ANTICUERPOS Y ANTÍGENOS

Dra. Yarisel Crespo Barrios

yarisel.crespo@yahoo.es
 TEMAS PARA LA CLASE

• ESTRUCTURA DEL ANTÍGENO.

• SÍNTESIS, EXPRESIÓN Y ENSAMBLAJE DE MOLÉCULAS DE Ig.

• UNIÓN DEL ANTICUERPO A LOS ANTÍGENOS.

• RELACIONES ENTRE ESCTRUCTURA Y FUNCIÓN DE LAS

MOLÉCULAS DE ANTICUERPO.
 LOS ANTICUERPOS
• Son proteínas circulantes.

• Se producen en los vertebrados en respuesta a los antígenos.

• Diversos y específicos para reconocer Ag.

• Principales mediadores de la Inmunidad Humoral contra todas las clases de

microbios.

• Al inicio se llamaron antitoxinas pero luego del descubrimiento de su capacidad

para generar proteínas similares contra muchas sustancias recibieron el nombre de
ANTICUERPOS.
 MOLÉCULAS QUE UTILIZA EL SISTEMA INMUNITARIO
ADAPTATIVO PARA UNIRSE A LOS ANTÍGENOS

ANTICUERPOS MHC RCT

Los Anticuerpos reconocen el espectro más amplio de antígenos,

son más específicos y se unen a ellos con más fuerza

Representan la primera de los 3 tipos de moléculas ligadoras de antígeno

 Anticuerpos

Secretados a la circulación
Unidos a la membrana de , tejidos y mucosas
superficie de los LB ( neutralizan toxinas, impiden
(receptores para los antígenos). entrada y propagación de
microorg y eliminan microbios)
 RECORDEMOS…..
Activación
LB e inicio
de
Respuesta
I. Humoral

Ac.
Ag. Membrana
LBV
Producción
de Ac.
(forma
secretada)
En la fase efectora de la IH estos se unen a los Ag. y desencadenas varios
mecanismos efectores para eliminar a los Ag.
 LA ELIMINACIÓN DE ANTÍGENO
REQUIERE DE LA INTERACCIÓN DEL
AC CON:
• Moléculas el tipo de las proteínas del
complemento.
• Fagocitos
• Eosinófilos
 FUNCIONES EFECTORAS MEDIADAS
POR LOS ANTICUERPOS.
Neutralización de microbios o productos microbianos tóxicos

Activación del sistema del complemento

Opsonización de microorganismos patógenos para potenciar su

fagocitosis

Citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos

Activación de mastocitos mediada por anticuerpos para expulsar

helmintos
 LB son las únicas células Serología: estudio de los Ac. y
productoras de anticuerpos sus reacciones con los Ag.

Célula de
memoria.

Célula plasmática
Suero
Anticuerpos
Ac.
de membrana
Anticuerpos
Antisuero:
cualquier muestra
secretados de suero con
moléculas de
anticuerpo
detectables que se
Plasma, secreciones unen a un
mucosas y líquido antígeno
intersticial. especifico.
 ESTRUCTURA DEL ANTICUERPO.
Proteínas
plasmáticas
Solubilidad

Albúminas Globulinas

Electroforesis
Tercer grupo de
Globulinas Globulinas Globulinas migración mas
rápida de los
alfa beta gamma globulinas.

Ig.
 Esta variabilidad de las regiones que se
TODAS LAS MOLÉCULAS unen al antígeno es responsable de la
capacidad de diferentes anticuerpos de
DE ANTICUERPO unirse a un numero enorme de antígenos
COMPARTEN LAS con una estructura diversa.

MISMAS En cada sujeto existe un millón o más de

CARACTERÍSTICAS moléculas diferentes de anticuerpos, cada
uno con secuencias de aminoácidos
ESTRUCTURALES BÁSICAS únicas en sus lugares de combinación con
PERO MUESTRA UNA su antígeno.

VARIABILIDAD Las funciones efectoras y propiedades

ACENTUADA EN LAS físico-químicas comunes de los anticuerpos
se asocian a las porciones que no se unen
REGIONES QUE SE UNEN al antígeno, con pocas variaciones entre
A LOA ANTÍGENOS. los diferentes anticuerpos.
Estructura nuclear Dos cadenas pesadas idénticas.
simétrica.

Dos cadenas ligeras idénticas.

Zona de unión al antígeno.

Ambos tipos de cadenas

Las cadenas pesadas y
contienen unidades
ligeras consta de
repetidas, homologas que
regiones aminoterminales
se pliegan de forma
variables (V) para el
independiente en una
reconocimiento del
estructura globular que es
antígeno y regiones
carboxilo terminales el dominio de Ig
constantes (C), que en
las cadenas pesadas El dominio de Ig.
median las funciones Contiene dos capas
efectoras. plegadas en beta
unidas mediante un
enlace disulfuro.
 ANTICUERPOS
MONOCLONALES
• Un antígeno complejo presenta múltiples epítopos frente a las cuales los
linfocitos producirán una gran variedad de anticuerpos (AC) o
inmunoglobulinas específicas para cada una de dichas regiones o
epítopos.

