ESPECTROSCOPIA ULTRAVIOLETA Y

VISIBLE

INTEGRANTES:
SONIA USECCA LEON
CLAUDIA RIBERA GONZALO
EDITH CHOQUE
MILENKA PERCA SOSA
EDA SANCHEZ
ESPECTROSCOPIA ULTRAVIOLETA Y VISIBLE
ES UNA TCNICA EFICAZ PARA IDENTIFICAR O ASIGNAR UNA ESTRUCTURA A LOS
COMPUESTOS QUMICOS (ORGNICOS O INORGNICOS) Y MEDIR SUS CONCENTRACIONES,
YA SEAN EN SISTEMAS DE UNO O MS COMPONENTES ABSORBENTES.
APLICACIN DE LA ESPECTROMETRA DE ABSORCIN
MOLECULAR UV-VISIBLE
Las aplicaciones cualitativas y cuantitativas de la espectrometra UV-Vis.

ANLISIS CUALITATIVO
LA ESPECTROMETRA UV-VIS SE USA COMO TCNICA ANALTICA SECUNDARIA
EN LA IDENTIFICACIN Y LA DETERMINACIN DE DETALLES ESTRUCTURALES.

POR EJEMPLO, LA PRESENCIA DE UNA O MS SEALES EN LA REGIN 200-400

NM DEL ESPECTRO ES UNA INDICACIN CLARA DE LA PRESENCIA DE
INSATURACIN EN LA MOLCULA.
 EL ESPECTRO PUEDE SER MUY TIL PARA DISTINGUIR DOS MOLCULAS QUE TIENEN UN
COLOR SIMILAR.
POR EJEMPLO:

EN LA FIGURA 14 SE MUESTRAN LOS ESPECTROS VISIBLES DE DOS ESPECIES DE

COLOR PRPURA DE ESTRUCTURAS MUY DIFERENTES. UNO DE LOS ESPECTROS PASA A
SER DE UN COLORANTE AZOICO Y EL OTRO ES DE UNA SOLUCIN DE PERMANGANATO.
LA DIFERENCIA EN LA FORMA DE CADA CURVA AYUDA A LA DISTINCIN DE LOS
COMPUESTOS; LA CURVA SUAVE CON UN SOLO MXIMO ES PARA EL TINTE.

FIGURA14.ESPECTROS UV-VIS DE COLORANTE AZOICO (AZUL) Y PERMANGANATO

(ROJO).
 ANLISIS CUANTITATIVO
LA ESPECTROMETRA UV-VIS ES PROBABLEMENTE LA HERRAMIENTA MS TIL PARA LAS
DETERMINACIONES CUANTITATIVAS.

DEBIDO A SU VERSATILIDAD, PRECISIN Y SENSIBILIDAD. SE PUEDE UTILIZAR PARA LA

DETERMINACIN DIRECTA DE UN GRAN NMERO DE ESPECIES ORGNICAS, INORGNICAS Y
BIOQUMICAS

EN CONCENTRACIONES BASTANTE BAJAS; ES DECIR, DE 10 A 10 INCLUSO INFERIOR.

-4 -5

SE UTILIZAN EN DIVERSAS REAS. ALGUNOS DE LOS MS COMUNES ESTN RELACIONADOS CON

LOS SIGUIENTES ASPECTOS CUANTITATIVOS DE LA QUMICA EN DISOLUCIN.

A. DETERMINACIN ANALTICA DE METALES Y NO METALES.

B. DETERMINACIN ANALTICA DE COMPUESTOS ORGNICOS.
C. DETERMINACIN DE LAS CONSTANTES DE DISOCIACIN DE CIDOS ORGNICOS Y TINTES.
D. DETERMINACIN DE LAS CONSTANTES DE FORMACIN DE METAL-LIGANDO.
E. DETERMINACIN DE LA ESTABILIDAD CINTICA DE LOS COMPLEJOS.
 FACTORES QUE INFLUYEN EN EL CONTROL
DE LA ABSORVANCIA.

