LE PRÉLÈVEMENT

Le prélèvement peut se faire sur un cadavre (autopsie), sur pièces

opératoires, ou sur biopsie.
On utilise des instruments bien tranchants, afin de ne pas écraser
les tissus.
LA FIXATION
Elle doit se faire immédiatement après le prélèvement.
Le but est de conserver les structures:
• Le prélèvement des tissus provoque leur mort; les cellules
déversent leurs enzymes, ce qui provoque une autodigestion du
tissu.
• A l'air ambiant, les prélèvements peuvent être contaminés par des
bactéries, ce qui entraîne une putréfaction des tissus.
Le fixateur le plus utilisé est le formol
L’INCLUSION
A pour but la réalisation de coupes histologiques.
Le milieu d’inclusion est la paraffine.
• le prélèvement doit d’abord subir une déshydratation
• puis est infiltré par la paraffine fondue par chauffage
• avant d’être coulé dans un moule contenant de la paraffine
fondue (inclusion)
• après refroidissement, on obtient un bloc de paraffine dur.
LES COUPES DU BLOC
Sont réalisées avec un microtome permettant d’obtenir des
sections (coupes histologiques) de 3 à 5 microns d’épaisseur.
ETALEMENT ET COLLAGE DES COUPES SUR LES LAMES
On chauffe sur une plaque chauffante la paraffine, qui colle à la
lame.
DÉPARAFFINAGE ET RÉHYDRATATION
La paraffine doit être éliminée (passer les lames dans des bains de
toluène ou de xylène)
On effectue ensuite une réhydratation (on passe les lames dans
des bains d'alcool de degré décroissant).
COLORATION DES LAMES
La coloration la plus utilisée est HE: hématéine/éosine.
• L'hématéine est une substance basique, qui colore les acides
nucléiques en violet.
• L'éosine est une substance acide, qui colore les protéines
cytoplasmiques en rose.
Hématoxyline Eosine Safran
TRICHROME DE MASSON
L’ACIDE PÉRIODIQUE DE SCHIFF
May-Grunwald-Giemsa (MGG)
COLORATION DE PAPANICOLAOU
Tétrachrome de Herlant
LE MONTAGE DES LAMES
Les lames sont montées pour préserver les préparations.
On colle des lamelles de verre par-dessus (résines synthétiques).
Les lames montées peuvent être conservées pendant plusieurs
années.
Observation

Microscope optique