belfanti)
(colonia > 0.5 mm) C. afermentans ss afermentans
C. amycolatum
C. xerosis
C. pseudodiphtheriticum
C. minutissimum
C. striatum
C. glucuronolyticum
Lento desarrollo o lipoflicos Estimulan el crecimiento (suero conejo 0.1%; Tween 80 0,1-1%)
(colonia < 0.5 mm) C. jeikeium
C. urealyticum
C. afermentans ss lipophilum
C. accolens
C. CDC grupo G
C. CDC grupo F1
C. macginleyi
C. diphtheriae ss intermedius
Corynebacterium spp , gneros relacionados y otros
PIGMENTO

+
Amarillo Oerskovia Aureobacterium
Exiguobacterium Nocardia
Microbacterium
Cellulomonas
L.aquaticum

Anaranjado-rojo Microbacterium Brevibacterium


Nocardia A. odontolyticus (rojo)

Rosa-salmn Rhodococcus equi

Tostado C. minutissimum
C. striatum
C. xerosis
C. pseudodiphtheriticum

Negro Corynebacterium
nigricans
Pruebas fisiolgicas y bioqumicas tiles para la
caracterizacin de bacilos gram-positivos aerobios
Catalasa
Lipofilicidad - slo si las colonias miden < 0.5 mm de dimetro
- AS con Tween 0.1-1%
- TSI con Tween 0.1-1%
- (catalasa para las corynebacterias lipoflicas)
Oxidacin-Fermentacin - TSI
- OF
- CTA
CAMP (S. aureus ATCC 25923) - Estimulacin
- Inhibicin
Utilizacin de H. De Carbono - Andrade (metabolismo fermentativo)
- CTA
- Caldo rojo-fenol
- Pastillas
Ureasa-gelatinasa-DNAsa-FAL-PYZ-PYR-Esculina-LDC-ODC-Nitratos-
Movilidad: mtodos convencionales
Metodologa empleda en la identificcin de
microorganismos coreniformes
Caracterizacin fenotpica
1) Mtodos convencionales
2) Mtodos rpidos
- API (RAPID) Coryne Freney y col. (98% concordancia)
- Biolog System Lindenmann (60% concordancia)
- Sustratos fluorognicos Kampfer
Investigacin quimiotaxonmica
(Reservados para laboratorios de referencia)
- Anlisis de la pared celular
- Anlisis de cidos grasos celulares (CFA)
Sherlock system (MIDI)
- Cromatografa lquida alta performance (HPLC)
(c. miclico)
Tcnicas moleculares
- 16 S DNA ribosomal
- PCR
Correlacin entre el mtodo de identificacin
API-CORYNE y el convencional
Identificacin correcta Identificacin correcta con pruebas adicionales Identificacin incorrectaa
A. haemolyticum 6 4 2
Arthrobacter spp 11 2 2 7
Aureobacterium spp 4 1 3
Brevibacterium spp 3 2 1
C. afermentans 10 1 7 2
C. amycolatum 14 4 10
Corynebcterium CDC grupo F 2 2
C. jeikeium 4 2 2
C. propinquum 2 2
C. striatum 7 7
C. urealyticum 16 16
C. xerosis 8 8
C. macginlenyi 3 2 1
C. pseudodiphtheriticum 12 8 3 1
Dermabacter hominis 12 12
Leifsonia aquatica 3 2 1
Listeria monocytogenes 2 1 1
Microbacterium spp 8 5 2 1
Propionibacterium acnes 1 1
Rhodococcus equi 9 2 7
Rhodococcus spp 6 1 3 2
Total 143 83 (58%) 44 (31%) 16 (11%)
Corynebacterium spp
Patgenos oportunistas Patgenos en animales
C. pseudodiphtheriticum C. renale
C. urealyticum (D2) C. bovis
C. jeikeium (JK) A. pyogenes
R. equi R. equi
C. striatum C. kutscheri
C. amycolatum C. cystitidis

Infectan individuos no comprometidos


(patgenos primarios)
C. diphtheriae
C. ulcerans
C. pseudotuberculosis
A. haemolyticum
C. minutissimum
Especies de Corynebacterium y
Gneros relacionados cuyo
habitat natural es el hombre
C. diphtheriae Nasofaringe - piel
C. striatum Piel
C. pseudodiphtheriticum Nasofaringe - piel
C. jeikeium Piel
C. minutissimum Piel
C. matruchotii Cavidad oral humana y primates
C. urealyticum (D2) Piel
C. afermentans Piel
C. amycolatum Piel
C. xerosis nasofaringe, piel y conjuntiva?
Dermabacter hominis Piel
Arcanobacterium haemolyticum Piel nasofaringe?
Especies de Corynebacterium y Gneros
relacionados cuyo habitat natural
es diferente al hombre
C. ulcerans Vaca (mastitis), caballo
C. pseudotuberculosis Cabra, oveja, caballo
C. kutscheri Roedores
C. Grupo renale (C. renale - Vacas (infecciones genitourinarias)
C. pilosum - C. cystitidis)
C. bovis Vaca (ubre)
C. aquaticum Agua natural y destilada
Rhodococcus equi Suelo con estircol - neumona
necrotizante en potros
Aureobacterium spp Suelo- ambiente
A. pyogenes Vacas - ovejas (infecciones
cutneas pigenas)
Oerskovia spp Suelo, materia de descomposicin
de las plantas, geles de hidrxido de Al
Artrhobacter spp Suelo - ambiente
Infecciones por Corynebacterium
y organismos relacionados

Inmunosupresin y neutropenia
Cateterismo
Interrupcin de las barreras muco-cutneas
Hemodilisis
IRC
DPAC
Tratamiento antibitico (cepas multirresistentes)
Otras maniobras invasivas
Prtesis cardacas, osteoarticular, shunt V-P
Corynebacterium spp con

metabolismo fermentativo

no lipoflicos
Especies del gnero Corynebacterium
con metabolismo fermentativo, no lipoflicos

C. striatum
gravis C. coyleae
C. diphtheriae ss mitis C. amycolatum
belfanti
C. sundvallense
C. CN-1 (pigmento negro) C. thomssenii
C. ulcerans
C. singulare
C. pseudotuberculosis
C. confusum
C. falsenii
C. argentoratense
C. imitans
C. glucuronolyticum C. minutissimum
C. matruchotii C. xerosis
C. durum C. simulans
Corynebacterium amycolatum

Habitat: piel

Escasos reportes de infeccin en la literatura. Especie de Corynebacterium


no lipoflico ms frecuentemente
Infeccin de herida post quirrgica esternal.
aislada en clnica
Riche et al. 1989. Presse Med
18: 1033-1034
Colonia seca, blanco-griscea,
Vanbosterhout et al. 1992. Eur J. Clin Microbiol Infect. Dis.
cerosa
11: 628-631: 3 casos de infecciones oportunistas
O129 R
1) Hemocultivo de paciente oncohematolgico
Multiresistente (solo S a
2) Hemocultivo + fstula de pseudoaneurisma
glucopptidos y tetraciclina)
3) Lquido peritoneal de paciente con peritonitis (DPCA)
Corynebacterium xerosis

Mayora de los reportes en la literatura


Habitat: piel, nasofaringe
fueron C. striatum o C. amycolatum saco conjuntival

Colonia amarillenta,
Escasos reportes de infecciones en la literatura seca, granular
- Infeccin de shunt V-P en un infante. Pediatr Infect Dis 1993. O129 S
12: 536-538
Tirosina -
- Artritis sptica post ciruga vascular. Rev. Infect. Dis. 1991.
Multisensible
13: 548-549.
- Osteomielitis vertebral 1989. J. Clin. Microbiol. 27: 2869-2870
- 4 casos de endocartidis asociadas a: drogadiccin
Neumona y pericarditis
Cirrosis alcohlica
- Infeccin de pseudoquiste pancretico en paciente alcohlico.
Wood. 1993. CID 17: 934-935
- PBE en paciente alcohlico. Vettese et al. 1993. CID 17:815
Corynebacterium striatum

S// peni, cefalosp., Imi, glicopptidos Habitat: piel y narinas


R// macrlidos, clinda, tetra, rifa, cipro Transmisin nosocomial
V// genta

Colonia lisa y

Endocarditis de vlvula nativa y protsica cremosa ~ SCN


TyR +
Bacteriemia en pacientes inmunocomprometidos
O129 S
(SIDA, neutropenia)
CAMP V
Infecciones del tracto respiratorio

Aislado de catter venoso central, lquido peritoneal,


heridas, orina, conjuntiva, tero y placenta (RPM)
Corynebacterium minutissimum

ATB:
Habitat: piel
Variable: lactmicos, macrlidos,
clinda, genta, rifa, cipro
Sensible: glucopptidos
Resistente: tetraciclina Colonia lisa, hmeda

Eritrasma (discutido, proceso polimicrobiano) y brillante

Escasos reportes de otras infecciones: O129 S

1 caso de peritonitis en DPCA Dnasa + La mayora de


1 caso de septicemia fatal en un paciente con leucemia las cepas
TyR +
mieloide
CAMP -
3 casos de bacteriemia

