Instituto Politécnico

Nacional
Integrantes:
• Alvárez Bonifacio Yeredid
COPROCULTIVO
Centro de Estudios
Científicos y Tecnológicos • Bello Reyes Saúl Joshafat
No. 6 • García Salinas Karen
• Martínez Hernández Daniel
“Miguel Othón de • Mayen Bernal Viridiana
Mendizábal” • Quintero Andrés Fabiola Janet
• Rosales Hernández Diana Carolina
BACTERIOLOGIA • Sandoval Rosas Eduardo

G: 4101C
Fecha: 09 – Mayo - 2012
Profesor:
Miguel Ángel Morales Gil
 Importancia clínica.

El médico, frente a un
paciente que acude por
presentar un cuadro
diarreico, debe decidir cuál es
la posible etiología y qué tipo
de tratamiento debe dar, por
lo que recurre al laboratorio a
fin de obtener un diagnóstico
microbiológico que permita
realizar un abordaje racional
de la enfermedad.
 Diagrama de flujo para el diagnóstico de infecciones gastrointestinales.

Materia fecal

McConkey o Caldo Pruebas Tinción de

Agua peptonada Campy-Bap Coproparistoscópico
EMB tetrationato rápidas Kinyoun

Seleccionar Seleccionar
colonias y colonias y
sembrar en TSI, sembrar TSI,
TCBS Hacer pruebas LIA y MIO Sulfito de bismuto,
de acetato de SS ó Verde Brillante
plomo y de
hidrólisis de
Reacciones de
Seleccionar hipurato Seleccionar Identificación de Identificación
aglutinación con
colonias colonias y Coccidias de quistes de
sueros anti A, B,
amarillas y sembrar en protozoarios ,
C y D de Shigella
sembrar en TSI, TSI, LIA y huevecillos y
LIA, MIO, Campylobacter MIO Detección de larvas de
caldo peptonado Escherichia coli Rotavirus helmintos
y arginina Tipificar con
antisueros
Tipificación de
Reacción de Salmonella con
aglutinación con Yersinia sueros anti A, B,
suero anti Vibrio C1, C2, D y E Adaptado de: Diagnóstico de
cholerae O1 Laboratorio de infecciones
gastrointestinales. INDRE pp 205
 AFECCIONES
GASTROINTESTINALES
 La ingestión de patógenos causa muchas
infecciones. Los términos utilizados más
comúnmente para describir las enfermedades
del tracto gastrointestinal son:

• Diarrea.
• Disentería.
 DIVERSOS SINDROMES
DIARREICOS
• Diarrea aguda liquida
• Diarrea crónica/ Mal
absorción.
• Gastritis o atrofia
gástrica.
• Diarrea con sangre
• Fiebre entérica.
 ¿QUE ES EL
COPROCULTIVO?

 El coprocultivo (cultivo
de heces), es un
estudio cuyo propósito
es buscar bacterias
patógenas que causan
un daño en el tracto
intestinal. Este estudio
permite aislar e
identificar al agente
causal de estas
enfermedades.
 MECANISMOS QUE CAUSAN LA
DIARREA

1)Toxinas

2) Invasión

3) Penetración de la
pared intestinal
 SINTOMATOLOGIA
Algunos síntomas que los pacientes con
enfermedades infecciosas a menudo
experimentan son:

FIEBRE

 DESHIDRATACION

 LETARGO
 Toma de muestra
Para efectuar un Indicaciones para el paciente:
coprocultivo pueden
utilizarse las siguientes No es necesario el ayuno.
muestras:
No se requiere dieta especial
• Heces frescas
No estar bajo tratamiento con antibióticos o
• Hisopo rectal tener más de 72 hrs de haber concluido el
tratamiento. En caso de no ser posible ninguna
de estas dos opciones, eespecificar en la solicitud
del estudio que antibiótico se están tomando y
cuantos días lleva haciéndolo.
 Indicaciones para la toma y
condiciones de la muestra

