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Integrantes:
Magda Garzn
Vernica Obando
Edwin Tapia
Bladimir Pantoja
Fernando Portillo
Julio Rubio
Universidad de Nario
SERODIAGNSTICO
Tcnica de laboratorio que permite mediante
la formacin de reacciones inmunolgicas
provocadas en el suero sanguneo (pruebas
serolgicas) determinar la aparicin de
anticuerpos, frente al agente infectante.
http://serologiade.blogspot.com.co /
SEROLOGA
Es un examen de sangre que se utiliza para
detectar la presencia de anticuerpos contra
un microorganismo. En los anlisis
serolgicos se buscan anticuerpos especficos
producidos porel sistema.
http://www.suizavet.com/toma-de-muestras.php
Las respuestas inmunitarias contra la mayora
de los antigenos inducen la produccin
especifica de anticuerpos y linfocitos T
efectores.
Este reconocimiento entre el antigeno
anticuerpo o linfocito sienta las bases del
diagnostico inmunolgico.
SEROLOGIA
La medicin de las interacciones Antigeno-
Anticuerpo con fines diagnsticos.
Se realizan en 2 vas:
Utilizacin de anticuerpos especficos
para detectar el antigeno.(diagnostico
directo)
Utilizacin de antigenos especficos para
detectar anticuerpos. (diagnostico
indirecto)
La reaccin entre el Ag y el Ac es de
naturaleza fsica y qumica.
La fuerzas que los mantienen unidos, son de
tipo no covalente, como la atraccin
electrosttica, los puentes de hidrgeno y las
fuerzas de Van der Waals.
CARACTERSTICAS
AFINIDAD DEL ANTICUERPO
Es la fuerza de
unin entre el Ac con
su Ag
Determina la
atraccin entre ellos.
Esa fuerza es la
suma de las fuerzas
de los enlaces que
intervienen en la
unin.
AVIDEZ DEL ANTICUERPO
HEMOAGLUTINACION
CONCEPTOS Rta inmune
diagnostico
ANTICUERPOS Y HEMAGLUTINACIN
1.- Rx Ag---Ac
2.- partculas agregadas
HEMAGLUTINACIN
En estas tcnicas se hacen
visibles los complejos Ag-Ac
por la aglutinacin que
producen los anticuerpos
cuando el Ag forma parte o se
ha unido artificialmente a la
superficie de glbulos rojos,
plaquetas, leucocitos etc.
Hemoaglutinacin directa
aglutinacin
https://www.pig333.com/3tres3_common/art/pig333/4500/company_news_4500_E
LISAjpg
Las aplicaciones mas interesantes se
iniciaron en el campo de la microbiologa y
parasitologa, por los grupos de Alister Voller
y Dennis Ruiteberg en el Institutr of Public
Health del estado de Dutch.
Voller y Bidwell introdujeron el uso de placas
de 96 pocillos.
IMPORTANCIA
Son Utilizados en el Dx Medico, la industria de
alimentosy el estudio y control del medio
ambiente.
En estudios Serologicos, hematolgicos,
endocrinolgicos, oncologicos en los
transplantes. En M. forence y Antropologia.
Con propsitos mdicos se han utilizado en la
determinacin de hormonas y Proteinas Plasm.,
Ag tumorales, drogas, Ag y Ac de m.o.
parasitos, hongos, bacterias y virus.
Los resultadoselementos Dx, Info de Enfm. y
coadyuvan a la planificacin del Tto.
FUNDAMENTOS Y TIPOS DE ELISAS.
Anticuerpos marcados:
ELISA Directo
ELISA Indirecto
ELISA sndwich
Doble (DAS)
Heterlogo (HADAS)
Antgeno marcado
ELISA competitivo
CARACTERISTICAS
Aalta Sensibilidad y Especificidad,Sencillo, bajo costo
reproducible y adaptable Versatil.
SENSIBILIDAD: expresa la capacidad de la tecnica para
detectar las menores concentraciones posibles de los
anticuerpos(o antigenos) buscados
ESPECIFICIDAD: expresa la capacidad de esta tecnica
para diferenciar los anticuerpos especificos(o antigenos)
buscados de otros presentes en el material de estudio.