1 caso de endocarditis en un paciente con prolapso

de vlvula mitral
1 caso de absceso de mama en una mujer de 42 aos
Caractersticas diferenciales de C. striatum,
C. xerosis, C. amycolatum y C. minutissimum

C. striatum C. xerosis C. amycolatum C. minutissimum

Cremosa Seca y Seca, blanco- Cremosa

Colonia ( SCN) amarillenta griscea, cerosa

O129 S S R S

TyR + - - +

Dnasa - - - +

CAMP V - - -

Maltosa - + V V

ATB Variable Multi S// Multi R// Variable

a glucosidasa - + - -

NO3 + V V -
Corynebacterium glucuronolyticum
(C. seminale)

ATB: Habitat: flora del tracto


S// bL, rifa, genta, glucopptidos genitourinario masculino
R// quinolonas, tetra y mino (a Presencia en mujer: incierta

menudo), macrlidos, clinda


Colonias blanco-amarillentas
(siempre)
lisas y convexas
bGUR +
Infecciones genito-urinarias en hombres: CAMP +
Prostatitis y uretritis Urea +/- (rpida 5 minutos)
Esc V
Lap + ( C. renale IGU
en animales)
Corynebacterium del grupo diphtheriae

C. diphtheriae C. ulcerans C. pseudotuberculosis


Urea - Urea + Urea +
CAMP - CAMP inversa + CAMP inversa +
Glucgeno + Glucgeno -

Pyrazinamidasa -
Pueden albergar el gen de la toxina diftrica
Corynebacterium del grupo diphtheriae

C. diphtheriae

Infeccin localizada
Cepas toxignicas difteria (TRS)

Efectos sistmicos por la


toxina (corazn, SNC,
riones)

Cepas no toxignicas sepsis, artritis sptica,


osteomielitis, absceso cerebral,
endoftalmitis crnica, endocarditis
Corynebacterium del grupo diphtheriae

C. ulcerans
Mastitis en ganado
Faringitis ( difteria) con compromiso cardaco o del SNC en
personas expuestas a ganado o a sus productos (ingestin
de leche cruda). Cepas no toxigenicas: granulomas
necrticos y ndulos pulmonares en pac inmunocompetentes
C. pseudotuberculosis

Infecciones en ganado: linfadenitis supurativa, abscesos y


neumona
Infecciones en humanos son infrecuentes linfadenitis
granulomatosa supurativa post contacto con animales y su
piel o sus productos (lecha cruda)
Bacilos gram positivos con
metabolismo fermentativo
Gneros y especies relacionados
P a
Oerskovia spp i m
g a
Actinomyces spp Microbacterium spp m r
Dermabacter hominis Cellulomonas spp e i
n l
Propionibacterium spp Exiguobacterium t l
acetylicum o o
Rothia dentocariosa
Arcanobacterium spp Otros Gneros
Gardnerella vaginalis Listeria spp
Lactobacillus spp
Erysipelothrix rhusiopathiae
Bacillus spp
Dermabacter hominis
Pruebas claves
BGP cocoide
Olor espermtico
Metabolismo fermentativo
Esculina (+)
LDC (+) ODC (+)
PyR (+)
FAL (+)
Nitrato (-)
Dermabacter hominis
Diferenciacin con otros bacilos gram positivos, catalasa (+),
metabolismo fermentativo, esculina (+)
Colonia (Gram/tipo) PyR Nitrato CAMP Lactosa Otros
Rothia BGP filam/rug, adh + + - - Manitol
dentocariosa PIZ +
FAL
Cto. Aerob>anaerob
C. matruchotii BGP filam/rug, adh - + - + Hipurato +

C. durum BGP filam/rug, adh - + - - Manitol +


Aglu -

P. avidum BGP dift/lisa - - + - B hemlisis


FAL -
Cto. Anaerob>aerob
A. viscosus BGP dift/lisa - + - + Cto. Anaerob>aerob
Hipurato -

D. hominis Cb +/lisa + - - + Olor espermtico


LDC y ODC +
FAL + PIZ -
Rothia dentocariosa

Habitat: orofaringe humana y animales


Patologa:
Caries dental
Endocarditis
Enfermedad periodontal
Abscesos (maxilar, cerebral, pilonidal, dental)
Neumona en pacientes inmunocomprometidos
Rothia dentocariosa
Pruebas claves
Metabolismo fermentativo
BGP con ramificaciones rudimentarias
No micelio areo
Kinyoun y Ziehl-Neelsen (-)
Esculina (+)
Nitrato (+)
PyR (+)
Rothia dentocariosa
Diferenciacin con otros bacilos gram positivos, catalasa (+),
metabolismo fermentativo, esculina (+)
Colonia (Gram/tipo) PyR Nitrato CAMP Lactosa Otros
Rothia BGP filam/rug, adh + + - - Manitol
dentocariosa PIZ +
FAL
Cto. Aerob>anaerob
C. matruchotii BGP filam/rug, adh - + - + Hipurato +

C. durum BGP filam/rug, adh - + - - Manitol +


Aglu -

P. avidum BGP dift/lisa - - + - B hemlisis


FAL -
Cto. Anaerob>aerob
A. viscosus BGP dift/lisa - + - + Cto. Anaerob>aerob
Hipurato -

D. hominis Cb +/lisa + - - + Olor espermtico


LDC y ODC +
FAL + PIZ -
Rothia dentocariosa
Sensibilidad antibitica

Sensible Variable
Penicilina (ATB de eleccin) Aminoglucsidos
Ampicilina Quinolonas
AMS Clindamicina
Cefalosporinas 3 TMS
Imipenem
Rifampicina
Eritromicina
Cloranfenicol
Vancomicina
CASO CLNICO
Almuzara M, Mariansky A, Valenzuela A, Vay C. Enf Infecc Microbiol Clin, 2004.

Paciente de sexo femenino, 22 aos.

Ingres por fiebre las ltimas 48 hs., astenia y deterioro del sensorio.

Present prpura en tronco y extremidades y rigidez de nuca.

Tx cerebral: hemorragia subaracnoidea e hipodensidades

compatibles con embolia (confirmado con RM).

Se tomaron 2 hemocultivos (Bactec) y LCR.

Dx presuntivo: meningitis meningocccica.

Tratamiento: Ceftriaxona 4 g/da IV.


RESULTADOS DEL LCR

Gram: no bacterias.

Tinta China: negativa.

Antgenos: neumococo, meningococo, HIb,

Cryptococcus neoformans, negativos.

Cultivo: negativo.
OTROS ESTUDIOS DIAGNSTICOS

Electrocardiograma transesofgico: prolapso de

vlvula mitral - vegetaciones de gran tamao en

valva anterior mitral sin absceso anular.

Ecodoppler: insuficiencia mitral.

Diagnstico: endocarditis de vlvula nativa.


RESULTADOS

Agar sangre atmsfera 5% CO2 24 hs.: desarrollo de

ptina visible. Colonias definidas a las 48 hs.

blanquecinas.

Beta hemlisis: negativa.

Catalasa: positiva.

TSI: cido.

Lipofilicidad: negativa.
Propionibacterium spp

ATB:
Habitat: piel humana,
R// metronidazol, aminoglucsidos intestino, boca,
S// vancomicina, beta lactamicos conjuntiva

Factores predisponentes:
BGP no esporulados Presencia de cuerpo extrao

Anaerobios facultativos con aerotolerancia variable Inmunosupresin

Clulas con forma bfida o ramificada (no Ciruga previa

Trauma
filamentos), dispuestas en forma nica, pares,
Diabetes
cadenas, con disposicin de letras chinas (V, Y)
Obstruccin de senos o
No mviles
conductos
Metabolismo fermentativo

Usualmente catalasa + (P. propionicum es catalasa -)


Propionibacterium spp

Infecciones:

Endocarditis de vlvula protsica

Endoftalmitis postquirrgica o postraumtica

Infecciones del SNC: asociadas a shunts o postneuroquirrgicas (meningitis,

abscesos de cerebro, empiema epidural o subdural)

Infecciones osteoarticulares: artritis protsica o post inyeccin de esteroides

y osteomielitis posquirrgica

P. propionicum: canaliculitis y dacriocistitis (mujeres ancianas), abscesos y

neumona
Propionibacterium avidum
Pruebas claves
BGP con ramificaciones rudimentarias
(medio lquido)
Metabolismo fermentativo
B hemoltico
Esculina (+)
CAMP (+)
Nitrato (-)
PyR (-)
Movilidad (-)
Propionibacterium avidum
Diferenciacin con otros bacilos gram positivos, b hemolticos
de importancia clnica

Catalasa Motilidad CAMP

Propionibacterium avidum + - +

Arcanobacterium haemolyticum - - Inversa

Listeria monocytogenes + + +
Propionibacterium spp
Diferenciacin de especies

P. avidum P. granulosum P. acnes P. propionicum

Cto. ptimo Ana + Aero Ana Ana Ana

Nitrato - - + +

Esculina + - - -

Indol - - + -

Catalasa + + + -
Propionibacterium avidum
Sensibilidad antibitica

Sensible Variable
Penicilina Aminoglucsidos
Imipenem
Cefalosporinas Resistente
Cloranfenicol Metronidazol
Eritromicina
Clindamicina
Tetraciclinas
Hbitat
Listeria
Vegetales, animales (40 sp mamferos, 17 sp aves), suelo, fertilizantes, agua,
crustceos, moscas, garrapatas ubicuo en la naturaleza

