Aspectos generales en

Microbiologia clnica
Escuela de medicina: UMAR
Ilse Valderrama Heller, 2008
Definicin de microbiologa
Ciencia que estudia los seres vivos que no se
pueden ver a simple vista
mikros (pequeo)
bios (vida)
logos (ciencia)
Esta definicin implica que su objeto de
estudio est determinado por la metodologa:
Microscopio
Tcnicas de cultivo puro en laboratorio
etc.

Ilse Valderrama Heller, 2008

 Tamao pequeo:
consecuencias biolgicas
Tamao pequeo
intercambio ms eficiente,
permite mayor velocidad
metablica
La relacin S/V es muy alta
Mayor contacto directo con
el medio (reciben de modo
inmediato las influencias
ambientales)
Gran tasa de entrada de
nutrientes
Altas tasas de crecimiento
Gran tasa de salida de
productos de desecho

Ilse Valderrama Heller, 2008

Ramas que estudia la microbiologa:
facilitar su estudio
Bacteriologa
( bacterias y arqueobacterias)
Micologa
Hongos (unicelulares y filamentosos)
Virologa ( parasito intracelular)
Virus, priones
Parasitologa
Protozoos (unicelulares)
Metazoos (pluricelulares)
Helmintos (platelmintos y trematodos)

Ilse Valderrama Heller, 2008

 DIVERSIDAD MICROBIANA ACELULAR

VIRUS PRIONES

TIPO CLULAR

PROCARIOTA EUCARIOTA

BACTERIA ARQUEA HONGOS PARASITOS

PROTOZOOS

METAZOOS
Ilse Valderrama Heller, 2008
 BACTERIAS

VIRUS
PROTOZOOS

Ilse Valderrama Heller, 2008

HONGOS
Helmintos
 TIPOS
CELULARES

PROCARIONTE EUCARIONTE

Protistas
Bacterias Hongos
Arquea Plantas
Animales

Ilse Valderrama Heller, 2008

Ilse Valderrama Heller, 2008
 Caracterstica Procariontes Eucariontes

Membrana nuclear Ausente Presente

ADN Desnudo y circular con histonas

Cromosomas nico Mltiples
Divisin celular Fisin binaria Mitosis o Meiosis
Presentes
Mitocondria Ausente. Los procesos (con ribosomas 70S)
bioqumicos equivalentes
tienen lugar en la en clulas vegetales
Cloroplasto membrana citoplasmtica (con ribosomas 70S)

Ribosoma 70S (50S + 30S) 80S (60S + 40S)

Pared celular De murena De celulosa (vegetales)
Nuclolos Ausentes Presentes
Sistema de
Ausente Presente
Endomebranas
rganos de Cilios y flagelos
Flagelos (s/9+2)
locomocin Ilse Valderrama Heller, 2008 (9+ 2)
Ilse Valderrama Heller, 2008
 Clasificacin Organismos Vivos
La Teora de la Evolucin y la Teora Celular nos proveen las
bases para comprender la interrelacin entre los seres vivos

Sistema de Clasificacin Jerrquica de Whittaker (1969)

distribuyendo a los seres vivos en cinco reinos:
Moneras
Protistas
Hongos
Plantas
Animales

Ilse Valderrama Heller, 2008

 Clasificacin Organismos Analiz las
secuencia del
Vivos rRNA 16S,
descubriendo un
dominio entero de
Carl Woese (1980) construye un vida, las Archeas
rbol filogentico a partir de los y sus resultados
estudios del ARNr (cido condujeron a una
ribonuclico ribosmico) clasificacin en
Se basa en el estudio de las tres dominios
diferencias en las secuencias
de ARNr comunes a todos
los seres vivos
De este tronco comn surgiran en
la evolucin tres modelos de
clulas y una clasificacin en 3
dominios:
Bacteria
Archae
Eucarya

Ilse Valderrama Heller, 2008

Clasificacin Organismos
Vivos
En 1980 se vio la necesidad de modificar la clasificacin
de los 5 reinos agregando un sexto que corresponde a las
Arqueobacterias

Ilse Valderrama Heller, 2008

Los tres grandes dominios de la
vida

Ilse Valderrama Heller, 2008

 rbol filogentico Universal establecido por Carl Woese y su
discpulo Gary Olsen que muestra los tres Dominios

El termino "dominio" refiere a un nuevo taxn filogentico que

incluye tres lneas primarias:
Archaea, Bacteria y Eucarya; y en lnea descendente siguen seis
Reinos: I-Moneras, II-Arqueobacterias (obviamente separadas de
Moneras), III-Protistas, IV-Hongos, V-Plantas, VI-Animales.

