INFLUENCIA DE VISCOZYME L SOBRE EL RENDIMIENTO EN

LA EXTRACCIN DEL ACEITE DE ALMENDRAS DE ZAPOTE

MAMEY (Pouteria sapota)

TRABAJO PROFESIONAL PARA OPTAR EL TITULO DE INGENIERO BIOQUMICO

Autora: Isabel Villatoro Toledo

Asesor: Dra. Sandy Luz Ovando Chacn

TUXTLA GUTIERREZ, CHIAPAS; MAYO 2016.

ISABEL VILLATORO TOLEDO 1

 INTRODUCCIN
ZAPOTE MAMEY
(Pouteria sapota)
Cuando la fruta se
industrializa para
procesar su pulpa,
se generan diversas
cantidades de
residuos.

La produccin e industrializacin del

zapote mamey ha observado
ampliaciones importantes. Sin Su semilla, ha sido objeto
embargo, todava es muy poca la de investigaciones debido
investigacin que se ha realizado en a su alto contenido de
torno a sus mltiples propiedades. aceite.

2
JUSTIFICACIN

La industria procesadora de la La industria del aceite persigue

pulpa de mamey, genera optimizar sus procesos de
residuos como las semillas, que extraccin, con tecnologas que
pueden ser aprovechadas para reduzcan el consumo energtico y
la obtencin de aceite. que sean seguras para el medio
ambiente.

Se propuso incrementar los rendimientos de extraccin de

aceite de la almendra de zapote mamey empleando un
mtodo de extraccin por centrifugado y asistida
previamente por accin enzimtica, comparando los
rendimientos con una extraccin convencional por
disolventes.

3
 OBJETIVOS

OBJETIVO GENERAL

Evaluar el efecto del pretratamiento enzimtico con Viscozyme L sobre el rendimiento y la composicin en
la extraccin de aceite obtenido de almendras de zapote mamey (Pouteria sapota).

OBJETIVOS ESPECFICOS:

Determinar las condiciones adecuadas de concentracin de enzima y pH sobre la hidrolisis enzimtica

de zapote mamey (Pouteria sapota) para maximizar la eficiencia de extraccin de aceite.

Comparar los rendimientos de extraccin de aceite obtenidos por el mtodo convencional Soxhlet y
por el mtodo acuoso-enzimtico.

Determinar el efecto de la extraccin acuosa-enzimtica sobre el perfil de cidos grasos del aceite de
almendras de mamey.

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FUNDAMENTO TERICO
Clasificacin taxonmica del mamey.
Clase Angiosperma
Subclase Dicotiledneas
Orden Ebanales
Familia Sapotaceae
Genero Pouteria
especie sapota
Balerdi y col, 2009. Zapote Mamey
(Pouteria sapota)
Laiz-Saldaa y col, 2009.

El rbol de mamey
Balerdi y col, 2009.

5
6
 ESTRUCTURA DE SEMILLAS OLEAGINOSAS

Las clulas de las semillas

oleaginosas estn rodeadas por una
pared celular conformada
principalmente por:

celulosa
Hemicelulosa
Lignina
pectina

Fuente: Rosenthal y col, 1996.

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 ENZIMAS

caractersticas

aceleran las reacciones qumicas

son especficas
funcionan en concentraciones
molar mnimas

Oxidoreductasas
Transferasas
Hidrolasas
Liasas
Isomerasa
Lipasas Amilasas enlace -1,4-glucosidico
Ligasas Glucoamilasas
Proteasas
carbohidrasas Dextranasas
Lactasas
Invertasas
Pectinasas
glucanasas accin hidroltica
Celulasas sobre los enlaces
(1,4) de diversos
8
ISABEL VILLATORO TOLEDO hemicelulasas
polisacridos
 CASOS DE ESTUDIOS DEL USO DE ENZIMAS
USO INDUSTRIAL DE ENZIMAS
EN PROCESOS DE EXTRACCIN DE ACEITE

AUTORES
Ziga y col, (2003) Tratamiento enzimtico en la
extraccin de aceite de semilla de
uva, Vitis vinfera por prensado en
fro.
Passos y col, (2009). Incremento de la extraccin con
fludos supercrticos del aceite de
la semilla de uva usando
pretratamiento enzimtico de la
semilla de uva.
Rojas-Morales y col, Efecto del pretratamiento
(2011) enzimtico en el proceso de
obtencin de aceite de la semilla
del mango (Mangfera Indica L.).
Taha y col, (2007) Pre-tratamiento de hojuelas de
algodn con enzimas proteasas y
amilasas para incrementar los
rendimientos de extraccin de
Fuente: Carrera, 2003. aceite.