Animales colonizados eliminan L. m por heces

abono

hombre vegetales

Contaminacin de alimentos
- Productos crudos de orgen animal (carnes rojas, pescados) frescos o frizados
- Productos lcteos crudos (leche pasteurizada y no pasteurizada, quesos, helados)
- Frutas y vegetales crudos
Listeria monocytogenes
Patogenia
Animales: meningoencefalitis
abortos spticos (repeticin)
Humanos: Neonatos:
Listeriosis de aparicin temprana (dte. 1a. semana de vida)
prematurez, bajo peso al nacer:
- transmisin transplacentaria por sepsis materna
Meningoencefalitis - transmisin ascendente por colonizacin vaginal
y sepsis Listeriosis de aparicin tarda (> 1a. semana de vida)
nios nacidos sanos transmisin a travs del canal de
parto contaminado
Adultos inmunocomprometidos:
Ancianos, neoplasias oncohematolgicas, neoplasias slidas,
HIV, SIDA, Tx, cirrosis, DBT, DPAC, terapia con corticoides

Abortos a repeticin Mujer embarazada

frecuencia Infecciones cutneas y oculares (veterinarios), endocarditis,


osteomielitis, infecciones pleuropulmonares, peritonitis, etc.
15% pac. no IC,
no embarazadas
Listeria monocytogenes ()
Diferenciacin con otros gneros hemolticos

Catalasa

Enterococcus EGB Oerskovia Catalasa +


faecalis Catalasa - Cellulomonas Pigmento +
Catalasa - BE - Microbacterium CAMP -
PyR + Motil -
Motilidad -
C. ulcerans Propionibacterium avidum
C.pseudotuberculosis (b)
Catalasa + Catalasa +
CAMP Inv. + Esc. +
Esculina - CAMP +
Motilidad - Motilidad -
Identificacin de
Listeria monocytogenes

E. faecalis L. monocytogenes
Catalasa - +
Bilis Esculina + +
ClNa 6,5% + +
Movilidad - +
CAMP - +
(cabeza de fsforo)
PERFIL DE SENSIBILIDAD
Activas: penicilina *, ampicilina *, gentamicina,
imipenem *, TMS, rifampicina, tetraciclina

Intermedias: cefalotina, ciprofloxacina,


clindamicina

No Activas: cefotaxima, ceftazidima, nalidxico,


fosfomicina
* Tolerancia
Bacilos gram positivos con
metabolismo oxidativo
Gnero Corynebacterium Gneros y especies
(especies no lipoflicas) relacionados
Turicella otitidis
C. afermentans ss
afermentans Brevibacterium spp
C. auris Arthrobacter spp
C. propinquum Aureobacterium spp Pigmento
C. pseudodiphtheriticum C. aquaticum amarillo

C. mucifaciens Otros Gneros


C. riegelii Actinomicetos aerobios (con excepcin
del Gnero Dermatophilus)
Bacillus spp
Kurthia spp
Corynebacterium spp con

metabolismo oxidativo no

lipoflicos
Corynebacterium pseudodiphtheriticum

ATB:
S// bL, AG, quinolonas, rifa, tetra Habitat: piel, orofaringe
V// macrlidos, lincosamidas
Colonias blanquecinas,
Infecciones respiratorias: bronquitis, traqueobronquitis ligeramente secas, de
y neumona en pacientes: bordes enteros
- Inmunocomprometidos
TSI s/c
- Enf. Pulmonar preexistente (EPOC)
- Intubacin endotraqueal NO3 +
- Enfermedades de base: falla cardaca congestiva, DBT, neoplasia Urea + (rpida)
1991. Colt y Morris: Rev Infect Dis: 61 casos Asacaroltico
Endocarditis:
1991 Morris y col: Rev Infect Dis: 18 casos;
50% asociada a vlvula protsica.
Otras: poco frecuentes
ITU (discutido), osteomielitis vertebral, infeccin heridas
(colonizante secundario)
C. afermentans ss afermentans

Aislado de hemocultivos
Habitat: piel

Colonias blanquecinas,
Diferenciar de C. auris y T. otitidis: cremosas, de bordes
C. auris: regulares
- Colonias ligeremente secas y adherentes
CAMP V (60%)
- Aislado de odo
Asacaroltico
- R// a ATB b lactmicos
Generalmente S// a ATB
- Dnasa -, CAMP +
T. otititis: beta lactmicos
- Aislado de odo medio Dnasa -
- Colonias cremosas ( C. afermentans) pero en el Gram:
BGP largos irregulares ramificarse ( C. afermentans)
- Dnasa +, CAMP +
Gneros relacionados con Corynebacterium
con metabolismo oxidativo
Arthrobacter Brevibacterium
Catalasa + +
Metabolismo O O
Ciclo coco-bacilar s s
Motilidad V -
Colonias grandes, blanco-grisceas grandes, blanco-grisceas
y cremosas o amarillo-verdosas,
cremosas ECN
Olor no queso - transpiracin
Urea V -
Esculina V -
Dnasa/gelatina + +
Hbitat piel humana, suelo alimentos (leche rancia-queso)
piel humana mucosas y
adyacentes (B. epidermidis y B. casei)
CIM penicilina baja elevada
Tipo de infeccin vaginitis, endoftalmitis, osteomielitis, peritonitis (DPCA),
ITU, bacteriemia en HIV+ septicemia, bacteriemia en hemolizados,
meningitis, colonizacin de shunt
Otras Tirosina +; ClNa 6.5% +
Actinomicetos aerobios
BGP
Filamentosos y con ramificaciones
Pueden presentar cido resistencia parcial (gneros Nocardia,
Rhodococcus, Gordona, Tsukamurella y Mycobacterium)
Pueden presentar micelio areo (gneros Nocardia, Streptomyces,
Actinomadura, Amycolata, Amycolaptosis, Nocardiopsis,
Saccharomonospora, Saccharopolyspora y Thermoactinomyces)
Hbitat: ubicuos en el ambiente, ampliamente distribudos en el suelo, agua
fresca, agua marina y participan de la descomposicin de la materia
orgnica vegetal
Patgeno oportunista en humanos y animales
Gnero Nocardia
BGP aerobios filamentosos y ramificados
Parcial AR (Kinyoun +)
Micelio areo +
Catalasa +
Metabolismo oxidativo
Lisozima resistente
Lento desarrollo (48 - 72 hs crecimiento visible), colonias secas
(yeso) de color blanco, amarillo anaranjado)
Gnero Nocardia
Infecciones en el husped inmunocompetente: colonizacin piel y TRS, I.

ocular (exgena), I. cutnea (micetoma, linfocutnea o superficial)

Infecciones en el husped inmunocomprometido: infecc. ocular, inf.

pulmonar invasiva e infeccin diseminada (cerebro, rin, hgado, bazo y

menos frecuentemente piel, hueso, articulacin, ojo)

Factores de riesgo: Tx renal, Tx cardaco, Tx heptico, Tx MO, HIV,

granulocitopenia, neoplasia, terapia inmunosupresora

Terapia antibitica: TMS (de eleccin) y amika, imipenem, cefalosporinas

3ra., quinolonas, eritro, clinda, tetra y minociclina (drogas alternativas)


Gnero Rhodococcus
Estrechamente relacionado con los gneros
Nocardia, Mycobacterium y Corynebacterium

Integrado por 12 especies

R. equi (hombre)

Catalasa +

Presenta ciclo coco-bacilar

Parcial AR (Kinyoun +)

Metabolismo oxidativo

Hbitat: saprfito del suelo


Rhodococcus equi
Hbitat: animales (caballos, vacas, cerdos)
(neumona necrotizante en potros)
Suelo con estircol

Caractersticas culturales y bioqumicas:


Buen desarrollo en medios habituales: AN - AS
Desarrollo 24 - 48 hs
Colonias medianas mucoides con pigmento rosa salmn
Casena, xantina, e hipoxantina -; tirosina v
Glucosa + (por metabolismo (O), 14 das)
CAMP + (S. aureus ATCC 25923)
Rhodococcus equi
Patgeno oportunista (Tx renal, HIV, neoplasias slidas o enf.
oncohematolgicas, alcoholismo, terapia inmunosupresora (corticoides o
quimioterapia)
Fiebre y sntomas respiratorios en > 75% de los casos neumona cavitada,
abscedificada de larga evolucin TBC like
Otras infecciones endoftalmitis y abscesos subcutneos postraumticos
(tambin en pacientes inmunocompetentes), bacteriemia asociada a catter
(NPT o catter venoso central), artritis sptica, peritonitis en DPCA, infeccin
pulmonar diseminada (cerebro, hgado, bazo, piel)
Las infecciones estn asociadas con la exposicin a animales (caballos) o
suelo contaminado
Patgeno intracelular difcil de erradicar
Antibiticos ms activos: eritro y rifa
Tratamiento antibitico prolongado (2 a 6 meses) + reseccin quirrgica
Rhodococcus equi
Sensibilidad antibitica
Sensible Variable


