MICROBIOLOGIA MOLECULAR

DR. HUGO ROSALES BRAVO

5°”B”
UNIVERSIDAD POLITECNICA METROPOLITANA DE PUEBLA

AISLAMIENTO, SELECCIÓN Y CARACTERIZACION DE

BACTERIAS ACIDO LACTICAS PROCEDENTES DE LA LECHE
MATERNA CON USO POTENCIAL EN LA ELABORACION DE
YOGURT
EQUIPO 3.

LUZ ISLAS CASTILLO

MAIRA OREA BALBINA

GABRIELA QUETZERI RODRÍGUEZ

ALONSO GARCÍA LÓPEZ

MARELYN J. BOUCHET VENTURA

 OBJETIVOS
General:
 Aislar, seleccionar y caracterizar bacterias
ciado lácticas precedentes de la leche materna
con uso potencial de yogurt
Especifico:
 Aislar bacterias acido lácticas mediante uso de
medios de cultivos
 Preseleccionar aislados
 Evaluar capacidades tecnológicas de aislado
 Evaluar sensorialmente los aislados
 Caracterizar los aislados
 JUSTIFICACIÓN
El término Bacterias lácticas engloba a un grupo heterogéneo de microorganismos cuya característica definitoria es la producción de ácido
láctico a partir de la fermentación de azúcares (Huerta, 2010 ).
Las Bacterias lácticas desempeñan un papel importante en los procesos de fermentación; ellas son muy utilizadas en la industria alimentaria no
solamente por su habilidad por acidificar y por lo tanto preservar alimentos de las esporas sino también su aplicación en la textura sabor, olor
y desarrollo de aroma de alimentos fermentados.
Los probióticos son microorganismos vivos (bacterias y levaduras) que se encuentran en los intestinos. Existen probióticos similares disponibles en
algunos alimentos y suplementos dietarios. A los probióticos a veces se los llama microorganismos “buenos” o “saludables.” Los expertos creen
que estas bacterias ayudan a mantener un sistema digestivo saludable al limitar el crecimiento de bacterias “malas” o “no saludables”.
Se ha reportado que Lactobacilos acidophilus y Bifidobacterium spp son organismos probióticos benéficos que proporcionan excelentes
beneficios terapéuticos. La actividad biológica de las bacterias probióticas se debe en parte a su capacidad de adherirse a la enterocitos;
esto inhibe la unión de patógenos entéricos por un proceso de exclusión competitiva. El apego de las bacterias probióticas a los receptores de
la superficie celular de enterocitos también inicia eventos de señalización que dan lugar a la síntesis de citoquinas. Las bacterias probióticas
también ejercen una influencia sobre microorganismos comensales por la producción de ácido láctico y bacteriocito (Kaila Kailasapathy, 200).
Por lo tanto, la inclusión de bacterias probióticas en productos lácteos fermentados realza su valor como mejores alimentos funcionales
terapéuticos. Sin embargo, la viabilidad y la supervivencia insuficientes de estas bacterias siguen siendo un problema en productos alimenticios
comerciales (Kaila Kailasapathy, 200).
 PLANTEAMIENTO
El habito del consumo de leche y productos lácteos en la alimentación humana se pierde en los orígenes de la
evolución. La leche y productos lácteos constituyen una parte importante de los alimentos que componen la dieta
habitual de los seres humanos,
La lactosa es un azúcar que se encuentra prácticamente solo en la leche y en algunos productos lácteos. No es
considerada un nutriente esencial, dado que la galactosa, necesaria para la elaboración de cerebrosidos y
glicoproteínas. En algunos individuos presentan una deficiente o nula capacidad de sintetizar lactasa, la ingestión de
productos que contienen lactosa da lugar a problemas digestivos derivados de la no asimilación de este azúcar.
RECOLECCIÓN DE LA LECHE
MATERNA
DISEÑO EXPERIMENTAL, SUJETOS Y APROBACIONES
DE ÉTICA

 Se realizó una pequeña encuesta a cada donante, para descartar que consumieran bebidas alcohólicas, tabaco o
productos de nicotina, antibióticos por parte de la madre en los 30 días previos de la lactancia, que fueran
mayores de 18 años y que llevaran mas de un mes amamantando, presentaran una infección mamaria o dolor
mamario que la mujer no consideró normal para la lactancia.
 MÉTODO DE RECOLECCIÓN Y CONSERVACIÓN DE
LA LECHE MATERNA

A las madres se les pidió no alimentar a sus bebés, o extraer leche materna, del seno del cual planeaban donar
durante una o dos horas antes de la toma de muestras. (impacto IMC)
Con el uso de manos enguantadas, el personal de investigación o la madre (dependiendo de la aceptabilidad cultural)
limpiaron el pecho de estudio (elegida por el sujeto) dos veces, una primera con agua y jabón y una segunda con el
uso de toallitas desinfectantes pre empaquetadas, con un paquete recién abierto cada vez, para eliminar el suelo
sensible. (concentraciones y perfiles de oligosacáridos).
Después de tomar al menos 15 ml de muestra, ésta se colocaba en una hielera para mantener a al menos 4 °C.
 MATERIALES

 Tubos falcón
 Toallitas desinfectantes
 Jabón
 Agua
 Guantes estériles
 Hielera con hielos a una temperatura de 4°C
 MUESTRA
Muestra 1: Muestra 2: Muestra 3:
TÉCNICAS Y MATERIALES
 AISLAMIENTO
Material: Procedimiento:
 1 gradilla
 Cajas Petri
 Asa de vidrio
 Balanza analítica
 Micropipeta
 3 vasos precipitados de 1L
 Mechero
 Alcohol 90%
 Solución de fosfato

Material:
 Asa bacteriológica
 1 vaso precipitado de 100ml
 Estilizador infrarrojo
ESTRIADO
Procedimiento:
 Estriado básico: Se calienta el asa de inoculación hasta que quede color rojo intenso para
eliminar cualquier microorganismo, dejar que el asa se enfrié durante 3-5 segundos. Recoger
una muestra del cultivo bacteriano a partir de un caldo o una placa Petri. Levantar la tapa de
la placa Petri que se va a sembrar en un ángulo de 45°, colocar el asa en la parte de atrás
de la caja, tocar con el asa el medio y pasarlo a través de la superficie de la placa con un
movimiento en forma de S desde atrás hacia adelante.
 Estriado para aislar: implica una sola inoculación de una sección de la placa Petri y a
continuación disminuir la colonia arrastrando microorganismos de la sección inicial de dos a
tres secciones adicionales, achicando eficazmente la población de microorganismos.
 Estriado por cuadrantes: se divide la parte inferior de la caja Petri en cuatro partes iguales
con un marcador. Se esteriliza el asa y se estría el 1er cuadrante con el procedimiento básico
de S. Se trabaja en el sentido de las agujas del reloj, estriando cuadrante por cuadrante,
esterilizando el asa antes de seguir a otro.