9
 METODOLOGIA

Preparacin de la materia prima.

Pesado de los Separacin de Pesado de cada

frutos enteros cscara, pulpa y una de las partes Lavado y secado
de zapote semillas de los anatmicas del de las semillas
mamey frutos fruto

Ruptura de la
Troceado de la
Secado a 70C, 12 Pesado de la semilla y
almendra (3 mm
almendra extraccin de la
horas de espesor)
almendra

10
 EXTRACCIN CON TRATAMIENTO ENZIMTICO

No. de tratamiento pH Concentracin de enzima

Adicin de 5 mL de
(% V/V)
Pesado de la agua destilada e
1 semilla (5 g) hidratacin por 24
2 0.2
horas
3
4
5 5 0.5
6 Ajuste de pH, a 5 y Adicin de 10 mL
7 6, con cido de agua
8 1.0 actico 0.1 M destilada
9
10
11 0.2
12
Adicin de enzima
13 Incubacin a 50C,
6
comercial
14 0.5 200 rpm, 4 h
Viscozyme L (de
15
acuerdo al grafico)
16
17 1.0
18 11
 Ficha tcnica de la enzima Viscozyme L centrifugacin
Actividad Arabinasa, celulasa, -
enzimtica glucanasa, hemicelulasa y
xilanasa Centrifugacin de Separacin del
muestras aceite de la
Apariencia liquido color marrn
hidrolizadas (4000 torta
Densidad 1.21 g/mL rpm, 20 min., 25C)
Temperatura de 50-60C
actividad
pH de actividad 3.3 - 6 Almacenamiento
del aceite a -5C
hasta su anlisis

Extraccin por solvente

Extraccin en Separacin de la Cuantificacin del

Pesado (5 g de Soxhlet durante 4 mezcla hexano- aceite y
muestra) h con hexano aceite en rota almacenamiento
vapor en refrigeracin

12
 PERFIL DE CIDOS GRASOS DEL ACEITE DE LA ALMENDRA DE ZAPOTE MAMEY

transesterificacin del aceite

Adicin de 1.0 mL Incubacin a 80C

100 L de Adicin de 1.0 mL
de NaOH/MeOH (20 min., agitacin
aceite de BF3/MeOH 14%
0.5 M grado HPLC constante)

Incubacin a 20C
(20 min, agitacin
constante)

Extraccin de los
metil steres (1.0
mL de hexano
grado HPLC)

13
 PERFIL DE CIDOS GRASOS DEL ACEITE DE LA ALMENDRA DE ZAPOTE MAMEY

Cromatografa de gases acoplado a espectrometra de masas (CG-EM)

de los metil steres

Acondicionamiento Inyeccin en Split Temperatura a 210C

de temperatura de de 1 L de muestra con rampa de
inicio a 70C por 5 (temperatura del calentamiento de
min. inyector 250C) 10C/min

Comparacin de los
espectros de masas Luego a 225C a De 210C pasa a
obtenidos con NIST una velocidad de 213C a una
MS Library versin 5C/min durante velocidad de
A.00.1995. 20 minutos 1C/min
Cromatgrafo de gases Agilent Technologies 5975 inert XL
Columna DB-Wax (Agilent Technologies)
Gas acarreador helio 1mL/min
14
RESULTADOS

porcentajes para cada componente del fruto en relacin con la masa

total de la fruta
Resultados Sols-Fuentes y col, 2015.
obtenidos
Parte del fruto maduros inmaduro maduro
Porcentaje (%)
Porcentaje(%) Porcentaje(%)

