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INSTITUTO POLITCNICO NACIONAL

ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLGICAS


DEPARTAMENTO DE MICROBIOLOGA GENERAL

PRCTICA 4

AISLAMIENTO Y RECUENTO DE
BACTERIAS AEROBIAS Y ANAEROBIAS
FACULTATIVAS
6FV1

INTEGRANTES:

Alvarado Prez Kathya A. E4 / L 3 E3 / L 4


Germn Gaspar Jennifer
Silva Habana Laura Isabel
Zugaide Garca Edith
ANTECEDENTES
PARA ESTUDIAR LA FORMA Y FUNCIN DE LOS MICROORGANISMOS ES NECESARIO OBTENER
CULTIVOS PUROS.

En los primeros tiempos de la Microbiologa se utilizaban como sustratos slidos para inmovilizar los
microorganismos patatas o pan, con el inconveniente de la opacidad de estos sustratos.

La gelatina fue el primer agente solidifcate utilizado por 1881.- Entonces la gelatina fue sustituida por el agar;
Koch, sin embargo, presentaba el inconveniente de que introducido por Fanny Eilshemius.
algunos microorganismos son capaces de utilizarla para
su crecimiento.

Hesse
CULTIVO PURO

Es aquel que contiene una sola clase de microorganismo

Son tiles por diferentes razones: mantienen los organismos viables, permiten hacer sub cultivos para
someterlos a diferentes anlisis e intercambiarlos con otros laboratorios. Para obtenerlo es necesario
recurrir a las tcnicas de aislamiento.

PROCESO DE AISLAMIENTO

Consiste en disponer de la descendencia de un individuo (clula)


inmovilizada sobre la superficie de un medio slido y separada
del resto de individuos presentes en el cultivo mixto. Esta clula,
dar lugar a una descendencia llama colonia.
Cada colonia contiene clulas idnticas y con el mismo origen y
propiedades. Por ello lo ms correcto es hablar de unidades
formadoras de colonias (UFC) al referirnos al origen de una
colonia.
El cultivo descendiente de una misma colonia es un cultivo puro.
INTRODUCCIN
Los microorganismos generalmente se encuentran en la naturaleza como
poblaciones mixtas, y para poder caracterizar e identificar un tipo
particular de microorganismos, este debe ser aislado y conservado como
un cultivo puro o axnico
NATURALEZA DE LA MUESTRA ENRIQUECIMIENTO DE MICROORGANISMOS EN LA
- Lquida MUESTRA
- Slida Temperatura
- Fsicas pH
Presin osmtica

Fuentes de:
- Qumicas Azufre Carbn Factores de crecimiento orgnico
Fosforo Nitrgeno Oxgeno
FSICAS

-Psicrfilos: Microbios con afinidad por el


frio
TEMPERATURA -Mesfilos: Microbios con afinidad por T moderadas

-Termfilos: Microbios con afinidad por T altas

Neutrfilos

-Acidfilos
pH
-Alcalfilos

-Halfilos estrictos: Concentraciones elevadas


de sales
PRESIN
OSMTICA -Halfilos facultativos: No requieren
concentraciones elevadas de sales.
QUMICAS
AISLAMIENTO DE MICROORGANISMOS
Para el aislamiento de microorganismos se cuenta con varios mtodos, los ms usados son:

MTODO DE LA ESTRA CRUZADA MTODO DE DILUCIONES

Consiste en la dilucin de un cultivo mediante el CUALITATIVO: Porque permite diferenciar las


estriado en la superficie de un medio slido. diferentes morfologas coloniales

CUANTITATIVO: Porque permite conocer el


nmero de microorganismos que hay en una
suspensin.
Agar Cuenta Estndar
Composicin

Triptona de
casena (5g)

Extracto de
levadura(2.5g)
pH 7

Glucosa(1g)

Uso: Cuenta de colonias de


organismos comunes
Agar(15g)
OBJETIVOS

Aprender y practicar las tcnicas de aislamiento por medio de la estra


cruzada y el mtodo de las diluciones.

Hacer la estimacin cualitativa y cuantitativa del contenido microbiano


de diferentes grupos de microorganismos de las muestras de suelo.
METODOLOGA
I. Aislamiento de bacterias por el mtodo de las diluciones
0.5 mL Vol. De transferencia
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 0.5g suelo

4.5 mL H2O
10-8 10-9 10-10
Destilada
Homogenizar y
sedimentar 3 min

Extender alcuota
c / barrilla acodada

Alcuotas por duplicado de 0.1 mL

alcohol
10-8 10-9 10-10
Esterilizar la barrilla acodada
Etiquetar
II. Aislamiento de bacterias por el mtodo de estra cruzada

Tapar con la tapa


10-1 hacia abajo

Tomar una asada


Esterilizar el asa
entre cada serie Incubar 48 -96 hrs.
de estras A 28C
10-1 10-1 10-1
RESULTADOS
I.- AISLAMIENTO DE BACTERIAS POR EL II.- AISLAMIENTO DE BACTERIAS POR EL
MTODO DE LAS DILUCIONES MTODO DE ESTRA CRUZADA

Agar CE; Incubadas a Agar CE; Incubadas a


28C / 48horas 28C / 48horas
CALCULO DE UNIDADES
FORMADORAS DE COLONIAS
(UFC)

UFC/mL
REFERENCIAS
Gerard J. Tortora, Berdell R. Funke, Christine L. Case. Introduccin a la microbiologa. 9a Edicin. EE.UU.
Editorial Panamericana.2007. p 160 170.
Disponible en:
https://books.google.com.mx/books?id=Nxb3iETuwpIC&pg=PA166&dq=microorganismos++anaerobios+facultativos&h
l=es-419&sa=X&ved=0ahUKEwi27uv2xv_VAhUDWSYKHRQLBKsQ6AEIJjAA#v=onepage&q&f=false
http://www.uib.cat/depart/dba/microbiologia/micro2/practicas.pdf. P 21