Generacin ex vivo de macrfagos modificados

genticamente a partir de clulas madre

pluripotentes inducidas por humanos.
 FONDO
Las clulas madre pluripotentes, incluyendo las clulas madre pluripotentes
inducidas (iPSCs), tienen la capacidad de diferenciarse hacia las tres capas
germinales y han sido destacadas como una atractiva fuente celular para el campo
de la medicina regenerativa. As, la expresin estable de transgenes teraputicos
en iPSCs, as como su progenie derivada de linaje hematopoytico, puede sentar
las bases para terapias innovadoras de reemplazo celular.
 MTODOS
Se han utilizado lneas iPSC humanas modificadas genticamente mediante
tecnologa vectorial lentiviral o integracin dirigida de genes informadores para
evaluar la expresin transgnica durante la especificacin hematopoytica y la
diferenciacin hacia macrfagos.
 RESULTADOS:
El uso de vectores lentivirales equipados con un elemento de apertura de la
cromatina ubicuo (CBX3-UCOE) as como el direccionamiento mediado por
nucleasa de dedo de zinc de un casete de expresin en el sitio de integracin del
virus adeno-asociado humano 1 (AAVS1) result en una expresin transgnica
estable en IPSCs. Cuando los iPSCs se diferenciaron a lo largo de la va mieloide en
macrfagos, ambas estrategias produjeron una expresin transgnica sostenida
durante el proceso de especificacin hematopoytica, incluyendo macrfagos
CD14 + y CD11b + maduros.
 CONCLUSIN:
La combinacin de la tecnologa iPSC humana con tecnologa vectorial lentiviral o
edicin de genoma basado en nucleasa diseadora permite la generacin de
macrfagos derivados de iPSC transgnicos con expresin transgnica estable que
puede ser til para nuevas terapias de sustitucin de clulas y genes.