• Estos anticuerpos se denominan policlonales.

• La obtención y purificación de un único tipo de anticuerpo tras

inmunización es por ello una labor costosa y de baja eficiencia.
• Un tumor de células plasmáticas (mieloma o plasmocitoma ) es monoclonal.

• Produce anticuerpos de una sola especificidad.

• En la mayoría de los casos se desconoce la especificidad del Ac de forma

que no puede utilizarse para detectar de un modo específico a moléculas
de interés.

• El descubrimiento de AcM producidos por estos tumores indicó que es

posible producir AcM similares de cualquier especificidad deseada
inmortalizando células secretoras de anticuerpos individuales a partir de un
animal inmunizado con un antígeno conocido.
 TÉCNICA DE KOHLER Y MILSTEIN (1975)
Se estudia la unión al Ag de
LB ratón interés de los Ac secretados
inmunizado por muchos clones de
Hibridomas y se selecciona y
Hibridoma expande el clon con la
especificidad deseada.
(produce
solo una Ig Los productos de estos clones
murina) individuales son AcM y son
específicos frente a un solo
Línea epítopo del Ag. o de la
celular de
mieloma
mezcla de Ag usada para
identificar clones secretores
de Ac.
• El uso de AcM de tipo murino en humanos tiene sus dificultades
por la producción de HAMA (human anti mouse antibody).

• Se han desarrollado AcM humanizados o quiméricos con buenos

resultados (mantienen las regiones variables murinas acopladas
a regiones constantes humanas).

• Actualmente se producen AcM completamente humanos por

técnicas de ADN recombinante.
 APLICACIONES DE LOS ACM.
• Los AC monoclonales se utilizan con fines terapéuticos (antiinfecciosos,
inmunosupresores, anticancerígenos, etc) y diagnósticos.

• Su uso comercial en pruebas diagnósticas se remonta a 1981 (ELISA y RIA).

• Su empleo con fines terapéuticos fue autorizado en EEUU en 1986.

 Los mecanismos a través de los cuales los AC monoclonales son
útiles son variados:

• Transportadores de toxinas (inmunotoxinas).

• Transportadores de fármacos.
• Agentes terapéuticos en sí mismos (como ejemplo, AC anti-
receptores presentes en células cancerígenas).
• Transportadores de radionúclidos para radioinmunoterapia y
radiodiagnóstico en formas avanzadas o metastásicas de
cáncer.
 Problemas que limitan su potencial utilidad terapéutica:

• Son proteínas de alto peso molecular por lo que su cinética es más lenta
que la de medicamentos tradicionales y su capacidad de penetración en
los tejidos es mucho menor, disminuyendo la eficacia esperada en proceso
cancerosos o infecciosos.

• Se requiere alta tecnología con costes generalmente muy elevados.

• La respuesta inmunológica producida en su tratamiento ha dado lugar a

casos de pérdida de eficacia (por formación de Ac anti-AC) o bien una
respuesta inmune generalizada y potencialmente grave
 NOMENCLATURA

TERMINACIONES

……mab : humanizado
……umab: quimérico
……onab: murino
 APLICACIONES PRÁCTICAS DE LOS
ACM.
• Identificación de marcadores fenotípicos de tipos celulares
particulares ( CD )

• Inmunodiagnóstico: se usan en el Inmunoanálisis para detectar

Ac o Ag particulares en la circulación o en los tejidos.

• Detección de tumores: para detectar tumores mediante técnicas

de imagen y tinción de tejidos con anticuerpos marcados.

• Análisis funcional de la superficie celular y de las moléculas

secretadas.
• Tratamientos:

AcM con relevancia terapéutica

CD20 Eliminación de LB. Artritis reumatoide.
Esclerosis múltiple.
Linfomas células B con CD 20+
Leucemias
VEGF Bloqueo de angiogenia tumoral Cáncer de mama
Cáncer de colon

Her 2 /neu Eliminación de células tumorales con Cáncer de mama

amplificación de Her 2 Cáncer gástrico

TNF Inhibicion de inflamación mediada por LT Artritis reumatoide

Enfermedad de Crohn
 SÍNTESIS, ENSAMBLAJE Y
EXPRESIÓN DE MOLÉCULAS DE IG.
Liberación de las
Se sintetizan proteínas
en los Plegado y
chaperonas y
ribosomas Pasa al RER ensamblado transporte hacia el
unidos a la de cadenas Golgi donde se
membrana pesadas y modifican los
ligeras. glúcidos .
del RER.