AMC / AMS Ampicilina
Imipenem Cefalotina
Aminoglucsidos Penicilina > 50% R
TMS Oxacilina
Vancomicina Clindamicina
Eritromicina (3%) Quinolonas (16-18 % R//)
Rifampicina (4%)
Tetracilina (4%)
Droga de Eleccin: Eritro o Rifa
Tratamientos prolongados: 2 a 6 meses
Micobacterias de
rpido crecimiento
TSI sin cambio

Kinyoun y Ziehl-Neelsen: positivos

Micelio areo: negativo

Lisozima resistente

Aril sulfatasa (3 das): positiva

M. Fortuitum: Nitrato (+), quinolonas S, fox S

M. Chelonae: Nitrato (-), quinolonas R, fox R


Micobacterias de
rpido crecimiento
Patgenos oportunistas
Infecciones de heridas post traumticas y postquirrgicas
Infecciones asociadas a catteres
Infecciones pulmonares crnicas
Osteomielitis post fractura expuesta
Pseudobrotes ( contaminacin d los canales de succin de
los fibrobroncoscopios)
Bacilos gram positivos
Kinyoun positivo
Pigmento rosado-salmn
+ Rhodococcus equi
CAMP +

Micelio areo
+ -
Nocardia spp Arilsulfatasa
(Lisozima R) 3 das

+ -
Mycobacterium Arilsulfatasa
fortuitum - chelonae 14 das
+
(Lisozima R)
Mycobacterium spp
-
(rpido crecimiento)
Hipoxantina
-
Gelatina +
Tsukamurella spp
+ -
Rhodococcus spp NO3 / ONPG
(Lisozima V)
+ / - - /+
Gordona spp Tsukamurella spp
(Lisozima S) (Lisozima R)
Especies de Corynebacterium lipoflicas

1) Con Metabolismo Oxidativo 2) Con Metabolismo Fermentativo

C. urealyticum C. kroppenstedtii

C. jeikeium Corynebacterium grupo F1

C. afermentans ss lipophilum Corynebacterium grupo G

C. lipophiloflavum C. macginlenyi

C. accolens

C. diphtheriae ss intermedius
C. jeikeium

Multiresistente Habitat: piel del paciente


internado (regin inguinal,
- S// glicopptidos,
rectal, axilar, urogenital)
pristinamicina
- V// Ery - Tetra - Rifa -
Quinolonas Ambiente inanimado
hospitalario.
- Glucosa +
- NO3 / Urea -

Endocarditis de vlvula nativa o Factores predisponentes:


protsica - Inmunocompromiso: neoplasias,
Meningitis asociada a shunt neutropenia, SIDA
Infecciones osteoarticulares - Cateterismo y maniobras invasivas
post-quirrgicas - Hospitalizacin prolongada
Sepsis en pacientes - Terapia con ATB de amplio espectro
oncohematolgicos - Interrupcin barrera cutnea (DPCA)
Peritonitis (DPCA) - Dispositivos protsicos
C. urealyticum

Ureasa positiva rpida


Habitat: piel

Lipoflico multiresistente

Asacaroltico
Enfermedad infecciosa
Factores predisponentes: ITU cistitis incrustada alcalina
Inmunocompromiso infeccin urinaria sin litiasis
Manipulacin urolgica pielonefritis pieloureteritis
Anomalas del TU Infecciones localizadas en otros sitios,
Tx renal muy poco frecuentes: bacteriemia,
Hospitalizacin prolongada endocarditis, osteomielitis, infeccin
Tto. ATB previo de Heridas y TCS
IU recurrente
Bacilos gram positivos aerobios

Catalasa -

No b hemolticos b hemolticos

Propionibacterium propionicum L. monocytogenes (CAMP +)


A. schaalii A. haemolyticum (CAMP inv. +)
Actinomyces spp Gardnerella vaginalis
Lactobacillus spp A. pyogenes
Erysipelothrix rhusiophatiae A. turicensis
Rothia dentocariosa
Gneros Actinomyces, Arcanobacterium y
Actinobaculum spp
BGP rectos o ligeramente curvos y filamentos delgados con ramificaciones
verdaderas; con frecuencia pueden disponerse en forma difteroidal (Y, V, T,
empalizada) en el mismo preparado.
La proporcin de formas difteroides y filamentosas vara de acuerdo a la
especie
No cido resistentes
No esporulados
No mviles
Anaerobios facultativos (mayora de las especies crecen en atmsfera
enriquecida en CO2 salvo A. bovis, A. meyeri, A. israelii y A. gerencseriae)
Gneros Actinomyces, Arcanobacterium y
Actinobaculum spp
Metabolismo fermentativo

Catalasa negativa (con excepcin de A. neuii, A. viscosus y A. naeslundii)

Las colonias maduras pueden variar desde rugosas y secas a lisas o


mucosas con una variacin en el dimetro de 0.5 a 5 mm., de color blanco
a blanco-grisceo o blanco crema. Algunas especies pueden presentar a o
b hemlisis

Hbitat: intestino y membranas mucosas y flora normal de la cavidad oral


humana y de animales

ATB: sensibles a ATB b lactmicos. Resistentes a metronidazol


Actinomyces, Arcanobacterium y Actinobaculum spp
Presentaciones clnicas de las infecciones

Actinomicosis clsica: A. israelii, A. meyeri, A. naeslundii, A. odontolyticus

y A. viscosus. La localizacin ms frecuente es la cervico-facial, luego la

abdominal, torcica y otras. Se caracteriza por lesiones granulomatosas

crnicas que llegan a ser supurativas con formacin de abscesos y senos

de drenaje, con descarga de grnulos de azufre macroscpicos de color

blanco, amarillo o marrn.

Abscesos de diversa localizacin

Enfermedad periodontal y caries dental

Raras: infecciones del SNC, endocarditis y hepatitis


Actinomyces, Arcanobacterium y Actinobaculum spp
Presentaciones clnicas de las infecciones

A. europaeus: abscesos, lceras, TCS, ITU


A. graevenitzii: especmenes respiratorios
A. radingae: abscesos, lquido articular, onfalitis
A. turicensis: abscesos, sangre, vagina, heridas, colecistitis, apendicitis, otitis
media, ITU, etc
A. bernardiae: abscesos, sangre, odo, lceras de pie, secreciones oculares,
artritis sptica
A. pyogenes: abscesos, sepsis, lceras, apendicitis, cistitis
A. schaalii: sangre, orina
A. haemolyticum: faringitis en adolescentes, abscesos, infecciones del SNC,
osteomielitis, endocarditis
Actinomyces spp
S. Palombarani y col. Hstal de Clnicas. UBA. 2004.
Identificacin de 45 aislamientos:
Morfologa
Caractersticas culturales
Catalasa: Resultado Negativo: TSI
Vancomicina
SPS
MRS
Resultado Positivo: Metabolismo
Lipofilicidad
CAMP
- Glucosidasa
Urea - Hipurato
Reduc. Nitrato
Manitol, Lactosa
Actinomyces spp
S. Palombarani y col. Hstal de Clnicas. UBA. 2004.
Identificacin de especies catalasa negativa, - hemolticas

-CAMP (-)
A. bernardiae (1) -ONPG (-)
-PYZ (+)
-XILOSA (-)

-CAMP (-)
A. radingae (2) -ONPG (+)
-PYZ (+)
-XILOSA (+)

-CAMP (-)
-ONPG (-)
A. turicensis (1) -PYZ (-)
-XILOSA (+)
Actinomyces spp
S. Palombarani y col. Hstal de Clnicas. UBA. 2004
Identificacin de especies catalasa negativa, no - hemolticas

A europaeus (7) Esculina


A. radingae (5) Pigmento
NO3
A. odontolyticus (6)
ONPG
A. israelii (5) Urea
A. turicensis (3) a - Glucosidasa
a -Fucosidasa
A. bernardiae (2)
- NAG
A. graevenitzii (3) PYR
A. funkei (1) PYZ

A. urogenitalis (1)
Actinomyces spp
S. Palombarani y col. Hstal de Clnicas. UBA. 2004
Identificacin de las especies catalasa positiva
Metabolismo
Pigmento
Actinomyces neuii ss neuii (1) Lipofilicidad
Movilidad
Esculina
Nitratos
Urea
Hipurato
Actinomyces neuii ss anitratus (1) CAMP
Manitol
Lactosa
Xilosa
a- Glucosidasa
PYZ
Actinomyces viscosus (4) ODC
Actinomyces spp
Sitios de aislamiento vs especies de Actinomyces spp ( n = 45)

A. neuii ss anitratus
A. neuii ss. neuii
A. odontolyticus

determinados)