Ilse Valderrama Heller, 2008

La gran profundidad evolutiva de
los microorganismos

Ilse Valderrama Heller, 2008

ARBOL FILOGENETICO UNIVERSAL

Ilse Valderrama Heller, 2008

Caractersticas diferenciales entre Bacteria, Archaea y Eukarya
Bacteria Archaea Eucarya
Peptidoglicano S No No
Lpidos Enl. ester Enl. eter Enl. ester
Ribosomas 70S 70S 80S
tRNA iniciador Formilme- Metionina Metionina
tionina
Intrones en tRNA No S S
RNA polimerasa Una Varias Tres
(4 subun) (8-12 subun) (12-14 subun)
Ribosoma sensible a:
Toxina diftrica No Sensible Sensible
Cloranfenicol Sensible No No
Kanamicina
Estreptomicina Ilse Valderrama Heller, 2008
 Diferencia entre la estructura celular de
Bacteria, Archaea y Eucarya
Propiedad Bacteria Eucarya Archaea
Membrana NO SI NO
nuclear
Organelos NO SI NO
Tamao 70S 80S 70S
ribosoma
Peptidoglicano SI NO NO
en la pared
Esteroles en NO SI SI
membrana (hopanoides)
Lpidos de Ester unidos Ester unido a Eter,
membrana a glicerol glicerol
Ilse Valderrama Heller, 2008 ramificados
Estructura y fisiologa
Bacteriana

Ilse Valderrama Heller, 2008

Estructura y funcin celular:
PROCARIOTA

BACTERIA ARQUEA

Ilse Valderrama Heller, 2008

 TAXONOMA
Rama de la biologa que se ocupa de Nombrar,
Organizar y Mostrar Relaciones entre seres vivos
Funciones:
1.Identificar y describir la unidad taxonmica
bsica o especie
2.Visualizar la forma apropiada de catalogar
esas unidades
Tiene tres disciplinas de apoyo:
La Clasificacin
La Nomenclatura
La Identificacin

Ilse Valderrama Heller, 2008

 TAXONOMIA MICROBIANA

CLASIFICACION NOMENCLATURA IDENTIFICACIN

REINO Caractersticas importantes de un

Es rotular o nombrar unidades microorganismo
definidas por clasificacin

DIVISIN GENOTIPICAS

SISTEMA BINOMIAL
CLASE FENOTIPICAS

Escherichia coli
ORDEN

FAMILIA

GENERO

ESPECIE

Ilse Valderrama Heller, 2008

Clasificacin POLIFSICA
Es la tendencia moderna. Consenso en la
integracin de distintos tipos de caracteres:
Fenotpicos: - clsicos (morfologa, nutricin, etc)
- marcadores quimiotaxonmicos
- perfil de protenas totales y
enzimas
Genotpicos: clsicos: % G+C
hibridacin DNA-DNA

nuevos: fingerprinting (ej. perfiles moleculares

por restriccin o amplificacin de ADN)

Filogenticos: basados en el gen del ARNr 16S

Ilse Valderrama Heller, 2008
Dominio
Phylum
Clase
Orden
Familia
Genero
Especie

Bacteria
Proteobacteria
Gamma Proteobacteria
Zymobacteria
Enterobacteriales
Enterobacteriaceae
Escherichia
Escherichia coli

Ilse Valderrama Heller, 2008

Treponema pallidum

Clasificacin cientfica
Reino Bacteria
Philo Spirochaete
Clase Schizomycetes
Orden Spirochaetales
Familia Siprochaetaceae
genero Treponema
especie T.pallidum
Nombre binomial
Treponema pallidum

Ilse Valderrama Heller, 2008

 Los agentes causales de enfermedades
infecciosas humanas pertenecen a :
Bacterias
Hongos
Parsitos : protozoos y metazoos
virus

Ilse Valderrama Heller, 2008

Clasificacin de las Bacterias de importancia medica

Ilse Valderrama Heller, 2008

 Las bacterias
son ms grandes y complejas
que los virus (0.1 a 5 ms m
de longitud).
DNA y RNA, pero sin ncleo.
Corresponde al dominio
bacteria
algunos requieren clula
husped y son por lo tanto
parsitos intracelulares
estrictos (p.ej. Chlamydia,
rickettsias, etc.).
Aunque incluyen muchos tipos
fisiolgicos distintos, y por lo
tanto pueden vivir en cualquier
tipo de ambiente,
evidentemente a nosotros nos
interesan las que pueden
colonizar el cuerpo humano.