La toma de muestra se deberá realizar lo antes posible luego del

comienzo de la enfermedad (preferiblemente dentro de los cuatro
primeros días).
La recolección se efectúa en un recipiente de boca ancha estéril
y con tapa de rosca.
Las muestras de consistencia formada deberán ser de 4-6
gramos (tamaño de una nuez), en caso de ser liquidas entre 5 y 1O
ml.
Debe evitarse la contaminación con orina.
Si no se pueden enviar las muestras de manera inmediata se
pueden refrigerar sin exceder 4 hrs. ya que a medida que la
muestra fecal se enfría, la caída de pH llega a ser suficiente para
inhibir el crecimiento de muchas especies Shigella y algunas de
Salmonella.
Las muestras deben examinarse y cultivarse lo antes posible después
de la recolección, si el cultivo se hace dentro de las dos horas después
de tomada la muestra, no se requiere medio de transporte, pasado este
periodo se recomienda usar el medio de transporte Cary & Blair, caldo
selenito o Tioglicolato.
En general no se recomienda el uso de hisopados rectales pero
pueden ser necesarios para obtener muestras fecales de neonatos o
adultos mayores.
El hisopo rectal debe insertarse exactamente más allá del esfínter
rectal, evitando el contacto directo con materia fecal en el recto. Estos
hisopados deben inocularse de inmediato en medios de cultivo o
colocarse en un sistema de transporte adecuado para impedir el
desecamiento.
En pacientes en edad pediátrica que usan pañales las muestras deben
ser tomadas preferentemente de sus glúteos y no del pañal
seleccionando las partes mucosas, purulentas y/o sanguinolentas y
colocarlas en frasco estéril.
EXAMEN MACROSCÓPICO
 Consistencia (solidas,
diarreicas, liquidas)
 Color; indica la
abundancia y la calidad del
flujo biliar.
 Presencia de sangre, pus,
moco.
 Fragmentos de tejidos o
restos alimenticios sin
digerir
 Olor
 BACTERIAS
CAUSANTES DE
LA DIARREA
 ESCHERICHIA COLI
 Esta bacteria ha sido incriminada en enfermedades
infecciosas que afectan casi cualquier tejido y sistema
orgánico humano.

 Cepas de E. coli que pueden producir gastroenteritis:

• E. coli enterotoxigenica (ETEC)

• E. coli enteropatógena (EPEC)
• E. coli enteroinvasiva (EIEC)
• E. coli enterohemorrágica (EHEC)
• E.coli enteroagregante (EAEC)
• E.coli difusamente adherente (DAEC)
Termino
E. coli enterotoxigenica
e. coli enteropatógena
E. coli enteroinvasiva
E. coli enterohemorrágica
E.coli enteroagregante
E.coli difusamente adherente
Abreviatura Fenotipo patógeno
ETEC Elaboración de enterotoxinas
termolábiles y/o termoestables
secretoras que no dañan el epitelio
mucoso
EPEC Se adhieren a las células epiteliales
intestinales en microcolonias localizadas
que producen lesiones histopatológicas
características conocidas como “lesiones
de fijación y desprendimiento”
EIEC La mayoría de las cepas son inmóviles,
fermentadoras tardias o no
fermentadoras de la lactosa y
anaerogenas.
EHEC Elaboración de toxinas shiga
EAEC Se adhieren a las células epiteliales y
producen una toxina (EASTI)
DAEC Se adhieren a las células epiteliales en
un patrón difuso
Signos y síntomas
Asociado con los sindromas clínicos
“diarrea del destete” y “diarrea del
viajero”. Tienen inicio brusco típico, casi
siempre sin sangre, moco ni pus. La
deshidratación y vómitos ocurren en
algunos casos.
Habitualmente ocurre en lactantes, se
caracteriza por fiebre, vómitos, diarrea
acuosa con gran cantidad de moco y en
algunas ocasiones se observan leucocitos
en las heces.
Se presenta principalmente como diarrea
acuosa, se tiene necesidad imperiosa de
defecar, presencia de moco, sangre y
muchos leucocitos en las heces.
Diarrea sanguinolenta sin leucocitos, dolor
abdominal frecuente.
Diarrea con moco, fiebre leve y poco o
nada de vomito.
Diarrea en la mayoría de las veces sin
presencia de sangre ni leucocitos
Medios de cultivo apropiados para
el crecimiento de E. coli.
AGAR EMB AGAR MacConkey
(colonias Púrpura-violeta con brillo (color Rosa-rojo )
verde metálico) Incubar entre 35º y 37ºC de 18 a 72
Incubar a 35-37 ºC de 18 a 24 horas horas.
 SHIGELLA
 Shigella es un bacilo
gram negativo
perteneciente a la familia
Enterobacteriaceae, que
se encuentra
estrechamente
relacionada con el
genero Escherichia, por
sus propiedades
bioquímicas, serológicas
y por similitudes
genéticas.
 SS, Agar
 Las colonias
sospechosas de Shigella
crecidas en
AgarSalmonella-
Shigella son
transparentes,
translúcidas u opacas y
suelen ser lisas. En este
medio las colonias de
otros microorganismos
que fermentan la lactosa
(coliformes) son colonias
rojizas y en muchos casos
mucoides.
Sulfito Bismuto Agar

 Sembrar por estría el

material objeto de estudio
o el procedente del caldo
de enriquecimiento en
este caso con caldo
tetrationato. Incubar a
35±2ºC de 24 a 48 horas.
 Shigella flexneri ATCC
12022 Crecimiento (Nulo-
escaso) Color ( Marrón)
 SALMONELLA

Colonias Lac+ Colonias Lac-

Rosadas y pueden estar Incoloras
rodeadas de un precipitado (S. typi, S.paratyphi,
S.disenteria)
 Agar SS

 No fermentadoras de
lactosa (colonias
incoloras).