A. urogenitalis
A. graevenitzii
A. bernardiae
A europaeus

A. turicensis
A. radingae

A. viscosus
A. sp ( no

A. israelii

A. funkei
ABSCESOS
- perianal, escrotal, inguinal,genital 4 4 - 1 2 2 1 - 1 - - 1 -
femenino
- piel, brazo, cabeza 2 2 3 1 - - - - - - - - -
- abdominal - 1 - 1 - - - 1 - - - - -
ORINA, SEMEN - - - - - - 1 - 2 - 1 - 1
HERIDAS, ULCERAS 1 - - 1 - - - - 1 1 - - -
LIQUIDO PLEURAL - - - 1 - - 2 - - - - - -
BAL, ESPUTO - - - - - 1 - 1 - - - - -
SANGRE - - - 1 - - - - - - - - -
T. CELULAR SUBCUT; OSEO - - - - - - 1 2 - - - - -
27 aislamientos, flora nica; 18 aislamientos, con flora acompaante Hstal de Clnicas. UBA. 2004
Actinomyces spp
Valores de CIM ( g/ml)
Antimicrobiano Rango 50% 90%
Eritromicina < 0.032 - > 128 0.064 64
Claritromicina < 0.032 - > 128 0.032 64
Azitromicina < 0.032 - > 128 0.032 128
Telitromicina < 0.032 1 < 0.032 0.125
Clindamicina < 0.032 64 < 0.032 4
Tetraciclina < 0.032 32 0.125 2
Penicilina < 0.016 0.125 < 0.016 0.032
Ampicilina < 0.016 0.25 0.032 0.125
Cefotaxime < 0.016 0.125 0.032 0.06
Vancomicina < 0.125 0.125 < 0.125 < 0.125
Ciprofloxacina < 0.032 8 0.5 1
Levofloxacina < 0.032 8 0.5 1
Moxifloxacina < 0.032 1 0.125 0.25
A. odontolyticus(4); A. bernardiae (3); A. europaeus (3); A. graevenitzii (3); A. radingae (3); A.sp (2); A.
funkei (1); A. neuii ss neuii (1); A. turicensis (1); A. urogenitalis (1); A. viscosus (1).
CASO CLNICO
Melero M, Campos A, Benetucci A, Famiglietti A., Vay C.

Medicina (Buenos Aires), 2002.

Paciente de sexo masculino, 38 aos de edad

Fiebre 38-39 C de 10 das de evolucin.

Dentadura mal conservada.

Soplo diastlico. Eco Transesofgico: vlvula

artica con vegetacin y abscesos


perivalvulares. Insuficiencia artica con
estenosis.
ESTUDIO MICROBIOLGICO

2 Hemocultivos ( Bact-Alert)
RESULTADOS

Hemocultivos: 20 hs

Gram: bacilos gram-positivos, pleomrficos.

Agar Columbia 5% sangre, 5% CO2: Colonias pequeas

definidas a las 48 hs. Hemlisis alfa.


Catalasa Negativa

TSI (SH2) Positivo

No crece MRS
CIM penicilina 0,008 ug/ml

CIM ceftriaxona 0,063 ug/ml

CIM vancomicina: 64 ug/ml

Tratamiento: Ceftriaxona IV 2g/da.

A los 42 das, con buena evolucin y HC

control negativos, se realiz reemplazo

valvular con prtesis mecnica.

Paciente Carnicero!!!!!!!
Erysipelothrix rhusiopathiae
Erysipelothrix rhusiopathiae

Habitat: ampliamente distribudo


ATB: en la naturaleza (R// Ta. y ph
S// b Lactmicos alcalino)
Parsito de mamferos (cerdos),
R// glucopptidos - AG
aves y peces contaminacin de
V// Eritro, cloran , tetra, cipro suelos y agua con heces y orina
Droga de eleccin: Penicilina erisipela en cerdos

BGP delgado, filamentoso,


- Enfermedad ocupacional pleomrfico, catalasa -

- Carniceros, matarifes, pescadores, veterinarios TSI H+ con SH2


Vanco R
- Celulitis localizada: erisipeloide
BE -
- Sepsis, artritis o endocarditis (IC)
ClNa +
VP +
Sacarosa - ( E. tonsillarum)
Erysipelothrix rhusiopathiae
Diferenciacin con otros gneros

E. rhusiophatiae Lactobacillus Listeria Kurthia Bacillus

Formacin de Esporas - - - - +

Catalasa - - +- + +

SH2 (TSI) + - - - -*

Metabolismo F F F O F/O

Cto. En MRS - + - - -

Motilidad - -* + + V
Lactobacillus spp

BGP largos, a veces corineformes o cocobacilares, a veces


forman cadenas (similares a Leuconostoc, Estreptococos)

No esporulados

Movilidad poco comn (por flagelos peritricos)

Catalasa -

Metabolismo fermentativo

Capnoflicos, algunos anaerobios estrictos

No reducen NO3- a NO2-

No pigmentan la mayora
Lactobacillus spp
Crecen en caldo MRS
No producen SH2
Algunas especies producen gas de glucosa
Forman parte de la flora normal de la boca, tracto GI y vagina de muchos
animales y del hombre
Vancomicina resistente (la mayora de las especies)
En AS: colonias pequeas, opacas, algunas rugosas, otras secas, a o g
hemolticas
Aislados de bacteriemia con o sin endocarditis, abscesos
(intraabdominales, viscerales, PPB, cabeza y cuello, TGF), heridas,
peritonitis, infeccin pulmonar (neumona con o sin empiema), meningitis
Lactobacillus spp
Clasificacin (Otto Kandler-Norbert Weiss)
Grupo I Grupo II Grupo III
Homofermentativos Heterofermentativos Heterofermentativos
obligados facultativos obligados
ADH -1 - +
Gas glucosa - - +
45 C + -2 d
Gluconato - +3 +4
Ribosa - +3 +4
1. Puede haber excepciones: L. jensenii; 2. L. casei ss rhamnosus crece a 45C
3. Puede haber excepciones; 4. Puede haber excepciones

Especies ms frecuentes de aislamiento clnico:


Grupo I: L. delbrueckii - L. acidophilus - L. salivarius
Grupo II: L. casei ss casei - L. casei ss rhamnosus - L. plantarum
Grupo III: L. brevis - L. (W) confusus - L. fermentum
Arcanobacterium haemolyticum
Cuadro Clnico

Faringitis en adultos jvenes (10-30 aos) que puede


manifestarse con rash cutneo escarlatiniforme
Abscesos retrofarngeos
Infeccin de tejidos blandos, infecciones mixtas de heridas
asociadas a traumatismo
Otras infecciones menos frecuentes: osteomielitis, endocarditis

Caractersticas bioqumicas destacables

BGP catalasa negativa


b hemlisis (sangre humana), g hemlisis (sangre ovina)
CAMP inversa +
a manosidasa +
Arcanobacterium haemolyticum

Sensibilidad antibitica

Sensible Resistente Tolerancia

Penicilina TMS Penicilina


Cefalexina
Cefuroxima Variable
Tto. Eleccin:
Cefotaxima
Macrlidos
Azitromicina (CIM90 0.006) Tetraciclina
Eritromicina (CIM90 0.006)
Ciprofloxacina
Vancomicina
Arcanobacterium haemolyticum
Diferenciacin con otros BGP hemolticos catalasa -

G. vaginalis
CAMP -
Almidn +
Hipurato +


A. haemolyticum
BE +
CAMP inversa +
L. monocytogenes ClNa +
Gelatina - Mot. +
Xilosa -


a manosidasa + CAMP inversa -
BE - , ClNa - , Mot. - A. pyogenes Xilosa +
Gelatina +
a manosidasa -

A. turicensis
CAMP inversa -
Xilosa +
Arcanobacterium haemolyticum.
Identification and susceptibility testing
to nine antimicrobial agents

Almuzara Marisa; de Mier Carmen; Barberis Claudia;


Mattera Josu; Famiglietti Angela; Vay Carlos.

Laboratorio de Bacteriologa. Facultad de Farmacia y Bioqumica.


Hospital de Clnicas. Universidad de Buenos Aires. Argentina

11th. European Congress of Microbiology and Infectious Diseases. 2000.