Ilse Valderrama Heller, 2008

TAMAO: clula eucariota versus clula
procariota

Por lo general, ms pequeo que el de las

clulas eucariticas
Pero existen bacterias
Gigantes (>0,5 mm)
Enanas (<0,1 micra)
Un tamao tpico:
0,5 x 3 micras

Ilse Valderrama Heller, 2008

Tamao comparativo de
bacterias, virus y cidos
nucleicos
Ilse Valderrama Heller, 2008
Diversidad de procariotas: enfoque
biomdico v/s virus

Ilse Valderrama Heller, 2008

 Estructura de la clula bacteriana
Membrana
citoplasmtica
Pared celular
Citoplasma o masa
citoplasmtica
Material nuclear
E. accesorios
Cpsulas
Flagelos
Pili
Esporas

Ilse Valderrama Heller, 2008

Ilse Valderrama Heller, 2008
 Morfologa bacteriana
ESFRICA O ELIPSOIDAL
: COCOS
Son ms resistentes a los
cambios adversos del
ambiente como la
desecacin.
CILNDRICA: BACILOS
Pueden tomar ms
fcilmente los nutrientes
en solucin diluda
ESPIRAL:
ESPIRILOS O
ESPIROQUETA
Se propagan rpidamente

Ilse Valderrama Heller, 2008

 Bacilo nico

Vibrio

Diplobacilos

Estreptobacilos Espirilo

Cocobacilos

Espiroqueta

Forma estrellada Forma cuadrada

Ilse Valderrama Heller, 2008

Agrupamiento de las bacterias: Agrupamiento de las
a) cocos bacterias:b) bacilos

Diplobacilos

Estreptobacilos

cocobacilos

Ilse Valderrama Heller, 2008

 ESTRUCTURA bacteriana
Las estructuras bacterianas las
podemos clasificar, por razones
didcticas, en estructuras constantes o
accesorias.
Las estructuras constantes Las estructuras estn
accesorias:
son las estructuras esenciales presentes slo en algunas de ellas y
para la vida de la bacteria e aunque no son indispensables para la
incluyen vida, otorgan extraordinarias ventajas
adaptativas a las bacterias que las
el citoplasma poseen.
Cromosoma bacteriano cpsula, flagelos , esporas ,
la membrana celular y la fimbrias, etc.
pared celular.

Ilse Valderrama Heller, 2008

 Citoplasma
Actividad qumica y biosinttica
Protenas (enzimas, complejos
enzimticos, estructurales)
Ribosomas (70S: 55 protenas, rRNA
5S, 16S, 23S
mRNA, tRNA
Otras macromolculas, solutos,
agua , nutrientes , etc
No tienen citoesqueleto.
Nucleoide bacteriano: ADN
haploide, Circular, nico
Material gentico extracromosomal :
plasmidios

Ilse Valderrama Heller, 2008

 Inclusiones citoplasmticas
Algunas bacterias tienen
estructuras internas
Varian en cantidad y
nmero
Difieren en sus contenidos

grnulos de
almacenamiento -
polifosfato,azufre,
polihidroxibutirato
(PHBs), glucogeno
vesculas de gas
flotacin
Carboxisomas,
clorosomas.

Ilse Valderrama Heller, 2008

 Grnulos de polihidroxibutirato (PHBs)

vesculas de gas
flotacin

Ilse Valderrama Heller, 2008

Ribosomas 80S v/s 70 S

Ilse Valderrama Heller, 2008

 ADN cromosomal: nucloide
bacteriano
nico
Monocatenario
ADN
Sin histonas
Funciones celulares

Ilse Valderrama Heller, 2008

 Plasmidios
ADN extracromosomal
Resistencia
antibioticos
Metales pesados, UV
Sntesis de pigmentos

Ilse Valderrama Heller, 2008

Ilse Valderrama Heller, 2008
 Membrana celular
Composicin qumica
Funciones
Transporte de sustancias
Barrera de permeabilidad
En fottrofas: Estructuras
intracitoplasmticas(fotosinte
sis)
Respiracin celular
Agentes reforzantes:
esteroles
Archaea, membranas
adaptadas a condiciones
extremas - teres de alcohol
isoprenoide, algunas
monocapas

