Informacin general

Clases tericas y practicas semanales.

Cambios de comisin: slo en las dos primeras semanas de

clases con el correspondiente trmite en despacho de
alumnos (presentar constancia en la ctedra).

Tendrn 2 exmenes parciales escritos terico-prcticos.

 Promocin:
Asistir al 80 % de las clases prcticas. DOS FALTAS.
Aprobar al menos con 7 puntos los 2 exmenes parciales. NO SE
PROMEDIAN LAS NOTAS.
Tener aprobadas las asignaturas correlativas.
No se pueden recuperar parciales para promocionar.

Regularizacin:
Asistir al 80% de las clases prcticas. DOS FALTAS.
Aprobar al menos con 4 puntos los 2 exmenes parciales. NO SE
PROMEDAN LAS NOTAS.
Se puede recuperar un examen parcial por ausencia o aplazo.
 PRCTICO N 1

Tcnicas para el estudio de microorganismos del suelo

Objetivo: Conocer las tcnicas bsicas para el anlisis

microbiolgico del suelo

1) Normas prcticas para el muestreo de suelo

2) Tcnicas para el cultivo de microorganismos
3) Tcnicas de observacin al microscopio
4) Mtodos de aislamiento y conservacin
 Normas prcticas para el muestreo de suelo

1) Diseo de muestreo:
Cantidad de muestras: topografa y heterogeneidad del lote
Forma de muestreo: cultivo, sistema de labranza
Profundidad: 0 20 cm

2) Acondicionamiento de las muestras

3) Preparacin de las muestras en laboratorio

Cantidad de muestras: topografa y heterogeneidad del lote

Loma
15 Submuestras = 1 Muestra

Medialoma

Bajo
Agricultura de Precisin

Imagen Satelital Mapa de Rendimiento Mapa de Ambientes

 Elementos de muestreo

Pala Barreno Manual Barreno Hidrulico

 Forma de muestreo: cultivo y sistema de labranza

Siembra directa Labranza convencional

Rastrojo de maz Rastrojo de soja Suelo laboreado

 Forma de muestreo: profundidad

0 cm.

20 cm.
 Acondicionamiento de las submuestras

~200 g.
 Preparacin de las muestras en laboratorio

Oreado
Mnimo 24 hs.

Tamizado

Embolsado y
Rotulado
Conservacin
Visualizacin de microorganismos: porta objeto enterrado

Suelo en estudio Riego Portaobjeto enterrado

Incubacin
 Actividades

1) Preparacin de muestras de suelo en laboratorio:

tamizar, embolsar y rotular.

2) Visualizacin de microorganismos de suelo:

enterrar un portaobjeto.
 Tcnicas para el cultivo de microorganismos

Requerimientos para el cultivo de microorganismos en laboratorio:

1) Condiciones de asepsia: esterilizacin

2) Medios de cultivos

3) Condiciones ambientales
 Condiciones de asepsia: esterilizacin

Esterilizacin: eliminar todos los organismos vivos

Mtodos de esterilizacin:
Calor: hmedo y seco
Radiacin
Filtracin
Productos qumicos
 Calor hmedo: Autoclave
Combinacin de calor, presin y humedad
Para sustancias acuosas
Temperatura de esterilizacin: 121C - 20 minutos

A gas con regulacin manual

Elctrica con
regulacin automtica
 Calor seco: Horno de esterilizacin

Para materiales estables al calor

Vista exterior (vidrio, metal, porcelana etc.)

Vista interior Temperatura de esterilizacin: 160 C

Tiempo: 2 hs
 Otros mtodos de esterilizacin

Radiacin UV: superficies,

aire y agua

Filtracin: soluciones Filtro

lbiles

Agua Oxigenada
Alcohol etlico
Productos qumicos: mesada, Hipoclorito
Formol
manos, tapones, etc.
Bicloruro de mercurio
 Medios de cultivos

Definicin: mezcla balanceada de requerimientos nutritivos para el

crecimiento de microorganismos

Tipos:
Generales
Selectivos

Composicin qumica: fuente de carbono, fuente de nitrgeno,

fuente de energa, base mineral y factores de crecimiento

Caractersticas: lquidos o slidos: agentes solidificantes

 Composicin de medios de cultivos

Medio selectivo: Fijadores de Nitrgeno

Medio general
FUENTE COMPUESTO CANTIDAD
FUENTE COMPUESTO CANTIDAD
Fuente de
Cy Sucrosa 20 g Fuente de C Almidn 12 g
energa y energa
Fosfato di potsico 0.05 g Fuente de N NO3 Na 0.5 g

Fosfato 0.15 g PO4 HK2 1.0 g

monopotsico
Base
Cloruro de calcio 0.01 g mineral SO4 Mg 7 H2O 0.5 g
Base
mineral
Sulfato de 0.2 g Agente Agar 15 g
magnesio solidificante
Molibdato de sodio 0.002 g Agua Agua destilada 1000 ml

Cloruro frrico 0.01 g pH = 7

Carbonato de 0.1 g
calcio
Agua Agua destilada 1000 ml

pH = 7
 Preparacin de medios de cultivo

Pesar componentes slidos:

encender colocar recipiente para tarar

pesar

colocar el componente
registrar la a pesar
lectura
 Disolver con agua destilada: hidratar

componentes slidos agregar agua

disolver
 Regular pH: pHmetro

soluciones reguladoras encendido y lavado lectura

proteccin del electrodo lavado del electrodo

 Preparacin de medio slido

medio lquido agregar agar

fundir al calor medio agarizado

 Fraccionar y acondicionar para esterilizar

Fraccionamiento de
medio lquido

Fraccionamiento de
medio slido
(en caliente)

Acondicionado
para esterilizar
Esterilizar en autoclave

Medios en Pico de flauta

Cultivo de microorganismos del suelo en medio lquido

Siembra Dilucin

Incubacin

Actividad: colocar una alcuota de suelo en medios general y selectivo.

Tamao del
lote
Cantidad Muestreo Profundidad
0-20 cm.
de de suelo con
muestras rastrojos
Topografa

Composicin

n submuestras

Guardar en
conservadora
Una muestra

Preparacin de muestras en laboratorio

Oreado Tamizado Envasado y Rotulado Conservacin en heladera

 Prctico 1 Laboratorio Prctico 3

Esterilizacin Medio de cultivo Observacin Aislamiento

Autoclave - horno
Radiacin
Filtracin
Productos qumicos
Composicin qumica Preparacin de medios

Base mineral Lquidos Slidos

Fuente de carbono
Fuente de energa Pesar drogas Pesar drogas
Agua Disolver con Disolver con agua destilada
agua destilada Regular pH
Regular pH Agarizar
Fraccionar Fundir
Fraccionar

Esterilizacin en autoclave

* Visita al Laboratorio de Siembra de suelo

Microbiologa Agrcola F.C.A. Incubacin