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TECNICAS Y TINCIONES

ESPECIALES EN
HISTOPATOLOGIA

EQUIPO # 2

De la Garza Longoria Rodolfo


Palacios García Daniel
Olvera Curiel Jesús Orlando
Resendiz Hernández Jesús Antonio
Maldonado Venegas Abraham
OBJETIVO

 Al terminar la practica el alumno será capaz de:

 Describir la técnica utilizada en la biopsia transoperatoria.

 Listar las tinciones especiales.

 Correlacionar la técnica especial con la lesión o la estructura


buscada.

 Discutir las aplicaciones practicas de las tinciones especiales.


 La técnica histológica básica conlleva ciertas limitaciones:

 Solo tiñe en forma bicromica a todas las sustancias y estructuras


teñibles de la célula sin diferenciar de manera selectiva.

 El proceso conlleva mucho tiempo aprox. 24-48 horas.

 Cuando se requiere información en forma rápida, se tendrán que


utilizar las llamadas tinciones especiales.

 En la practica de la cirugía se requiere conocer si una tumoración


corresponde o no a una neoplasia maligna, puesto que cuando este
dato es positivo el objetivo y la dimensión de la cirugía cambian.
 El cirujano extirpa durante la operación un fragmento de tejido
representativo de la lesión y lo envía al servicio de anatomía
patológica para que se determine su naturaleza.

 Mientras el paciente continua anestesiado el patólogo lleva


acabo el estudio conocido como biopsia transoperatoria para
poder proporcionar información al cirujano.

El tejido en fresco es procesado de tal manera que rinda células


por impronta y luego frigorizado en el criostato para hacer la
criomicrotomia , una vez obtenidos los cortes estos se tiñen,
observan y se reportan con prontitud para que el cirujano
norme su criterio operatorio.
Es frecuente que se presenten casos cuyo patrón
morfológico es ambiguo, y en los cuales el diagnostico
no es factible mediante estudio por hematoxilina y
eosina únicamente.

Muchas veces estos casos corresponden a lesiones


neoplásicas, donde las células son poco diferenciadas
y se vuelve difícil o imposible determinar su histogénesis
sin el auxilio de técnicas especiales que pongan en
evidencia alguna estructura o sustancia que les sea
característica.
 A estas estructuras o sustancias se les conoce con el
nombre de ¨MARCADORES MORFOLOGICOS¨ y su
estudio se lleva a cabo mediante técnicas de tinción
diferencial, incluyendo técnicas histoquímicas e
inmunohistoquímicas.

Técnica del acido peryódico de Schiff (PAS).

Técnica tricrómica de Masson.


Tinción de retículo.

v.g rojo oleoso= grasas, rojo Congo= amiloide, azul


luxol= mielina, métodos de Gram y Zeihlneelsen=
bacterias.
TECNICA DE PAS
Pone en evidencia el uso de la fuschina basica para poner en
evidencia al glucógeno, la mucina y las membranas basales. Es
util para evidenciar fibrina, reticulita, trombos, material hialino
de la arteroesclerosis , los depositos hialinos glomerulares, el
coloide tiroide y del tallo hipofisiario, ademas de la sustancia
amiloide. Todas estas sustancias y estructuras se tiñen de un
color purpura. Los núcleos se tiñen con hematoxlina y el
contraste de fondo se obtiene empleando verde tenue, u otro
colorante apropiado segun preferencia.
TECNICA TRICOMICA DE MASSON
Emplea tres colorantes: hematoxilina férrica
de Weigert para teñir los núcleos de negro,
escarlata de Beibrich que tiñe de rojo al
citoplasma, musculo, queratina, eritrocitos y
fibras intercelulares, y el azul de anilina de
Mallory que tiñe intensamente la colágena y
al moco.
TECNICA DE RETICULO

Es un procedimiento de impregnación
argéntica en la cual el oxido de plata
amoniacal es reducido por formaldehido
para revelar a la colágena y la
precolágena. La colágena aparece de color
rosa o violeta pálido y las fibras reticulares
de color negro.
ACTIVIDADES
Ejercicios

