Tamizaje Fitoquímico

El Tamizaje Fitoquímico nos permitió determinar cualitativamente los principales grupos químicos
presentes en nuestra planta (RUMEX CRISPUS) y a partir de allí, orientar la extracción y/o
fraccionamiento de los extractos para el aislamiento de los grupos de mayor interés. Los extrajimos de
la planta con solventes apropiados y la aplicación de reacción de color y precipitación. El hecho de
evidenciarse la presencia de flavonoides en el tamizaje Fitoquímico, puede dar lugar a procesos de
aislamiento y sometimiento a pruebas más especificas de estos compuestos. Efectos catárticos pueden
ser asociados a las antraquinonas. La presencia de glucósidos cianogénicos durante la marcha
fitoquímica puede dar lugar a descartar la planta por su alta toxicidad. Diversos métodos de tamizaje
Fitoquímico están descritos para determinar la presencia de metabolitos secundarios como :
Ensayos de CTEQUINAS,BALJET,ESPUMA,CLORURO FERRICO,GELATINA,BORNTRAGER,SHINODA,ROSEMHEIN
, entre otros.
Algunos evalúan pocos grupos de sustancias, en compensación, otros evalúan la presencia de
compuestos de poco interés, como ácidos grasos, azucares reductores, polisacáridos y mucílagos. La
cantidad de material vegetal para realizar las pruebas varia de 5 g a 200 g.
Las quinonas son un grupo de compuestos cuya coloración
puede ser desde m el amarillos pálido hasta casi negro y
contienen diversos grupos funcionales como anillos furanos y
píranos , encontrarse como dímeros y ser parcialmente
reducidos como los antracenos y antronas.
ENSAYO DE BORNTRAGER

Utilizando 10 mg de la muestra disuelta e etanol se trata con

limaduras de magnesio, se le aplica calor (60°C) y después unas gotas
de NaOH por las paredes .Las quinonas darán color rojo en medio
acuoso merced a la disolución debida al estado de resonancia de los
OH fenólicos. Requiere que el núcleo Quinona este libre.
El fin de esta reacción es solo extraer las antraquinonas libres con
benceno; una vez en fase bencénica, se enfrenta con NaOH y se
observa la aparición de color rojo.
 Los flavonoides poseen como unidad básica un esqueleto de quince átomos de carbono
provenientes de la malonil CoA y del p-cumaril CoA. Son estructuras del tipo C6-C3-C6 con dos
anillos aromáticos (A y B) unidos entre sí por una cadena de tres carbonos ciclada a través de un
oxígeno (anillo C). Todos los flavonoides poseen un grupo carbonilo en la posición 4 y las
variaciones se producen en las Introducción Ana Carrión Cándida García 15 posiciones 1, 2 y 3 de
la unidad C3 y en el anillo B. Son estructuras hidroxiladas (OH) en el anillo aromático y por lo
tanto son estructuras poli fenólicas. De los tres anillos, el anillo A se biosintetiza a través de la
ruta de los policétidos y el anillo B y C proceden de la ruta del ácido shikímico .

 Figura 1.1 Estructura molecular base de los flavonoides

ENSAYO DE SHINODA
Los flavonoides que poseen anillo de gammabenzopirona reaccionan con HCl
concentrado y magnesio dando coloraciones naranjas, rojas o violetas.

En un tubo de ensayo con 0,5g de magnesio en polvo, se adicionan 1mL de

Solución A y unas gotas de HCl hasta final de desprendimiento de hidrogeno,
observar cambio de coloración a rosada, roja, violeta o naranja, indicando
prueba positiva para flavonoides.
Los cardenólidos están constituidos por
una cadena de 23 o 24 carbonos (C23,
C24), a cuyo anillo del tercer carbono (C3)
se unen de una a cuatro moléculas de
azúcares, como glucosa o ramosa, y una
o más molécula digitoxa, cimarosa o
fucosa; algunos de estos azucares
dextrógiros solo son conocidos en la
naturaleza en los compuestos
cardenólidos.
Ensayo de Kedde.

Aproximadamente 1 g de muestra se coloca en un tubo de ensayo (el de mayor

diámetro) con unos 20 ml de agua. Se hierve durante 10 minutos, se deja enfriar
y se filtra. Al extracto obtenido se le añade 0.5 ml del reactivo de Kedde, el cual
se ha preparado previamente mezclando en partes iguales ( Solución 1: Ácido
3,5-dinitrobenzóico al 2 % en etanol ,Solución 2: Hidróxido de potasio al 5.7%). Se
deja reposar durante 5-10 minutos, en el momento de realizar el ensayo nos da
positivo y se desarrolla con una coloración marrón oscura (parda) persistente que
puede estar precedido por un color rojo violáceo.
En medio alcalino se forma un intermedio de ion cardenólidos, que se
acondiciona nucleofílicamente en la posición orto a los grupos nitro del
aromático ; se forma un anión de color rojo violeta estabilizado por mesomería .
Las leucoantocianidinas (flavan-3 ,4-dioles) son compuestos
incoloro relacionados con las antocianidinas y antocianinas
yconstituyen una familia de poli fenoles naturales que
pertenecen a la clase de bioflavonoides. Están presentes en
una especie de mosto de uva (Vitis vinifera) y que consiste en
un número variable de unidades flavan. Todos los
componentes son fuertes antioxidantes solubles adicionales.
ENSAYO DE ROSENHEIM
Tomar 1.0 ml de solución acuosa en un tubo de ensayo limpio. Añadir 0.5 ml
de HCl concentrado. Mezclar. Calentar durante 10 minutos a 100 °C y
enfriar. Dejar separar las fases. La prueba se considera positiva si aparece
coloración en la fase amílica que vaya desde el carmesí oscuro al rosado
débil .
Este ensayo se hace en medio acido y con calentamiento entonces se
produce la formación de flobafenos que son tintes rojos e insolubles los
cuales son polímeros de las leucoantocianidinas.
La agregación de alcohol Isoamilico o 1-penatanol mejoran la visibilidad al
ser medios menos polares.
La presencia de colores rojos oscuros son indicativos de antocianidinas y
flavonoides derivados de chalcona.