UNIVERSIDAD TCNICA DEL

NORTE
FACULTAD DE INGENIERA EN CIENCIAS AGROPECUARIAS Y AMBIENTALES
CARRERA DE INGENIERA AGROINDUSTRIAL

INDUSTRIA DE EXTRACTOS

DETERMINACIN DE ALCALOIDES CUATERNARIOS Y AMINOCIDOS BASES

DETERMINACIN DE SAPONINAS Y ESTEROIDES INSATURADOS

Integrantes:
Flores Tixicuro Jessica
Maribel
Glvez Cadena Erika
Estefana
Mircoles, 7 de diciembre del 2016
 DETERMINACIN DE ALCALOIDES
CUATERNARIOS Y AMINOCIDOS BASE

Sustancias orgnicas nitrogenadas con carcter

bsico y mayoritariamente de origen vegetal.
 HISTORIA
(1886)
Se sintetiza el primer
alcaloide la conina.
Pelletier, Caventou y
Robiquet
(1817)
Sertuner
Aislaron la estricnina,
(1805) narcotina y codena.
Asla la morfina.
 CARACTERSTICAS

Compuestos orgnicos.
Se forman a partir de los aminocidos.
Origen vegetal.
Sustancias nitrogenadas.
Carcter bsico.
Contienen nitrgeno.
Estructura qumica compleja.
Txicos.
Actividad fisiolgica incluso a bajas dosis.
Se precipitan con ciertos reactivos.
 PROPIEDADES
Alcaloides Alcaloides no
Oxigenados Oxigenados

Slidos y cristalizables Lquidos y voltiles

Sabor desagradable Olorosos

Incoloros e inodoros
Arrastrables en corriente
de vapor de agua
LOCALIZACIN
Corteza

Frutos Races

Semillas

Hojas
 INTERS INDUSTRIAL
Farmacologa
Analgsico (morfina)
Anestsico (conina)
Estimulante (cafena, nicotina)
Emticos (emetina)
Antitumorales (taxol)
Toxinas y antibiticos (quinina,
sanguinarina)
FUNCIN EN LOS VEGETALES

Reguladores del crecimiento.

Sustancia de reserva nitrogenada
para la sntesis proteica.
Funcin protectora frente a
ataques de distintos predadores
(parsitos, insectos).
 EXTRACCIN DE ALCALOIDES
Operaciones previas: se trata de acondicionar el material antes
de ser sometido a la extraccin, estos procedimientos pueden
abarcar secado, pulverizacin y desengrasado.

Extraccin: Teniendo en cuenta principal mente el carcter

bsico y las caractersticas de solubilidad de cada alcaloide se
utilizan diferentes disolventes. El contacto de estos disolventes
con el material puede realizarse por maceracin, mezcla,
agitacin, extraccin continua.

Procedimiento A: La materia prima pulverizada se macera con

agua o alcohol dbilmente acidificados. Para purificar este
extracto se lo agita con agua acidulada y se deja reposar para
su separacin en capas.

Procedimiento B: La materia prima, pulverizada, se humedece con

soluciones diluidas de amoniaco o carbonato de sodio para liberar a los
alcaloides. Luego se procede a la extraccin con disolventes orgnicos
como cloroformo, diclorometano, ter etlico, acetato de etilo, que no
disolvern a los alcaloides de estado libre, si no contenidos de otros
componentes liposolubles de la muestra. El extracto se trata luego con
agua acidificada para que los alcaloides libres de la fraccin orgnica
formen sales y pasen as a la fraccin acuosa.
 DETERMINACIN

Reacciones Reacciones
Reacciones
de de
coloreadas
precipitacin cristalizacin
CROMATOGRAFA
ALCALOIDES EN EL MERCADO
 DETERMINACIN DE SAPONINAS Y
ESTEROIDES INSATURADOS

Caractersticas:
Forman espumas al agitarlas en agua.
-Esteroides: Solubles en lpidos Son txicas.
Saponinas Existe una gran variedad de plantas
(GLUCSIDOS) que contienen saponinas en
diferentes concentraciones (yuca,
-Azcar: solubles en agua ginseng, quinua, entre otros).
Tienen una accin irritante sobre las
clulas
 INTERS INDUSTRIAL

Industria de la medicina
Las saponinas de la quinua han
mostrado un efecto inhibidor de
hongos
Actividad antiviral
Actividad molusquicida (contra el
caracol que afecta cultivos de arroz)
 Extraccin de Saponinas

Por su carcter glicosdico son insolubles en solventes apolares

Materia Prima: Procedimiento:

Plantas o 1. Secado y molido
Animales 2. Desengrasado con solventes apolares (ter de petrleo o n-
hexano)
3.Extraccin con etanol o metanol y agua.
4.El estracto acuoso libre de alcohol se liofiliza o se concentra en
un rotavapor.
5.El concentrado debe pasar por resinas de intercambio inico
para eliminar sustancias inicas.
6.Finalmente pasa a travs de Sephadex LH-20 para separar
saponinas de pptidos y macromolculas.
PRUEBA DE ESPUMA
Tomar una muestra de 1ml
con saponinas y aadir
9ml de agua

Agitar por 30 segundos

Dejar reposar 15 minutos

La proporcin de
saponina se mide de
acuerdo a la altura de la
espuma
 ENSAYO DE HEMLISIS

La muestra debe ser Tubos de ensayo Asuspencin de

Pretratamiento de MP

libre de taninos. Cajas Petri con globulos rojos en

Los taninos se agar-sangre una solucin salina
eliminan por Cajas petri con se aade la muestra
tratamiento con gelatina-sangre con saponinas.

Procedimiento
MnO, forma Si los globulos rojos
complejos insolubles se ropen lisan o
que se eliminan por hemolizan, la
Materiales

filtracin. prueba es positiva.

La prueba se realiza
por duplicado.
 Determinacin del contenido de saponina
por espectrofotometra UV-VIS

Protocolo establecido por Monje y Raffaillac:

Reactivo de Lieberman-
Burchard (LB), forma
productos coloridos.
LB: mezcla al 16,7 % de
Anhdrido actico en cido
sulfrico concentrado.
Preparar 2ml de muestras de
unos 8 concentrados
diferentes.
Aadir 7ml del reativo LB en
cada muestra.
Agitar 20 segundos.
Dejar reposar por 30min.
Someter a
espectrofotometra.
Elaborar una curva de
calibracin Absorbancia vs.
Concentracin .
Los picos de cada grfica
representan las saponinas, los
picos mas bajos no
corresponden a saponinas.
A partir de la curva de
calibracin se pudo
cuantificar el porcentaje de
saponinas presentes en cada
muestra evaluada

Reactivos Procedimiento Lectura

Determinacin de saponinas por
cromatografa liquida de alta resolucin HPLC

Se preparan las muestra 30mg de

agua/1ml de saponina.
Agitar la mezcla durante 3 minutos en
vasos de precipitacin y cerrados con
parafilm.
Colocar las muestras en el equipo de
comatografa.
Clculos del contenido de saponinas:

Para dicho clculo se emplea la Donde:

siguiente ecuacin:
X = porcentaje de saponina en el
extracto
A = rea total de la muestra
B = rea total del estndar
Y = porcentaje de saponina
R = rendimiento de extraccin.