Results
13 strains were isolated from throat and others from: DBT foot ulcers, bone, urethral discharge,
peritonsillar abscess, pleural fluid and loquia.
In none of the throat samples were isolated beta haemolytic streptococci simultaneously with
Arcanobacterium haemolyticum.
3 strains were isolated from a mixed culture: one of them from pleural fluid of a patient with
traumatic hemothorax, other from urethral discharge and the other from a loquia from
spontaneous abortion.
All the strains grew well on human blood agar (colony size 0.5 mm after 24 hours incubation)
and exhibited a narrow 1 mm zone of beta haemolysis were as at 48 hours the colony diameter
was 1 mm with a beta haemolysis zone of 3 5 mm.
On sheep blood agar overnight colonies were tiny and little and no beta haemolysis was observed.
Gram stain showed asporogenous, pleomorphic gram positive rods.
The biochemical profiles are shown in Table 1. All the strains were positive for alpha mannosidase,
pyrazinaminidase, and reverse CAMP, and negative for gelatin hydrolysis and xylose fermentation.
All these tests allow its differentiation from Arcanobacterium pyogenes.
13 strains gave positive Pyr test using disks whereas only 6 strains gave positive with Pyr test / APY
CORYNE.
Bacitracin inhibition zones were between 8 14 mm.
The biocodes obtained by API CORYNE were: 2010360, 2110360, 2130360, 2210360, 2230360,
2310360, 2510360, 2530360, 6010360, 6110360, 6130360, 6330360, and 6530361.
Antimicrobial susceptibility is shown in Table 2.
Biochemical characteristics of 19 strains of
Arcanobacterium haemolyticum
Test or characteristic N of positive strains/total Result % Positive

Catalase 0 / 19 - 0
Nitrate reduction 0 / 19 - 0
Urea hydrolysis 0 / 19 - 0
Esculin hydrolysis 0 / 19 - 0
Gelatin hydrolysis 0 / 19 - 0
DNA hydrolysis 19 / 19 + 100
a-mannosidase test 19 / 19 + 100
Lancefields Group B antigen 15 / 19 V 79
Reverse CAMP reaction 19 / 19 + 100
Fermentation of:
Glucose 19 / 19 + 100
Maltose 19 / 19 + 100
Sucrose 2 / 19 V 11
Mannitol 0 / 19 - 0
Xylose 0 / 19 - 0
Ribose 19 / 19 + 100
Glycogen 0 / 19 - 0
Assayed for the following enzymes (API CORYNE):
Alkaline phosphatase 11 / 19 V 58
Pyrazinamidase 19 / 19 + 100
Pyrrolidonyl arylamidase 6 / 19 V 32
-glucuronidase 6/ 19 V 32
- galactosidase 5 / 19 V 26
a- glucosidase 17 / 19 V 89
N-acetil--glucosaminidase 8 / 19 V 42
Antimicrobial susceptibility of 19 strains of
Arcanobacterium haemolyticum
Antimicrobial agent N of susceptible strains/total MICs range MICs 50 MICs 90
(% susceptible strains) a (g/ml) (g/ml) (g/ml)

Penicillin 18/19 (94.7) b 0.004 0.25 0.016 0.032


19/19 (100) c
Cephalotin 19/19 (100) 0.004 0.064 0.016 0.032
Cefuroxime 19/19 (100) 0.032 0.5 0.125 0.25
Erythromycin 19/19 (100) 0.004 0.25 0.004 0.032
Azithromycin 19/19 (100) < 0.004 < 0.004 < 0.004
Tetracycline 13/19 (68) 0.25 64 0.5 32
Clindamycin 19/19 (100) 0.004 0.032 0.008 0.016
Ciprofloxacin 19/19 (100) 0.25 0.5 0.25 0.5
Vancomycin 19/19 (100) 0.25 - 0.5 0.25 0.5

a: according to NCCLS interpretative standars (2000); b: the categorie for staphylococci was applied;
c: the categorie for Listeria monocytogenes was applied.
Bacilos gram positivos regulares

Esporas + Bacillus spp


BGP regulares
Esporas -

catalasa

+ -

Metabolismo SH2 (TSI)

Oxidativo Fermentativo - +

Kurthia spp Listeria spp Lactobacillus spp Erysipelothrix


Gnero Bacillus
BGP regulares esporulados
Aerobios o anaerobios facultativos
Catalasa usualmente +
Motilidad + por flagelos peritricos (mayora de las especies)
Metabolismo fermentativo o respiratorio
Crecen en amplios rangos de temperatura (hasta 75C) y pH (2 a 10)
Colonias grandes, grises o blancas, de bordes irregulares, con b hemlisis
(B. anthracis no presenta b hemlisis)
Hbitat: suelo, agua, polvo. Algunas especies forman parte de la flora
normal del intestino humano y de animales
Bacillus spp. Patogenicidad
Patgeno obligado: Bacillus anthracis
Patgenos oportunistas: la mayora de las especies

Dbil poder patognico


Requieren tanto de una puerta de entrada como de un sistema
inmune comprometido para producir enfermedad
Tipo de infeccin predominante (excluyendo la bacteriemia): la
neumona, muchas veces con complicaciones spticas
Modo de transmisin: por inhalacin de esporas
Especies ms frecuentes: 1 B. cereus, 2 B. subtilis.
Otras especies (menos frecuentes): B. circulans, B. pumilis,
B. licheniformis, B. coagulans, B. sphaericus
Gnero Bacillus

Patologas: B. anthracis antrax cutneo, respiratorio y gastrointestinal


B. cereus intoxicacin alimentaria e infecciones oportunistas:
infecciones locales en quemados, infecc. heridas
postraumticas o postquirrgicas, endolftalmitis
postraumtica
Infecciones en IC: bacteriemia con o sin endocarditis, infecciones del
SNC (meningitis, absceso de cerebro e infecciones asociadas a shunts)
ATB: resistentes a penicilina(no B. anthracis) y cefalosporinas (hasta las
de 3a. Generacin).
Sensibles a aminoglucsidos, eritro, clinda, cloranfenicol, quinolonas y
vancomicina
Bacillus spp
Factores predisponentes para la bacteriemia
Neoplasias

Drogadiccin EV

Hemodilisis

Cateterizacin

Diabetes

Trauma

Neutropenia
Anthrax
Etiologa: Bacillus anthracis
Infeccin primaria en herbvoros (ganado, ovejas, cabras, caballos)
por ingestin de esporas del suelo.
Anthrax humano:
por contacto directo o indirecto (pelo, piel, lana) con el animal
infectado: forma tpica
por exposicin intencional: forma atpica (anthrax cutneo o
respiratorio)
Tres formas clnicas
Cutnea
Inhalatoria
Gastrointestinal
Transmisin hombre - hombre y animal - animal (misma especie)
extremadamente infrecuente
Criterios de laboratorio para la
identificacin de Bacillus anthracis
Identificacin presuntiva
1) A partir de la muestra clnica
- Coloracin de Gram: Bacilos gram positivos en cadenas cortas
- Tinta china: cpsula +
- Esporas: generalmente ausentes (a menos que la muestra sea expuesta al O2 atmosfrico)
2) A partir del cultivo (AS ovina)
- Gram: BGP no capsulados en cadenas largas
- Verde de malaquita: esporas ovales, centrales o subterminales que no ensanchan la clula
- Morfologa colonial: colonia gris o blanca, adherente, lisa o ligeramente convexa con
proyecciones en forma de coma desde el borde de la colonia (cabeza de Medusa)
Cuando la colonia se levanta con el ansa tiene la apariencia de una yema de huevo batida
- Inmvil
- No hemoltico
- Lecitinasa +
- Sensible a penicilina 10 U: 15 - 20 mm
Criterios de laboratorio para la
identificacin de Bacillus anthracis
Identificacin definitiva

Presencia de la cpsula (Tinta china o MFadyean)

Sensibilidad (lisis) al fago gamma

Deteccin de anticuerpos (contra Ag capsular o polisacridos

de pared celular) por fluorescencia directa sobre el material

clnico (DFA)

PCR para gen de la toxina de B. anthracis y/o de la cpsula

Inoculacin ratn - cobayo (muerte)


Anthrax
Tratamiento antibitico
ATB de eleccin:
- Ciprofloxacina
- Doxyciclina (no meningitis)
ATB alternativos:
- Penicilina Nios
Embarazo
- Amoxicilina Lactancia
- lactamasa inducible puede activarse durante el tratamiento
- Pobre penetracin en macrfagos
Duracin del tratamiento: 60 das
Diferenciacin entre B. anthracis
y otras especies de Bacillus

B. anthracis B. cereus y
Bacillus spp

b Hemlisis (sangre ovina) - +

Motilidad - + (>ra)

Hidrlisis de gelatina (7 das) - +

Fermentacin de salicina - +

Crecimiento en FEA agar - +


Bacilos gram positivos
aerobios pigmentados
Metabolismo oxidativo

Kinyoun Positivo Kinyoun Negativo

Rhodococcus Corynebacterium aquaticum


Nocardia Aureobacterium spp
Gordonia Brevibacterium spp
Tsukamurella
Mycobacterium

Metabolismo fermentativo
Oerskovia spp
Microbacterium spp
Cellulomonas spp
Exiguobacterium acetylicum
Bacilos gram positivos
aerobios pigmentados