ESTOS INCLUYEN POLARIDAD

DEL DISOLVENTE

PH
TEMPERATURA
FUERZA INICA
LAS INTERFERENCIAS DE
OTRAS ESPECIES
ABSORBENTES.
 VALIDACIN DE LA LEY DE LAMBERT-BEER.
EN LA MAYORA DE LOS MTODOS ESTE PARMETRO SE PUEDE OBVIAR, AL CONSTRUIR
UNA FUNCIN ANALTICA O CURVA DE CALIBRACIN ANALTICA. ESTA LTIMA SE OBTIENE
GRAFICANDO LA ABSORBANCIA MEDIDA A UNA LONGITUD DE ONDA FIJA, DE DIFERENTES
SOLUCIONES DE REFERENCIA (TAMBIN LLAMADAS SOLUCIONES ESTNDAR O
SOLUCIONES PATRN) DEL ANALITO EN CUESTIN, CONTRA SUS CONCENTRACIONES
CONOCIDAS. SI LA LEY DE LAMBERT-BEER SE APLICA AL GRAFICAR LA ABSORBANCIA VS.
LA CONCENTRACIN SE PRODUCE UNA LNEA RECTA QUE PASA POR EL ORIGEN.
INSTRUMENTACIN PARA ESPECTROSCOPIA UV
ESPECTROFOTMETROS
UN ESPECTROFOTMETRO CONSTA DE LAS SIGUIENTES UNIDADES BSICAS:
LA LMPARA QUE EMITE LA RADIACIN ELECTROMAGNTICA.
LOS ESPECTROFOTMETROS DE ABSORCIN UV-VISIBLE SUELEN ESTAR EQUIPADOS CON DOS TIPOS DE
LMPARAS: LAS HALGENAS QUE EMITEN LUZ VISIBLE EN LA ZONA DEL ESPECTRO VISIBLE (700-350 NM) Y
LAS DE DEUTERIO QUE EMITEN RADIACIN ULTRAVIOLETA Y CUBREN EL ESPECTRO UV-PRXIMO (350-250
NM).
LAS LENTES PTICAS QUE CONCENTRAN EL HAZ DE LUZ LUMINOSO Y LO ENFOCAN SOBRE EL
MONOCROMADOR.

EL MONOCROMADOR, UNIDAD QUE PERMITE OBTENER LUZ MONOCROMTICA O RADIACIN FORMADA POR
UNA SOLA LONGITUD DE ONDA.

EL SISTEMA DE CUBETAS O CLULAS, DONDE SITUAMOS LA SOLUCIN DE MUESTRA A ANALIZAR Y SE

CARACTERIZA POR SU LONGITUD DE PASO.

EL DETECTOR: LA LUZ NO ABSORBIDA (TRASMITIDA) POR LA MUESTRA CONTINA SU CAMINO HACIA EL

FOTOMULTIPLICADOR Y POR MEDIACIN DEL SISTEMA DE FOTODIODOS ESTA SEAL PTICA ES
TRANSFORMADA EN ELCTRICA, PARA FINALMENTE, SER AMPLIADA Y REGISTRADA O DIGITALIZADA.
preparacin de muestras
patrn
para elaborar la recta de
calibrado
PREPARACIN DE MUESTRAS PATRN

Materiales y Equipos:
Matraz y pipetas.
balanza analtica
estufa selecta
Reactivos:
Muestra: cafena
agua
cido clorhdrico 0,01 m.
Flujograma de Preparacin de las muestras patrn
PREPARACIN DE LAS
MUESTRAS DE CAF
Equipos: unidad de purificacin de agua.

balanza analtica
manta calefactora
Reactivos:

sulfato de sodio anhidro

carbonato de sodio anhidro
cloroformo
muestra de caf :cafs de tostadero
cafs comerciales
Procedimientos de separacin de la
cafena del caf
Puesta a punto del Sistema
Espectrofotomtrico

Se realiza espectros UV teniendo en cuenta:

Las caractersticas fisicoqumicas del principio activo a evaluar.

El disolvente utilizado para la preparacin de muestras.
Rango de longitudes : entre 300 y 190 nm ya que tericamente a 273 nm,
la cafena presenta un mximo de absorcin.
segn patrones: 4, 8, 16, 24 y 32 ppm.
 ESPECTRO DE ABSORCIN Y TRANSMITANCIA
OBJETIVO:

CONOCER EL USO E IMPORTANCIA DEL

ESPECTROFOTMETRO

DETERMINAR AZUCARES REDUCTORES, MEDIANTE EL

MTODO DE MILLER MODIFICADO POR MANDELS.