73.42
Pulpa 69.10 70.95

18.94
Cscara 16.21 14.54

7.97
Semilla 14.46 14.31

4.12
Almendra 10.07 8.83

15
Rendimientos de aceite para
muestras a pH 5 y 6 a diferentes
concentraciones de Viscozyme L .
pH Conc. de enzima % aceite
1% 40 4.24
6
0.5% 38 2.00 Anlisis de varianza para el porcentaje de aceite.
0.2% 32 6.00
pH Conc. de enzima % aceite Fuente Suma de Gl Cuadrado Razn-F Valor-P
1% 37.33 1.15 Cuadrados Medio
5
0.5% 38.67 1.15
EFECTOS
0.2% 40.67 1.15
PRINCIPALES
A:concentracin 5.77778 2 2.88889 0.31 0.7395
B:pH 10.8889 1 10.8889 1.17 0.3013
INTERACCIONES
AB 67.1111 2 33.5556 3.60 0.0598
RESIDUOS 112.0 12 9.33333
TOTAL 195.778 17
(CORREGIDO)
16
 Grfico de interacciones del efecto de la concentracin
de Viscozyme L sobre
Grfico el porcentaje de aceite.
de Interacciones

42 pH
5
6
40
PORCENTAJE

38

36

34
0.2 0.5 1
concentracion

17
Rendimientos de aceite para extraccin con y
sin tratamiento enzimtico.

Extraccin con Extraccin Laiz Saldaa y

tratamiento con col, 2009.
enzimtico solvente
Porcentaje de 40.67 1.15 24.674.16 37.5
aceite (%)

Incremento del rendimiento del proceso de

extraccin de aceite de la semilla de mamey.
Incremento del
rendimiento (%)
Resultado obtenido 39.35
Ziga y col, (2003) 27
Passos y col, (2009) 44

18
 Perfil de cidos grasos del aceite de la semilla de mamey
(Pouteria sapota).
cidos grasos Mtodos de extraccin Sols-Fuentes y col,
(2015)
Enzimtico (%) Solvente (%) Extraccin Soxhlet (%)
Oleico 18:1 51.68 3.80 52.310.82 48.621.95
Esterico 18.0 31.76 4.20 31.140.30 28.65 1.82
aN.I: no identificado
Palmtico 16.0 9.92 2.00 10.690.37 10.50 2.63
Linoleco 18:2 5.10 2.3 4.001.5 10.77o.o1 b AGS: cidos grasos saturados
Araqudico 20:0 1.040.19 0.960.19 0.360.19 cAGMI: cidos grasos
Linolnico 18:3 0.260.05 0.150.11 0.580.21
Lurico 12:00 0.040.01 0.050.04 -------- monoinsaturados
Caprlico 8:0 0.030.02 -------- --------- dAGPI: cidos grasos
Cprico 10:0 0.010.0 --------- ----------
poliinsaturados
Gondoico 20:1 trans --------- 0.190.03 ----------
Behnico 22:0 ----------- ----------- 0.400.40
N.I a 0.17 0.02 0.51 0.06 0.3
AGS b 42.8 42.84 39.9
AGMI c 51.68 52.5 48.6
AGPI d 5.36 4.15 10.7
19
 Perfil de cidos grasos del aceite de la semilla de mamey
(Pouteria sapota).

cidos grasos Mtodos de extraccin Salinas y

Enzimtico Solvente col,2012
Oleico 18:1 51.68% 52.31% 37.3 %
Esterico 18:0 31.76% 31.14% 34.4 %
Palmtico 16:0 9.92% 10.69% 26.2 %

20
 CONCLUSIONES

El uso de Viscozyme L , permiti aumentar el rendimiento de extraccin hasta

un 39.35%.

La mxima eficiencia de extraccin con Viscozyme L (40.67 %) se alcanz

usando un pH de 5 y una concentracin de enzima de 0.2% a una temperatura
de 50C.

El pH ptimo con Viscozyme L es a 6.

La extraccin con Viscozyme L permite que el aceite conserve el olor

caracterstico de las semillas, en comparacin con el aceite obtenido por
Soxhlet.

21
22 ISABEL VILLATORO TOLEDO