Ilse Valderrama Heller, 2008

Ilse Valderrama Heller, 2008
 PARED CELULAR
soporte fsico de la clula
la estructura ms externa
cuando no existe cpsula.
proteccin fsica a la
bacteria y tambin la protege
del shock osmtico, dada la
hipertonicidad celular.
algunos de sus elementos
participan en la interaccin
agente-hospedero,
facilitando la adherencia
a los tejidos
protegiendo la bacteria
de los mecanismos
inespecficos de
defensas o induciendo
una respuesta
inflamatoria.
El componente bsico de la
pared celular es el
peptidoglicano o murena.
Ilse Valderrama Heller, 2008
Dos grupos de bacterias carecen de
pared celular:
Mycoplasma que
poseen solamente
membrana celular
las formas L
derivadas de bacterias
que perdieron su
habilidad de sintetizar
su pared celular
MET de Mycoplasma
Resistente a la
penicilina G

Ilse Valderrama Heller, 2008

 Paredes de las eubacterias

Esto le da al peptidoglicano su estructura de red, determinando su resistencia.

La unin entre los tetrapptidos de cadenas vecinas es inhibida por los
antibiticos -lactmicos.
Existen diferencias en la composicin y estructura de la pared celular entre las
bacterias Gram (+) y Gram (-)

Ilse Valderrama Heller, 2008

 Bacteria Gram-
Gram +

Ilse Valderrama Heller, 2008

Estructura del Peptidoglicano

Ilse Valderrama Heller, 2008

 Ejemplos de entrecruzamientos en el
peptidoglucano

Directo (muchas Puente pentaglicina (algunas

Gram-negativas) Gram
Ilse Valderrama positivas
Heller, 2008
 PARED EN GRAM +
El pptidoglicano en varias
capas grosor (80 90%)
Atraviesan el peptidoglicano
polisacridos cidos,
denominados cidos
teicoicos.
Los cidos teicoicos son de
dos clases:
poliglicerol fosfato y
poliribitol fosfato.
Los poliglicerol fosfatos
estn unidos a la membrana
celular y se les denomina
cidos lipoteicoicos
los poliribitol fosfato o cidos
teicoicos estn unidos al Funciones:
peptidoglicano Estabilizacin del peptidoglicn
Adhesin celular (Adhesina)
Le dan la carga negativa a la envoltura
bacteriana
Ilse Valderrama Heller, 2008
 PARED EN GRAM -

La membrana externa contiene numerosas protenas, siendo las porinas las ms abundantes. El LPS
constituye una endotoxina, que se libera cuando la bacteria se divide o muere.
Se denominan as, porque forman poros que comunican el exterior con el espacio periplsmico.
Las porinas constituyen poros de difusin inespecficos que permiten el paso de sustancias
hidroflicas y no mayores de 700 daltons (aminocidos o disacridos).
Las porinas ms conocidas en E. coli son OmpC y OmpF.

Ilse Valderrama Heller, 2008

 PARED EN GRAM -

El LPS es una molcula anfiptica que contiene tres regiones

diferentes: el lpido A, el core y el antgeno O.
El lpido A, es un complejo de azcares, fosfatos, cidos grasos
y forma una bicapa con los fosfolpidos de la membrana.
Adems, es el responsable de la toxicidad del LPS.
El core, es un oligosacrido de 4 a 5 azcares, algunos
infrecuentes como las heptosas y un azcar de 8 carbonos,
denominado ceto-deoxioctanoico (KDO) . usualmente especfico
de especies
El antgeno O, est formado por cadenas de 25 o ms unidades
de azcares repetidas.

Ilse Valderrama Heller, 2008

Ilse Valderrama Heller, 2008
Ilse Valderrama Heller, 2008
GRAM + GRAM -

Ilse Valderrama Heller, 2008

 Bacterias de importancia medica que no
pueden ser observadas con la tincin Gram

Ilse Valderrama Heller, 2008

 Pared celular de Archaea
No contiene
peptidoglicano
Puede ser de
pseudopeptidoglicano
(pseudomureina) tie G+
pseudomureina cubierta de
proteina,tie G+
monocapa superficial de
proteina o glicoproteina, sin
pseudomureina (alg
halfilos,
alg.metanognicos y
termoacidfilos) tie G-
Uniones tipo eter acidos
grasos
Existen Archaea sin
pared
Ilse Valderrama Heller, 2008
caractersticas Gram + Gram -

Membrana externa - +

Pared celular Gruesa Delgada

Lipopolisacarido - +

Endotoxina - +

Acido teitoico Presente a menudo -

Esporulacion El algunas cepas -

capsula Presente a veces Presente a veces

Lisozima Sensible Resistente

Antibacteriana penicilina Mas susceptible Mas resistente

Producciom exotoxina Algunas cepas Algunas cepas

Ilse Valderrama Heller, 2008
 Sntesis de Peptidoglicano

Bactoprenol (C55 alcohol isoprenoide) -- carrier lipdico que

transporta el disacrido-pentapeptido del citoplasma al
periplasma y lo inserta en la pared celular en crecimiento
La transpeptidacin, es inhibida por penicilina
Ilse Valderrama Heller, 2008
 Transpeptidacin

Inhibido por la penicilina G.