Bacteriemia en hemodializados
Bacteriemia asociado a catter ( LMA, HIV,
neutropenia)
Bacteriemia asociada a NPT (Oerskovia)
Endolftalmitis ( Microbacterium, Oerskovia)
Peritonitis asociada a DPAC
Meningitis asociadas a shunts
Infeccin de heridas y PPB
Gnero Exiguobacterium
BGP, catalasa +
Pigmento amarillo oro a naranja
Metabolismo fermentativo, no lipoflico
Mvil por flagelos peritricos
Oxidasa + (la mayora de las cepas)
Esculina +
Presenta ciclo coco-bacilar
2 especies: E. acetylicum (ex Brevibacterium acetylicum)
E. aurantiacum (no aislada de especmenes clnicos)
Se desconoce si forma parte de la flora habitual humana
Aislado de piel, heridas y LCR
Gnero Oerskovia
BGP, no AR, que forma micelio sustrato ramificado que fragmenta en formas
cocoides y bacilares. No forma micelio areo
Catalasa +
Metabolismo fermentativo. Mvil por flagelos peritricos
Pigmento amarillo
Motilidad V
Esculina ++
2 especies: O. turbata (xantina -, hipoxantina -, CAMP -)
O. xanthineolytica (xantina +, hipoxantina +, CAMP inversa +)
Hbitat: suelo, materia orgnica de descomposicin vegetal, aguas residuales,
geles de hidrxido de aluminio
Causa de meningitis, endoftalmitis, infeccin articular protsica, bacteriemia
asociada a catter, peritonitis asociada a DPAC, colecistitis gangrenosa post
endoscopa, pionefrosis, infeccin de PPB, bacteriemia asociada a NPT
contaminada
ATB ms activo (in vitro): vancomicina
Gnero Cellulomonas
Bacilo gram positivo
Catalasa + (excepto C. fermentans)
Motilidad V
Metabolismo fermentativo
Esculina +
Celulasa + (excepto C. hominis)
NO3 +, Xilosa +
Colonias cremosas, de borde entero, blanquecinas, que se tornan
amarillas despus de 3 das o son amarillas desde el comienzo
Hbitat: suelo
Formado por 8 especies pero slo 1 especie: C. hominis es de
aislamiento clnico humano (bacteriemia)
Todas las cepas testeadas son sensibles a Vanco, Tetra y Rifa
Gnero Microbacterium
Bacilo gram positivo
Catalasa + (mayora de las cepas, pero han sido descriptas cepas catalasa - )
Motilidad V ( M. arborescens y M. imperiale son las nicas especies mviles)
Metabolismo fermentativo
Esculina +
Pigmento amarillo (excepto M. arborescens y M. imperiale que tienen pigmento
naranja)
NO3 - (mayora de las cepas), xilosa v Cellulomonas
Hbitat: medio ambiente
Aislado de sangre (septicemia, endocarditis, bacteriemia asociada a catter)
y de muestras oculares (endoftalmitis exgena)
Sensible a la mayora de los antibiticos (excepto Penicilina G y
aminoglucsidos
Aureobacterium spp
Bacilos o cocobacilos gram positivos
Catalasa +
Esculina V
Metabolismo oxidativo
Motilidad + (mayora de las cepas)
Gelatina y casena +
Pigmento amarillo (plido intenso) de aparicin precoz
Hbitat: productos lcteos y medio ambiente
Aislado de sangre (FOD, bacteriemia en pacientes con LMA, hemodilisis
crnica, sepsis fatal por picadura de insecto o abrasin de la piel
contaminada con suelo), infecciones de PPB (absceso epidural, herida
profunda abdominal, celulitis en pacientes con porfiria cutnea), LCR
A. resistens es resistente a vanco (CIM 32 mg/ml) pero sensible a teico
CASO CLNICO
Vay C et al. Congreso Argentino de Microbiologa, 1998.

Paciente de sexo masculino, 19 aos de edad.


Deficiente mental, sordomudo autista.
Antecedentes: IRC terminal secundaria a una
malformacin urinaria por reflujo, hemodilisis
desde 1993.
1995-1997: se colocaron y removieron 7
catteres por oclusin por trombos.
Se coloc un catter doble lumen permanente
por va gonadal para acceder a la vena cava
inferior.
CASO CLNICO

Se registraron varios episodios de bacteriemia

por S. aureus oxacilino-resistente.


Recibi vancomicina IV 1g/5 das.

malformacin urinaria por reflujo, hemodilisis


desde 1993.
Octubre 1997: Escalofros, fiebre e hipotensin.

Se tomaron dos retroculltivos cuantitativos.


Resultados

Recuento de colonias: > 100/ml de sangre

Frascos Bact-Alert: Positivos en 20 hs.

Gram: Bacilos gram-positivos difteroides

AS: 24hs: Colonias puntiformes no definidas

AS: 48-72 hs colonias blanco grisceas.

AS: despus de las 72 hs colonias grandes, bajo


convexas, 3 mm dimetro, amarillas.
Pruebas bioqumicas
Metabolismo oxidativo
Catalasa positiva
Pigmento amarillo
No lipoflico
Movilidad positiva
Esculina positiva
Gelatina +
DNAsa +
Sensibilidad Antibitica y Tratamiento
CIM ( dilucin caldo)
Peni-ampi-cipro: 2 ug/ml
Vanco-TMS: 16 ug/ml
Teico: 0,5 ug/ml
cefalo-eritro-azitro: 32 ug/ml
ceftriaxona: 64 ug/ml
amica-genta: 128 ug/ml

Tratamiento:
se interrumpi vancomicina.
Se utiliz ampicilina vo 2g/da 4 semanas.
Hemocultivos control: negativos.
Aureobacterium sp
Sensiblidad a los Antimicrobianos de Aureobacterium spp
Antibitico Funke et al. Nolte et al Colaert et al Vay et al
13 cepas 1 cepa 1 cepa 1 cepa
CIM g/ml CIM g/ml difusin CIM g/ml
Rango 50% 90%
Ciprofloxacina 0.5-32 2 8 >2 R 2
Clindamicina 0.25-16 4 8 >2 ND ND
Eritromicina < 0.125-16 < 0.125 0.5 >4 S 32
Gentamicina 1-64 8 64 6 S > 128
Penicilina < 0.125-16 0.5 1 1 S 2
Rifampicina < 0.125-326 1 8 <1 ND >4
Tetraciclina 0.125-2 0.5 2 ND S ND
Cefalotina ND 16 S 32
Ceftriaxona ND 16 S 64
Amicacina ND > 32 ND 128
Vancomicina < 0.125-4 0.5 4 > 16 S 16
teicoplanina ND0 ND ND 0.5
ND: no determinado Bacteriologa. Hospital de Clnicas. UBA.
Leifsonia aquatica
Bacilo gram positivo
Catalasa +
Motilidad +
Pigmento amarillo (que desarrolla lentamente dentro de los 3 a 4 das)
Metabolismo oxidativo, oxidasa +, ciclo coco- bacilo
Dnasa ++
Gelatina -, casena -
Esculina V
Hbitat: agua
Descripto como agente de bacteriemia, meningitis, peritonitis asociada
a DPAC e ITU
Frecuente sensibilidad intermedia a vancomicina (CIM 8mg/ml)
mecanismo desconocido
Bacilos gram positivos
Pruebas de sensibilidad antibitica
Corynebacterium spp
MEDIO DE CULTIVO

Mueller Hinton + Tween 80

LIPOFLICAS

Mueller Hinton + 5% sangre carnero

Mueller Hinton NO LIPOFLICAS


CONDICIONES DE INCUBACIN

Tiempo: 24 hs. (48)

Temperatura: 35 C

Atmsfera: aire ambiente


PUNTOS DE CORTE

No hay puntos de corte definidos para

Corynebacterium

Aproximacin puntos de corte

estafilococos
PUNTOS DE CORTE
PENICILINA
CIM (g/ml)
Criterio
Sensible Intermedio Resistente

Listeria 2 - -

Estreptococo 0,12 0,25-2 4

Estafilococo 0,12 - 0,25


CATEGORIZACIN DE ERRORES

Very Major: Falsa Sensibilidad

Major: Falsa Resistencia

Minor: Valor intermedio cuando el


resultado es sensible o resistente

Very Major: < 1%

Major: < 5%
DIFUSIN VS. DILUCIN
VARIACIN DE ERROR
Martnez-Martnez, 1995
Error
ATB
V. Major Major Minor
General 1,5 0,5 4,2
Vancomicina 0 0 0
Ciprofloxacina 0,8 0,8 8,8
Tetraciclina 3 0 6,7
Eritromicina 4,4 0,7 0,7
Weiss, 1996
Error
ATB
V. Major Major Minor
Vancomicina 0 0 0
Eritromicina 0 0 5
DIFUSIN VS. DILUCIN
VARIACIN ERROR POR
PTO. CORTE PENICILINA
Weiss, 1996
Error
ATB
V. Major Major Minor

Listeria 1 4 0

Estreptococo 0 0 18
CONCLUSIONES
No estandarizada

Medio de Cultivo: M. Hinton No Lipoflicos

T80, sangre Lipoflicos

Errores varan ATB, Corinebacteria

No hay Puntos de Corte

Infeccin severa Dilucin / E-Test


Arcanobacterium haemolyticum
MTODOS

CIM (dilucin placa)

- Gold standard

MH + 5% sangre carnero

18 - 24 hs., 35 C, aire ambiente

No difusin
E-TEST

MH + 5% sangre carnero

18 - 24 hs., 35 C

EXCELENTE CORRELACIN

1 dilucin 98%

2 diluciones 99,5%
PUNTOS DE CORTE

No hay especficos para A haemolyticum

Penicilina: S 0,12; R 4 g/ml)

Otros ATB: Estafilococos


CONCLUSIONES

MH + 5% sangre carnero

Dilucin

E-Test, alternativo

Eritromicina
Listeria monocytogenes
DIFUSIN: No Estandarizada

DILUCIN:

Mueller Hinton + 5% sangre lisada de caballo

35 C, 16 20 hs.

PUNTOS DE CORTE:

Ampicilina: Sensible 2 g/ml

Penicilina: Sensible 2 g/ml


E-TEST

Buena alternativa

Chemotherapy 1997

1 dilucin 86% Correlacin


Bacilos gram-positivos:Resistencia Natural

Polipeptdicos, quinolonas antiguas, aztreonam.

