Acción de los agentes físicos

sobre los microorganismos

Agentes físicos

 Efecto de la temperatura
 Efecto del calor.
 Efecto de bajas temperaturas.
 Liofilización
 Desecación
 Radiaciones
 Filtración
 Efecto del pH
 Inactivación total y parcial

 Inactivación total= esterilización

 Inactivación parcial = desinfección
Se deben a:
 Desnaturalización de proteínas
 Fusión de lípidos de membrana
La inactivación puede ser por:
 Calor húmedo (más rápida por coagulación)
 Calor seco (mayor tiempo mata por oxidación)
 Calor húmedo

 Inactivación parcial por calor húmedo:

 Pasteurización clásica: 63ºC x 30´
 Pasteurización instantánea: 72ºC x 15”
 Mata más rápidamente
 Altera menos el sabor

 Actúa en flujos continuos

 Ebullición: 100ºC x 10´

 Vapor fluente: 110°C x 10´
 Calor húmedo
 Vapor a presión:
 Autoclave, 121°C; equivale a 15 lbs de P
atmosférica
 Aplicaciones:
 Esterilización medios y soluciones en lab.
 Esterilización material quirúrgico

 En Ind. de alimentos: conservas, bebidas

 Uperización: 150ºC x 20 seg

 Tindalización
 Fases a): calentar material 100ºC x 15 min.
 Fases b): incubar material a 30-37ºC x 24h
 Fase c): calentar material 100ºC x 15 min.
Calor seco

 Necesita mayores tiempos y

temperaturas que el calor húmedo
 Aplicaciones:
 Horno Pasteur: para esterilizar material
inerte en el lab: vidrio, metales, aceites...
 Flameado a la llama del asa de siembra
 Incineración de materiales de desecho
 Horno bacteriológico

Flameado

Incineración
 Efecto de las bajas temperaturas

 Refrigeración: NO efecto esterilizante,

sino microbiostático
 Congelación: -1 y -10ºC el citoplasma
queda en sobrefusión, pero hay pérdida
de agua y formación de microcristales de
hielo  [sales y electrolitos]
 desnaturalización de proteínas
  daño a membrana
La congelación como método
de preservar cultivos

 En congelador (<-20ºC), poniendo en el

medio ciertas sustancias que promueven
solidificación amorfa y vítrea
 En nieve carbónica (-78ºC)
 En nitrógeno líquido (-180ºC)
Filtración
Liofilización

 Es la desecación al vacío de una

muestra previamente congelada
(sublimación)
 Mantiene la viabilidad de los cultivos
durante años (en ampollas de vidrio
herméticamente cerradas y mantenidas
a T° ambiente)
Desecación al aire

 Mata a las células vegetativas, pero no a

las endosporas
 Causas de muerte:
 Aumento de sales intracelulares
 Daños por oxidación
 Diversa sensibilidad, según especies:
 Bacilo tuberculoso: muy resistente (meses)
 Vibrión colérico: muy sensible (dos horas)
Efectos de las radiaciones
ionizantes
 Radiaciones ionizantes:
 Rayos X
 Rayos gamma
 Las bacterias son más resistentes que
organismos superiores (valores D10):
 Endosporas: 2000-3000 Gray (Gy)
 Deionococcus radiodurans: 2200 Gy
 Bacterias “normales”: 200-600 Gy
 Homo sapiens: su dosis letal es solo 10 Gy
Efectos de las radiaciones
ionizantes
 Efecto letal directo (a altas dosis):
 Roturas y entrecruzamientos en el
cromosoma que no se pueden reparar
 Efecto mutagénico:
 Daños menores que se reparan por
mecanismos propensos a error
 Efecto letal indirecto: por radiolisis del
agua, que genera radicales OH· letales
 Si además, hay oxígeno  formación de
peróxidos y epóxidos que son letales
Aplicaciones de las
radiaciones ionizantes

 Para la esterilización de:

 Material farmacéutico (antibióticos,
hormonas, etc)
 Material médico-quirúrgico (guantes de
cirujano, hilos de suturas, jeringas, agujas,
bisturíes, catéteres, prótesis, etc)
 Algunos alimentos envasados (en algunos
países). Reconocida su seguridad por la
OMS y otras agencias sanitarias
Aplicaciones prácticas de la
luz UV
 Producida por lámparas de vapor de
mercurio (emiten a 254 nm)
 La luz UV no penetra en sólidos, poco
en líquidos y se apantalla por vidrio
 Aplicaciones:
 Lámparas de desinfección de aire en
hospitales y laboratorios
 En investigación: mutagénesis
Acción de los agentes químicos
sobre los microorganismos

 Desinfectantes,
 antisépticos,
 quimioterápicos y
 antibióticos
Conceptos generales

 Agentes químicos para el control de los

microorganismos según sus efectos:
 Microbicidas
 Microbiostáticos
 Tipos generales de agentes químicos
 Esterilizantes
 Desinfectantes (germicidas)
 Antisépticos
 Quimioterápicos
Factores que afectan la
potencia de un agente químico

 Concentración del agente y tiempo

de actuación
 pH
 Temperatura
 Naturaleza y población de
microorganismos
 Presencia de materiales extraños
 Agentes que dañan la membrana:
 Fenoles:Desnaturalizan las PE
 Alcoholes: deshidratan, coagulan y desnaturalizan
las PE
 Detergentes: alteran la tensión superficial de la MC

 Agentes que modifican grupos funcionales

 Metalespesados y sus compuestos. Ag, Cu, Mg, Cr.
Forman mercaptanos
 Agentes alquilantes: formaldehído
 Halógenos, son oxidantes muy potentes y
muy usados:
 Yodo: el mejor desinfectante para la piel
 Cloro
 Cloro gaseoso (Cl2) a 1-3 ppm: cloración
de aguas potables y piscinas
 Soluciones de hipocloritos: a 200 ppm
como líquidos (lejías) o en polvo:
desinfección de maquinaria, superficies
Quimioterápicos y Antibióticos
Retrato robot de un antibiótico
ideal (cualidades deseables)

 Toxicidad selectiva (“bala mágica”)

 Microbicida (pero existen microbiostáticos)
 Que los microorganismos no desarrollen
resistencias
 De amplio espectro
 No alergénico ni con efectos secundarios
 Que permanezca activo en plasma y tejidos
durante el tiempo necesario. Soluble en
agua