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Daniela guila Camila Prez Constanza Perry Mario Vera Dominique Yez

Microscopa Moderna
Docente: Karina Oyarce
19, Junio, 2017
INTRODUCCIN

La espectroscopa Raman, se ha utilizado


para analizar materiales en diversos
campos especializados.

Nos permite sondear una muestra


directamente por la luz y no requiere
tincin o etiquetado de la muestra.

A continuacin podremos revisar los avances en las tcnicas de


imagen celular basadas en Raman y destacar su potencial para
la observacin y anlisis de funciones biolgicas.
HISTORIA

Efecto Raman fue descrito por el fsico indio Chandrasekhara Venkata Raman
en el ao 1928.

Este cientfico dio nombre al fenmeno inelstico de dispersin de la luz que


permite el estudio de rotaciones y vibraciones moleculares.

Raman, gana el premio Nobel de Fsica en 1930 por su


descubrimiento, utilizando la luz solar, una tira angosta de filtro
fotogrfico para generar la luz monocromtica y un filtro "cruzado"
para bloquear esta luz monocromtica.

Encontr que aquella luz cambiaba la frecuencia al pasar a


travs del filtro "cruzado". Luego, la teora sistematizada del
efecto Raman fue desarrollada por el fsico checo George
Placzek entre 1930 y 1934
FUNDAMENTOS DE
ESPECTROSCOPA DE RAMAN
Es una tcnica fotnica de alta resolucin, proporciona en pocos segundos
informacin qumica y estructural de cualquier material o compuesto
orgnico y/o inorgnico permitiendo as su identificacin.
Este anlisis se basa en el examen de la luz dispersada por un material al
incidir sobre l un haz de luz monocromtico.
Una pequea porcin de la luz es dispersada inelsticamente
experimentando ligeros cambios de frecuencia que son caractersticos del
material analizado e independiente de la frecuencia de la luz incidente.
Esta tcnica de anlisis se realiza directamente sobre el material a analizar
sin necesitar ningn tipo de preparacin especial.
Las muestras no necesitan ser fijadas o seccionadas.
QU ES?

La espectroscopia Raman es una tcnica de


espectroscopa usada en qumica y fsica de la
materia condensada para estudiar modos de
baja frecuencia como los vibratorios, rotatorios, y
otros.

Se basa en los fenmenos de dispersin


inelstica, de la luz monocromtica,
generalmente de un lser en el rango de luz
visible, el infrarrojo cercano, o el rango
ultravioleta cercano.
EFECTO RAMAN

Las molculas poseen distintos


movimientos a los que corresponden
distintos valores de energa molecular y
al ser irradiadas ocurre que cambien
este estado energtico a otro como
estado no permitido (excitacin) por la
falta de estabilidad y por lo tanto
deber regresar a un estado original o
un estado con un nivel estable (basal).
APLICACIONES DE
ESPECTROSCOPA DE RAMAN

EN MEDICINA
EN QUMICA

Se utiliza para Se utiliza para,

EN FSICA
Se utiliza para el seguimiento en entre otras cosas,
proporcionar una tiempo real de caracterizar los
huella dactilar de las mezclas de materiales, medir
la molcula para gases la temperatura, y
que pueda ser respiratorios y la encontrar la
identificada. anestesia orientacin
durante la cristalogrfica de
ciruga. una muestra.
APLICACIONES EN MUESTRAS
BIOLGICAS

El intento de utilizar la espectroscopia Raman


para imgenes de clulas vivas es relativamente
nuevo.

Figura:

La imagen de superposicin se construy


asignando las distintas imgenes Raman
a diferentes canales de color.
VENTAJAS V/S DESVENTAJAS
Capacidad para imgenes libres de etiquetas mediante la deteccin de
vibraciones de molculas.

La eficiencia de la dispersin Raman es demasiado baja, lo que desalienta


a muchos investigadores a utilizarla para la obtencin de imgenes
biolgicas.

Para aprovechar al mximo los beneficios de la dispersin Raman para la


formacin de imgenes de clulas, se necesitan nuevas tcnicas
microscpicas que pueden proporcionar una alta sensibilidad de deteccin y
velocidades de imagen rpida.
MICROSCOPA
CONFOCAL DE RAMAN
La microscopa de Raman confocal rene a
la microscopa confocal con la espectroscopa
Raman.

La confocalidad permite obtener imgenes de


buena resolucin y definicin al tiempo que es
posible obtener informacin tridimensional.

La espectroscopia se acopla al microscopio


permitiendo en cada pixel de una imagen
obtener un espectro Raman, constituyendo as
un sistema de Imagenologa Qumica, que
puede adems tener resolucin nanomtrica.
CARACTERSTICAS MICROSCOPIO
Ensayo no destructivo

Preparacin sensilla de la muestra

Identificacin qumica directa


Aplicacin de slidos cristalinos y slidos
amorfos y material biolgico
Determinacin de propiedades de
materiales
Obtencin de imgenes en 3D

Rango de temperatura -296 a 600C


IMGENES OBTENIDAS
La configuracin confocal reduce las seales de fondo no deseados,
aumentando el contraste y proporcionando informacin no slo de la
superficie sino tambin del interior de la muestra.

Imagen Raman de una clula viva Amplia zona de imagen Raman de la


Imagen de Raman de una bacteria viva
materia cerebral gris y blanca de un
Bacillus Cereus
cerebro de hmster junto con un zoom de
imagen en alta resolucin en la frontera
entre la materia cerebral gris y blanca.
CONCLUSIN

La alta resolucin espacial y temporal de las tcnicas de microscopa Raman recientes ha llevado a
un aumento en el uso de la dispersin Raman para la observacin y anlisis de funciones biolgicas
en clulas vivas. Este avance se debe al uso de tcnicas de deteccin paralela que han acortado
significativamente el tiempo de adquisicin de la imagen y la explotacin del efecto Raman.

La rica informacin molecular proporcionada por la microscopa Raman, que no est disponible en
otras tcnicas de imagen, continuar impulsando los desarrollos en las tcnicas Raman durante
varios aos ms. Esto a su vez se espera que produzca aplicaciones ms emocionantes en la
biologa celular y la medicina.
BIBLIOGRAFA/LINKOGRAFA
Almar F Palonpon1,2, Mikiko Sodeoka2,3 and Katsumasa Fujita1,2. (15th June
2013). Molecular imaging of live cells by Raman microscopy. 10 junio 2017,
de sciencedirect
Sitio web:
http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S1367593113000999?via%3
Dihub
http://cryssmat.fq.edu.uy/ricardo/raman/poster_raman.pdf
http://www.espectrometria.com/espectrometra_raman