DETERMINAR LA TRANSMITACIA Y EL ESPECTRO DE

ABSORCIN
PRINCIPIO TEORICO:

EL ESPECTRO DE ABSORCIN DE UN MATERIAL MUESTRA LA

FRACCIN DE LA RADIACIN
ELECTROMAGNTICA INCIDENTE QUE UN MATERIAL ABSORBE
DENTRO DE UN RANGO DE FRECUENCIAS

LAS SACAROSA SE TRANSFORMA EN AZCAR INVERTIDA POR

LA ACCIN DEL CALOR, LOS CIDOS, ENZIMAS, SALES
ACIDICAS Y OTROS, QUE DA COMO RESULTADO UNA MEZCLA
EN IGUALES PROPORCIONES DE DEXTROSA Y LEVULOSA.
MATERIALES:

BALANZA
COCINA ELCTRICA
ESPECTROFOTMETRO
TUBO DE ENSAYO
VASO PRECIPITADO
VARILLA
PIPETA

VIDRIO DE RELOJ
BALN AFORADO
PIPETA
CUBETAS DNS
AGUA DESTILADA
MIEL
CRONOMETRO
 MIEL

PESAR 1 gr de muestra

DILUIR

Agregar H20 AFORAR

destilada
Sacar 1ml de muestra

AFORAR
ltima dilucin sacar 1ml

Agregar 3 ml del reactivo

DNS.
Bao Mara, 5 min CALENTAR

Agregar 10ml de agua dest.

AGITAR
Enfriar T ambiente
Preparar sol. estndar y
solucin en blanco
LECTURA
PROCEDIMIENTO:

PESAR 1G DE MUESTRA Y DILUIR A UN VOLUMEN DE 100ML.

LLEVARLO A UN BALN AFORADO Y AGREGARLE H2O(D) PARA
AFORAR.
SACAR 1ML DE MUESTRA Y VOLVER AFORAR.
LUEGO DE LA ULTIMA DILUCIN SACAR NUEVAMENTE 1ML,
AGREGAR 3ML DEL REACTIVO DNS
PONER A BAO MARA POR EL ESPACIO DE 5 MINUTOS.
AGREGARLE 10ML DE AGUA DESTILADA.
 AGITAR Y ENFRIAR LA MUESTRA A TEMPERATURA AMBIENTE.
SIGUIENDO EL MISMO PROCEDIMIENTO, PREPARAR UNA
SOLUCIN ESTNDAR Y UNA SOLUCIN EN BLANCO PARA LA
GRAFICA PATRN.
LEER EN UN ESPECTROFOTMETRO LA ABSORBANCIA A
550NM.
Ntubo Concentracin Absorbancia Transmitancia %transmitanci
a
1 0 0.521 0.3013 30.13
2 0.4 0.594 0.2546 25.46
3 0.6 0.634 0.2322 23.22
4 0.8 0.629 0.2349 23.49
5 1.0 0.697 0.2009 20.09
6 Muestra 0.604 0.2488 24.88
CALCULOS GRAFICOS Y TABULACION DE DATOS:

X Concentracin Y Absorbancia XY (X)2

0 0.521 0 0

0.4 0.594 0.2376 0.16

0.6 0.634 0.3804 0.36

0.8 0.629 0.5032 0.64

1.0 0.697 0.6970 1

Muestra 0.604
 GRAFICO:
 RECTA:

DESPEJANDO X:
 1ERA DILUCIN:

2DA DILUCIN:
 HALLANDO LA TRANSMITANCIA:
DISCUSION:

EL DNS PRODUCE UNA COLORACIN QUE SE HACE MS INTENSA A MEDIDA

QUE AUMENTA LA CONCENTRACIN DE AZUCARES REDUCTORES QUE LO
EVIDENCIAMOS POR MEDIO DE LA LECTURA DE LA ABSORBANCIA EN EL
ESPECTROFOTMETRO.

CONCLUSION:
CON LA ABSORBANCIA PODEMOS HALLAR LA TRANSMITANCIA DESPEJANDO T EN
LA FORMULA.
EN EL TUBO 1 SE TUBO UNA ABSORBANCIA DE 0.521
EN EL TUBO 2 SE TUBO UNA ABSORBANCIA DE 0.594
EN EL TUBO 3 SE TUBO UNA ABSORBANCIA DE 0.634
EN EL TUBO 4 SE TUBO UNA ABSORBANCIA DE 0.629
EN EL TUBO 5 SE TUBO UNA ABSORBANCIA DE 0.697
EN EL TUBO 4 SE TUBO UNA ABSORBANCIA DE 0.604
GRACIAS