 Presentan colonias con

centro negro.
(productoras de Acido
sulfúrico)
 Agar Verde Brillante

 Colonias de color rosa a blanco, opacas

rodeadas por el rojo brillante del medio
 Agar EMB

 Las colonias de
Salmonella y
Shigella son
translúcidas, de
color ámbar o
incoloras.
 VIBRIO
 Es un bacilo Gram (-) curvo que posee un
flagelo polar produce oxidasa y fermenta
glucosa.
 GASTROENTERITIS

V. Cholerae es el prototipo de los síndromes

diarreicos causados por la producción de
toxinas coléricas.
 Aislamiento en el Laboratorio Clínico

Enriquecimiento de la muestra:
 Agua peptonada Alcalina, pH 9.0, de 6-8 horas
a 37° C

Sembrado:
 Medio de cultivo TCBS, mantener a 37°C y
revisar entre las 18-24 horas. Seleccionar
colonias de color amarillo para Vibrio Cholerae
V. Cholerae en medio TCBS
 Vibrios no coléricos
Además de V. Cholerae existen otras especies
de vibrios como:

 V. Parahemolyticus
 V. Mimicus
 V. Metschnikovil
 V. Hollisae
 V. Furnisae
 V. Fluviales
 Yersinia
 Son las responsables de Y. enterocolitica en Agar
algunas afecciones MacConkey
como gastroenteritis,
diarrea y linfadenitis Las colonias tienden a ser puntiformes
después de 24 horas
mesentérica.

 Las bacterias patógenas

de la Yersinia son:

• Y. enterocolitica
• Y. pseudotuberculosis
 CAMPILOBACTER
 Morfología y características:
Se trata de bacterias gram negativas,
pequeñas (0.3-0.6 μm de diámetro, 0.5-5 μm
de ancho), no esporuladas, con una forma
distintiva curva o en espiral, con aspecto de
vibrio, cuando se observan a partir de
cultivos jóvenes; con más de 48 horas de
incubación o tras prolongada exposición al
aire adoptan una forma cocoide.
 Campylobacter jejuni
Los Medios más Medio Butzler
usados para su
aislamiento son
Skirrow, Butzler y
Campy-BAP. Las
colonias pueden
apreciarse en las
placas en 24-48
horas.
 IDENTIFICACION HASTA ESPECIE

La identificación hasta especie se realiza a partir de pruebas

bioquímicas.

Para las bacterias que se encuentran en el coprocultivo normalmente

estas pruebas se realizan con los siguientes medios de cultivo:
• TSI
• LIA
• MIO
• Citrato de sodio
• Urea
• Agar Hierro de Kligler

(La lectura e interpretación de las mismas se explican en los

anexos correspondientes.)
 Identificación Final
Antisueros:
Antígeno:
Suero que contiene anticuerpos
Es una sustancia que se combinará con un
(inmunoglobulinas) específicos frente a un
anticuerpo a raves de sitios de unión específicos.
determinado antígeno o a varios o Suero
Sustancia capaz de reaccionar con las moléculas
animal o humano que contiene anticuerpos
específicas propias de una respuesta
contra una enfermedad específica, que se
inmunitaria, es decir, anticuerpos y receptores
utilizan para proporcionar inmunidad pasiva
frente a dicha enfermedad. Los antisueros no de linfocitos T.
dan lugar a la producción de anticuerpos.

Anticuerpo:
Molécula de inmunoglobulina específica de
antígeno, producida por un clon de linfocitos B
en respuesta a su estimulación por dicho
antígeno concreto.
 Identificación Final
El método tradicional para preparar
antisueros ah sido inyectar el
antígeno en un animal (cordero,
conejo, caballo, cuyo, cabras, etc…). El
animal genera entonces anticuerpos.

Los antisueros se inyectan a los animales para

que estos se pongan en contacto con las
bacterias y se generen anticuerpos (específicos
para las bacterias que se inocularon en los
animales). Posteriormente estos anticuerpos se
extraen de la sangre de los animales para ser
utilizadas en la identificación de bacterias
aisladas de muestras biológicas. Cuando hay
formación de precipitados da positivo a la
bacteria estudiada.
ANTIBIOGRAMA DEL COPROCULTIVO

En caso de
encontrar algún
agente patógeno
es necesario
realizar un
antibiograma por
el método de
Bauer-Kirby.
POR SU ATENCIÓN,
¡GRACIAS!

:D