 PASS:
 Se observan el glucógeno,
la mucina, membranas
basales, fibrina, reticulada,
trombos, material hialino
de la arterioesclerosis,
depósitos hialinos
glomerulares, el coloide
tiroideo y del tallo
encefálico y la sustancia
amiloide teñidos de color
rojo purpura.
 Tricromico de Masson:

 Se observan núcleos teñidos


de negro, mientras que el
citoplasma , musculo,
queratina, eritrocitos y fibras
intercelulares de rojo, y se
pueden ver la colagena y el
moco de color azul.
 Técnica de retículo:

 Se puede observar la
colagena que aparece de
color rosa o violeta pálido
y las fibras reticulares de
color negro.
2._Pasos básicos para la biopsia transoperatoria

 Obtención del tejido por parte del cirujano.

 En el servicio de anatomía patológica el tejido será procesado y


luego frigorizado en el criostato para hacer la criomicrotomia.

 Una vez obtenidos los cortes, se van a teñir utilizando las tinciones
especiales.

 Se observan y se analizan las muestras

 El patologo reporta lo encontrado al cirujano para k este proceda


en base a los resultados de la biopsia
 Cripta intestinal teñida con método de pass:

 A la derecha, mucosa de intestino grueso de arquitectura conservada; a la


izquierda, tumor solevantado (poliposo sésil), en que las células epiteliales
forman tubos de dirección en general ordenada y diámetro uniforme, mayor que
el de las criptas normales. Los tubos son poco ramificados. El citoplasma de las
células tumorales es eosinófilo, similar al de las células absorbentes y no al de
las células caliciformes.
 4.- ¿Qué utilidad tiene el PAS en el estudio de los
carcinomas? Ayuda a identificar las células
malignas en los diferentes carcinomas
diferenciandolas de las normales evidenciando así
las estructuras celulares anormales que se
presentan en un cáncer determinado.
 5.-¿Qué utilidad tiene el PAS en el estudio de las
glomerulopatias? Nos ayuda a identificar la
presencia de depósitos hialinos glomerulares entre
otras características de las diferentes patologías o
daños glomerulares.
 6.- Haga un esquema colorizado de una seccion
histologica donde indique la presencia de diversas
estructuras reveladas por
• Escarlata de los tres
Beibrich: colorantes
tiñe de la
de rojo al citoplasma,
musculo, queratina, eritrocitos y fibras intercelulares.
tecnica de Masson:
• Hematoxilina ferrica de Weigert: tiñe los nucleos de
negro.
• Azul de anilina de Mallory: tiñe intensamente la
colagena y al moco.
7. Qué utilidad tiene el tricrómico de Masson en el
estudio de sarcomas?

 Para visualizar el incremento de tejido colagenoso


8.- Haga un esquema que muestre la utilidad de la técnica
de retículo para diferenciar un carcinoma de un sarcoma

 En carcinoma el retículo rodea grupos celulares

 En el sarcoma el retículo rodea células aisladas


 9* ¿Cuál técnica especial seria mas útil en el
estudio de:?

 Carcinoma de estomago: H-E


 Cirrosis hepática: tinción tricomica de Masson
 Glomerulopatia diabética: tinción de PASS y tinción
tricomica de Masson
 Linfoma: H-E
 Coccidioidomicosis: técnica de Grocott, H-E
 Fibrosarcoma: tinción tricomica de Masson
 Carcinoma de tiroides: H-E
 10* se recibe biopsia de una tumefacción del
hueco supraclavicular izquierdo de un paciente
masculino de 60 años de edad. Los cortes de
rutina muestran que el tejido es un ganglio
linfático cuya arquitectura ha sido distorsionada
por la invasión de numerosas células vacuolazas
de aspecto maligno. Ante la posibilidad de que
esto se trate de la metástasis de un cáncer:
 A) ¿Dónde pudiera encontrarse el tumor primario?
 Estomago, carcinoma gástrico.
 B)¿Qué técnica pediría usted en este caso?
 H-E

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