Ilse Valderrama Heller, 2008

 Componentes no esenciales
Capsula
Pili sexual
Flagelo
Fimbria
Esporas
Plasmidos

Ilse Valderrama Heller, 2008


Cubiertas extracelulares
Glicocalix: Material externo a la pared celular
Cpsulas - Material en la superficie celular
Capas mucilaginosas - Material adherido, menos
fuertemente
Capa S: Subunidades proteicas o glicoproteicas. G+,
G- y Archaea. Pueden constituir la pared
Funciones
Proteccin contra defensas del husped (fagocitosis)
Proteccin contra desecacin
Proteccin contra virus, toxinas
Adhesin a superficies (clulas, objetos inanimados)
formacin de biofilms.
Protegen de protozoos , de ataques por agentes
antimicrobianos,etc
La mayora de las bacterias Gram (+) y Gram (-) sintetiza
una cubierta de naturaleza polisacrida que las rodea.
Los exopolisacridos son sintetizados en la membrana
citoplasmtica, atraviesan la pared celular y se establecen
afuera.
Se clasifican de acuerdo a la relacin con la superficie
exterior de la bacteria y a su grado de rigidez en cpsulas y
glicoclix.

Ilse Valderrama Heller, 2008

 Cpsulas: exopolisacaridos
Algunas bacterias segregan materiales mucosos: polisacridos,
polipptidos y complejos de polisacridos y protenas (glucoclix)
Cpsula: cuando el material est dispuesto de un modo compacto
alrededor de la clula
Capa mucosa: si el material es laxo, de modo que forma solo una
capa difusa.

S
tr
ept
o c
occ
us E
n
t
e
r
o
b
a
c
t
e
r
ae
r
o
g
e
n
e
s

Ilse Valderrama Heller, 2008

Evasin de una bacteria patgena capsulada
del sistema complemento

Ilse Valderrama Heller, 2008

 Fimbria, Pili, Flagelo
Fimbria - filamento proteico
corto, involucrado en funciones
de adhesin a superficies.

Pelo sexual - unin a clula

receptora durante la
conjugacin.

Flagelo - filamento proteico

involucrado en la motilidad.

Ilse Valderrama Heller, 2008

 FIMBRIAS
tambin llamadas pili, son
microfibrillas parecidas a pelos,
que rodean en nmero de 100-200
a algunas bacterias Gram (-).
Miden 3-7 m de dimetro, por lo
que se observan slo al
microscopio electrnico.
un protena estructural llamada
pilina, que se dispone en cilindros
rgidos
responsables de la adherencia
especfica de las bacterias a los
tejidos del hospedero, explicando
la especificidad de hospedero y
de tejidos de las bacterias.

Ilse Valderrama Heller, 2008

 CLASIFICACIN POR POSICIN DEL FLAGELO

A) Montrico B) Anftrico

C) Loftrico D) Pertrico
Ilse Valderrama Heller, 2008
 Endosporas
Resistencia al calor,
radiacin, desecacin.
principalmente por los
gneros Bacillus y
Clostridium
supervivencia en
ambientes desfavorables
DNA protegido por cido
dipicolnico y protenas.
Luego de la activacin por
stress, la disponibilidad de
nutrientes dispara la
germinacin y el
crecimiento
La localizacin de la espora
en la clula puede ser
usada para la identificacin

Ilse Valderrama Heller, 2008

Caractersticas importantes de las esporas y
sus implicaciones medicas.

Ilse Valderrama Heller, 2008

Ilse Valderrama Heller, 2008
 Clulas Vegetativas-Endoesporas
Caracterstica Clula vegetativa Endoespora

Contenido de Calcio bajo alto

Ac. dipiconlico ausente presente

Pequeas protenas ausentes presentes

solubles en cido
Contenido de agua 80-90% 10-25%

pH citoplasma 7 5.5-6

Actividad enzimtica elevada baja

Metabolismo elevado Bajo o ausente

Resistencia: calor, baja elevada

radiacin, compuestos
qumicos

Sensibilidad lisozima Sensible Resistente

Ilse Valderrama Heller, 2008

Ilse Valderrama Heller, 2008
Muchas gracias por su
atencin!

Ilse Valderrama Heller, 2008