SPEKTROMETRI MASSA

(MASS SPECTROMETRI ,MS )

 MS
Spektometer massa adalah suatu instrumen
yang dapat menyeleksi molekul-molekul gas
bermuatan berdasarkan massa molekul relatif
ionnya /ion fragmennya.
 PRINSIP SPEKTROMETRI MASSA
Molekul bermuatan atau fragmen molekul
dihasilkan dalam suatu ruang sangat hampa,
atau segera sebelum suatu sampel memasuki
ruang sangat hampa dengan menggunakan
berbagai metode untuk produksi ion. Ion-ion
dihasilkan dalan fase gas sehingga ion tersebut
kemudian dapat dimanipulasi dengan
penerapan pada medan magnet atau medan
listrik agar dapat menentukan molekulnya.
Proses Kerja Spektrometer Massa
KOMPONEN MS
 Penanganan & Ionisasi Sampel
Sampel yang akan dianalisis dimasukkan pada
tempat pengionan dalam alat spektroskopi
massa. Sampel dapat berupa gas, padatan,
dan larutan sesuai dengan wujud sampel dan
teknik ionisasi yang dipilih
 JENIS IONISASI SAMPEL
Tumbukan Elektron

Electrospray Ionisation (ESI)

Chemical Ionization (CI)

Fast Atom Bobardment (FAB)

Field Desorption (FD)

Matrix Assisted Laser Desorption

Ionization (MALDI)
 Tumbukan Elektron (Electron Impact /EI)

Ruang pengionan, uap sampel ditumbuk dengan

elektron berenergi tinggi (70 ev). Energi yang diserap
molekul sampel akan mendorong pelepasan/
pengionan elektron dari orbital ikatan dan orbital
anti-ikatan. Energi ditransfer kearah pembentukan
ion melalui proses tumbukan seperti terlihat pada
persamaan reaksi berikut :
A-B-C + e- A-B-C+ + 2 e-
Metode ini banyak digunakan untuk sampel yang
volatil dan stabil pada temperatur tinggi
 Electrospray Ionisation (ESI)

Suatu larutan disemprotkan melalui pipa berdiameter

sangat kecil kedalam ruang vakum dengan medan listrik
bergradient beberapa ratus hingga ribuan volt per
centimeter, menghasilkan ion gas dari solut. ESI merupakan
tehnik MS yang mampu menghasilkan fraksi besar dari
fragmen-fragmen molekul organik atau analit biologis.
Metode ini telah digunakan untuk mengukur massa ion dari
molekul hingga 200.000 dalton, seperti protein.
 Chemical Ionization (CI)
Ion yang akan dianalisa diproduksi melalui transfer suatu partikel (H+, H-, dan lebih berat)
hasil pengionan suatu reaktan berupa gas yang lebih berat ke dalam sampel. Umumnya
reaktan yang digunakan adalah gas metana pada tekanan 0,2-2,0 torr (27-270 pascal).
Mula-mula metana (CH4) diionkan melalui proses tumbukan elektron menghasilkan ion
CH4+ . Selanjutnya ion tersebut bereaksi dengan molekul netral metana yang lain
menghasilkan asam Bronsted yang kuat untuk bereaksi dengan molekul sampel melalui
transfer proton.

CH4 + e- CH4+ + 2 e-
CH4+ + CH4 CH5+ + CH3
CH3+ + CH4 C2H5+ + H2
CH5+ + A-B-C HABC+ + CH4
C 2H5+ + A-B-C HABC+ + C2H4

Gas lain yang juga sering digunakan adalah hidrogen (H2), uap air (H2O), ammonia (NH3),
dan isobutana (C4H10). Dalam gas-gas ini, ion yang reaktif adalah H3+, H2O+, NH3+ dan C4H10+.
Energi yang ditransfer pada proses ionisasi dengan metode ini berkisar 10-50 kkal/mol atau
40-200 kJ/mol, jumlah energi yang cukup kuat untuk proses fragmentasi, namun
fragmentasi yang terjadi lebih sedikit dari metode tumbukan elektron.
 Fast Atom Bombardment (FAB)
FAB merupakan suatu tehnik ionisasi untuk molekul non-
volatil dan atau labil terhadap temperatur tinggi. Baik
digunakan untuk molekul polar dan molekul dengan
berat molekul tinggi. Umumnya FAB menggunakan uap
atom netral berkecepatan tinggi seperti Argon dan
Xenon pada 8 kV. Sampel yang dianalisa dapat berupa
padatan atau sampel yang dilarutkan dalam pelarut
kental seperti gliserol. Biasanya ion pseudo molekuler
[M+H]+ terbentuk bersama sedikit ion fragmen dengan
massa yang lebih rendah.
 Field Desorption (FD)
Untuk material yang kurang volatil, ionisasi biasanya
dilakukan dekat permukaan elektroda melalui gradient
medan listrik yang sangat tinggi (beberapa volt per
angstrom). Awan elektron dalam molekul didistorsi dan
bagian molekul yang mengandung kelebihan elektron
berperan sebagai anoda. Ion yang terbentuk akan ditolak
oleh anoda. Lifetime dari ion ini sangat singkat
dibandingkan dengan ion hasil tumbukan electron. Karena
sedikit energi yang ditransfer berupa energi dalam dan ion
bergerak sangat cepat, dan fragmentasinya sangat sedikit,
maka berat molekul sangat mudah dideteksi.
Matrix Assisted Laser Desorption Ionization
(MALDI)
Metode ini baik digunakan untuk sampel dengan berat
molekul lebih besar dari 700.000, dan tehnik ini telah
digunakan untuk menentukan berat molekul dari molekul
biologi besar yang bersifat polar, seperti enzim, analisa
interaksi antibodi. Sampel berupa matriks organik atau dibuat
dalam matrik organic (asam sinapinat biasanya untuk sampel
protein), dioleskan pada permukaan suatu lempeng,
selanjutnya diradiasi dengan sinar laser (N2 337 nm) . MALDI
adalah metode ionisasi yang lemah dan fragmentasi ion
sampel jarang terjadi. Ion yang dihasilkan biasanya berupa ion
molekuler sehingga spektra yang dihasilkan sangat sederhana.
KOMPONEN MS
KOMPONEN MS
KOMPONEN MS