Oxacilina(excepto: Arcanobacterium, Erysipelothix y


unas pocas especies ms)

Nitrofurantona( Excepto Listeria-Erysipelothrix)

Fosfomicina
Bacilos gram-positivos: Resistencia Natural
a los Beta-lactmicos y Macrlidos
Listeria: cefalosporinas de tercera generacin.

C. urealyticum, C jeikeium y C amycolatum: Todos los


beta lactmicos

C. urealyticum, C. jeikeium, C. amycolatum, C.


pseudodiphtheriticum, C. glucuronolyticum:
Resistentes a macrlidos
Bacilos gram-positivos: Resistencia Natural
a los glucopptidos

Actinomicetos: Micobacterias y Nocardia: Natural

Erysipelothrix y Lactobacillus: Natural

Aureobacterium: slo una especie


Cuando se jerarquiza un bacilo difteroide?
Aislamiento de sangre en ms de una muestra.
Aislamiento en una muestra de sangre y a partir de un foco (catter)
Aislamiento de un especimen estril ( Liq. Puncin): con examen
directo positivo o cultivo a partir del aislamiento primario.
El aislamiento a partir del medio de enriquecimiento debe
interpretarse con precaucin.
No descartar el aislamiento a partir de: materiales protsicos
osteoarticulares y cardiovasculares, catteres, LCR + shunt, L
peritoneal+DPCA, reemplazo de cristalino.
A menudo no tienen importancia en hisopados de heridas en cultivo
polimicrobiano, 1 sla muestra de sangre, orina con sedimento < 5
PMN/campo.
No descartar orina > 5 PMN/campo, pH alcalino y bacilos gram+ en
en directo.
Caso Clnico 1
Paciente masculino, 57 aos, DBT, IRC.
En DPCA, tiene dos episodios de peritonitis asociada a la
dilisis por ECN meticilino resistente.
Tratamiento con vancomicina.
Buena evolucin clnica.
Tres meses despus desarrolla un nuevo episodio y en
forma emprica se le vuelve a administrar vancomicina.
Mala evolucin clnica.
Se rota a imipenem i.p. con resolucin de la peritonitis
Pruebas bioqumicas
TSI cido
Catalasa negativa
Pigmento negativo
Movilidad negativa
Crecimiento en caldo MRS: positivo
Lactobacillus rhamnosus
Caso Clnico 2
Mujer 42 aos, adicta endovenosa, con necrosis de
cabeza de fmur como consecuencia del tratamiento con
esteroides por un sndrome de Guillain-Barr.
A los 30 aos haba sido sometida a un reemplazo total
de cadera derecha
Previo al ingreso al hospital habia sido sometida a
manipulacin dental por caries
Desarrolla un dolor gradual y progresivo en el sitio de la
artroplastia
Gram del lquido articular
No se observan bacterias
Recuento de leucocitos
72000 /mm3 (95% neutrfilos)
Pruebas bioqumicas

Metabolismo fermentativo
Catalasa negativa
MRS negativo
SH2 negativo
Sensible a vancomicina
Sensible a penicilina, CRO, Eritro y clinda
Actinomyces europaeus
Caso Clnico 3
Paciente masculino, 76 aos, que ingresa al
hospital para evaluacin de un accidente cerebro
vascular del hemisferio izquierdo.
Antecedentes de by-pass coronario y reemplazo
valvular artico hace 4 aos.
Datos al ingreso: 13000 blancos y 38.8 C de Tra
Eco Transesofgico:ecodensidad de 0.5 cm
compatible con una vegetacin en vlvula artica
y absceso perivalvular
Caso Clnico 3
Se toman 3 muestras de hemocultivo
Se inicia tratamiento emprico con vancomicina
ms gentamicina
Se reemplaza la vlvula
De acuerdo a los resultados del cultivo se rota a
peni G IV durante 4 sem, seguido por peni oral
por 6 semanas
Caractersticas bioqumicas
Catalasa positiva
Lipoflico
Metabolismo oxidativo
Motilidad negativa
NO3 negativo
Urea negativa
Glucosa negativa
CAMP positiva
Sensible a penicilina: CIM y CBM 0.03 g/ml
Sensible a vancomicina: CIM y CBM 0.5 g/ml
Corynebacterium afermentans ss
lipophilum
Caso clnico 4
Paciente masculino, 28 aos, HIV positivo,
consumidor activo de droga por va inhalatoria y
antecedentes de TBC pulmonar, 2 episodios de
neumona neumocccica bacteriemica,
infecciones respiratorias a repeticin y
hepatopata crnica por virus de la hepatitis B y
C.
Ingresa por un cuadro de tos, expectoracin
purulenta, fiebre y disnea progresiva de una
semana de evolucin.
Caso clnico 4
Rx de trax: infiltrado pulmonar alveolar
paracardial derecho
Se toman por fibrobroncoscopa muestras de
secreciones pulmonares por cepillo envainado y
BAL.
Gram: abundantes bacilos gram-positivos
difteroides
Cultivos: recuentos > 103 y > 104 UFC/ml
respectivamente
De acuerdo al cultivo, tratamiento con vanco +
imipenem con buena evolucin clnica
Pruebas bioqumicas
Catalasa positiva
Metabolismo fermentativo
NO3 positivo
Urea negativa
Esculina negativa
CAMP positiva
DNAasa negativa
Glucosa positiva, maltosa negativa
Sensible a peni, vanco, imipenem y genta
Resistente a macrlidos, clinda, rifa, tetra y cipro
Corynebacterium striatum
Caso clnico 5
Mujer de 53 aos, con adenocarcinoma gstrico,
sometida a gastrectoma total 5 aos antes.
Se le coloc un Port-A-Cath para la
administracin semanal de fluorouracilo.
Desarroll fiebre y escalofros 1 mes despus de
la colocacin del cateter, posteriormente a la
administracin de la droga.
Se tomaron muestras de hemocultivos y retro.
Caso clnico 5

Se removi el cateter
La paciente recibi claritro, cipro ( 3 meses) y
amika ( 1 mes)(IV) con buena evolucin clnica.
Pruebas bioqumicas
BGP filamentoso
TSI sin cambio
Catalasa positiva
Vancomicina resistente
No lipoflico
No pigmentado
Pruebas bioqumicas
Kinyoun positivo
Zielh Neelsen positivo
Arilsulfatasa (3 das) positiva
NO3 negativo
Citrato +
Clna -
Mycobacterium chelonae
Caso clnico 6
Neonato prematuro (24 semanas de gestacin),
peso 640 gs.
Nacido de madre que haba sufrido una infeccin
del lquido ammitico ( corioammionitis ) luego
de RPM 13 das antes del parto.
Intubado y ventilado mecnicamente .
Se inici tratamiento con Piper + Ak
Caso clnico 6
Se constatan SDR grado 2, hipotensin severa,
coagulopata y hemorragia intraventricular
ventricular.
El paciente fallece
Se tomaron muestras de odo,boca, lavado
gstrico y hemocultivos del neonato e hisopado
vaginal y de placenta de la madre.
En todas las muestras desarroll la misma
bacteria.
Pruebas bioqumicas
TSI cido
Lipoflico??
Catalasa positiva
CAMP negativa
Maltosa positiva
O 129 resistente
Alfa- glucosidasa negativa
DNAasa negativa
Corynebacterium amycolatum
Caso clnico 7
Mujer, 45 aos, con alveolitis alrgica crnica, en
tratamiento con corticoides, que ingresa al hstal
por un episodio de reagudizacin de su
enfermedad basal.
Presenta fiebre, leucocitosis y derrame pleural en
la Rx de trax.
TC: coleccin en pleura lateral y cisura del
pulmn derecho.
Caso clnico 7
Se practica toracocentesis obtenendose un
material purulento con alto contenido en
leucocitos
De acuerdo al cultivo, se inicia tratamiento con
AMC y se coloca un tubo de drenaje.
Evolucin favorable
Pruebas bioqumicas
Catalasa negativa
Metabolismo fermentativo
Beta hemlisis
Bilis esculina negativa
CLNA negativo
CAMP positiva
Arcanobacterium haemolyticum
Caso clnico 8
Mujer, 60 aos, con sintomatologa de infeccin
urinaria.
Sin enfermedad de base.
Sedimento de orina: leucocitos > 10; hemates y
cristales ausentes.
PH orina: 8.0
Pruebas bioqumicas
BGP difteroide
Catalasa positiva
Metabolismo oxidativo
Urea positiva rpida ( 5 minutos)
Glucosa negativa
Pruebas bioqumicas
NO LIPOFLICO!!!
SENSIBLE A PENICILINA!!!!
Glucosa
Maltosa +
Corynebacterium riegelii