Consigue mediante el uso de fase solida una separacin
fcil entre la fraccin retenida y la fraccin libre.
Puede detectar sustancias en el orden de los
nanogramos y picogramos/ml
Automatizacion
Poca cant. de muestra, suero problema (ul)
Enzimas de menor costo y seguras para el
operador
Menor tiempo
Mas estables, mayor periodo de validez
Pureza, estabilidad y cant del Ag
Pureza y calidad del Ac conjugado
PASOS GENERALES DE UN ELISA.
www.lookfordiagnosis.com
JULES BORDET (1870-1961)
Naci en Soignies el
13 de junio de 1870.
La reaccin de
fijacin del
complemento --
(antes alexina)
descrita por Bordet
(fenmeno de
Bordet, o fenmeno
de Bordet-Gengou)
http://www.historiadelamedicina.org/bordet.html
FIJACION DEL COMPLEMENTO
Mtodo de eleccin para el Dx indirecto de
enfermedades infecciosas importantes en
veterinaria: brucelosis, paratuberculosis.
www.scielo.org.co
Una segunda parte de la prueba consiste en:
una suspensin de glbulos rojos de carnero
(sensibilizados con Ac anti-globulos rojos) en
el complemento producen hemolisis del glbulo
rojo dando un fenmeno claramente visible.
Si en la primera fase la reaccin del
complemento presente se utiliza, en la
segunda fase no hay complemento y el
fenmeno hemoltico no ocurre.
Pero si en la primera fase el complemento no
se utiliza porque no hay reaccin Ag-Ac el
complemento queda libre y se utiliza en la
segunda fase dando un fenmeno visible de
hemolisis.
http://es.slideshare.net/cocogonzalez790/brucelosis-46381424
Son pruebas de tipo cuantitativas determinar
concentraciones del Ac
1940
.
McDevitt,t , memorias biogrficas de la Academia Nacional de Ciencias
Fluorocromo
Isotiocianato de fluoreceina
Isotiocinato de
tetrametilrodamina
MICROSCOPIO
Lente
ocular
Filtro Filtro de
Excitacin barrido
lmpara
Espejo
dicroico
Lente
objetivo
Longitud de onda de Longitud de onda
Fluorocromo
absorcin (nm) de emisin (nm)
Fluorescena
494 520
(FITC)
570
Rodamina (TRITC) 540
Naranja de
460-502 526-650
acridina
Yoduro de
536 617
propidio
uso
Uso
INMUNOFLUORECENCIA
Directa Citometra de
Indirecta flujo
INMUNOFLUORECENCIA
DIRECTA FUNDAMENTO
Inmunofluorescencia Directa
INMUNOFLUORECENCIA DIRECTA
Ventajas desventajas
Amplificacin
Rpida mnima
duracion
APLICACIONES
RABIA
CAMPYLOBACTER
LISTERIA
CLOSTRIDIUM
MICOBACTERIUM
INMUNOFLUORECENCIA INDIRECTA
FUNDAMENTO
INMUNOFLUORECENCIA INDIRECTA
APLICACIONES
ViLeF
DISTEMPER
IBR
LEUCOSIS
RABIA
Sndrome Respiratorio y Reproductivo
Porcino (PRRS)
DEL VIRUS DE NEWCASTLE Y GUMBORO
Ventajas desventajas
Costo
Sensibilidad
Trabajo
No cultivos
personal
Rapida
Citometra de flujo:
Anlisis de clulas
Ncleos
Cromosomas
mitocondrias
otras partculas en suspensin
Un detector y un conversor de
seales, ----computador.
Un sistema de amplificacin, lineal o
logartmico.
Un ordenador para el anlisis de las
seales
VENTAJAS
Rpida
Sencilla
Suficientemente sensible
Econmica
Fcil
APLICACIONES
Si bien la citometra de flujo no se aplica mucho en veterinaria, su uso
en futuro cercano aumentar de manera considerable en la medida que
sea difundida la posibilidad de su aplicacin en otras especies distintas a
pequeos roedores