Durante el traslado se N-
glucosilan las cadenas pesadas Regulado por las proteínas
chaperonas del RER(calnexina y
de Ig. BiP )
Van hacia la
Las Ig de membrana se anclan a la MP membrana
plasmática
empacadas en
Las Ig secretadas salen de la célula vesículas
 SEMIVIDA DE LOS ANTICUERPOS

Ac Semividas en
circulación
IgE 2 días
IgA 3 días
IgM 4 días
IgG 21 a 28 días
 UNIÓN DE ANTICUERPOS Y ANTÍGENOS

TODAS LAS FUNCIONES DE LOS

ANTICUERPOS DEPENDEN DE SU
CAPACIDAD PARA UNIRSE DE FORMA
ESPECIFICA A LOS ANTIGENOS.
 CARACTERÍSTICAS DE LOS ANTIGENOS
BIOLÓGICOS
• Un antígeno es cualquier sustancia que pueda unirse específicamente a una
molécula de anticuerpo o al receptor del LT. ( metabolitos intermediarios simples,
azucares, lípidos, hormonas, glúcidos complejos, fosfolípidos, ácidos nucleicos,
proteínas…)

• Aunque todos los antígenos son reconocidos por linfocitos o anticuerpos

específicos, solo algunos son capaces de activar a los linfocitos.

• Inmunógenos: moléculas que estimulan las respuestas inmunitarias.

• Solo las macromoléculas son capaces de estimular a los LB para iniciar respuestas
inmunitarias humorales.

• La activación del LB requiere el acercamiento de múltiples receptores para el Ag,

o Ag proteicos para estimular la cooperación del LT.

• Las sustancias pequeñas (dinitrofenol) pueden unirse a un anticuerpo pero no

pueden activar por si solas a los LB o sea no son inmunógenos.

HAPTENO-TRANSPORTADOR
• EPÍTOPO: zona por donde se une el anticuerpo a la macromolécula. Suelen
ser mucho menores que estas , por lo tanto el anticuerpo se une solo a una
pequeña porción de la macromolécula.

• Las macromoléculas pueden tener varios epítopos, algunos repetidos, y

por definición cada uno puede unirse a un anticuerpo.

• Multivalencia: presencia de múltiples epítopos idénticos en un antígeno.

• La disposición espacial de diferentes epítopos en una sola molécula de proteína
puede influir en su unión a los anticuerpos de diversas formas.

EPíTOPOS NO SOLAPADOS EPíTOPOS SOLAPADOS

Epítopos separados, entonces Epítopos cercanos, entonces la

pueden unirse dos o más moléculas primera unión hace interferencia
de Ac al mismo antígeno sin influirse estérica con la unión del Ac al
entre sí. segundo
 BASE ESTRUCTURAL Y QUÍMICA DE
LA UNIÓN AL AG.
El reconocimiento del antígeno por el anticuerpo implica una unión no covalente y
reversible.
La fuerza de la unión entre una
TIPOS DE INTERACIONES NO COVALENTES sola zona combinatoria de un
Ac y un epítopo de un Ag se
• Fuerzas electrostáticas llama AFINIDAD y se
• Enlaces de hidrógeno representa con una constante
• Fuerzas de Van Der Waals de disociación (Kd) para
• Interacciones hidrófobas indicar la facilidad con la que
se separa un complejo Ag-Ac.
 CARACTERÍSTICAS RELACIONADAS
CON EL RECONOCIMIENTO DEL AG.

• Los anticuerpos son capaces de reconocer de forma

especifica una amplia variedad de antígenos con
afinidades variables.

• Todas las características del reconocimiento del antígeno

reflejan las propiedades de las regiones V del anticuerpo.
 Los Ac suelen ser muy específicos de los Ag y distinguir
entre pequeñas diferencias en la estructura química.
Pueden distinguir entre dos epítopos que se diferencien
en un solos aminoácido.
Algunos pueden unirse a un antígeno diferente pero

1
con estructura muy similar ( reacción cruzada).
Especificidad La base de muchas enfermedades inmunitarias se
debe a la reacción cruzada.

2
El repertorio de Ac en un sujeto es de mas de 10“,
cada uno con una especificidad distinta, lo cual
Diversidad confiere una gran capacidad de unirse a muchos
antígenos diferentes.

3
Las capacidades de los Ac de neutralizar toxinas y
Maduración de la microbios depende de la unión fuerte que se
afinidad consigue con interacciones de avidez alta y afinidad
alta. Esto se consigue con pequeños cambios de los
epítopos por mutación somática e los LB estimulados
por Ag provocando mayor afinidad que los epítopos
originales. Estos LB se convierten en los Linfocitos
dominates en cada exposición posterior al Ag.
 CLASIFICACIÓN DE LOS ANTÍGENOS
SEGÚN LAS CÉLULAS INMUNES INVOLUCRADAS
EN SU RECONOCIMIENTO

Antígenos timo-dependientes:

Abundante evidencia experimental muestra que la producción de anticuerpos por

las células B contra numerosos antígenos y especialmente para los de naturaleza
proteica requiere de la ayuda de células T, de ahí que se los denomine antígenos
timo-dependientes.

Los antígenos timo-dependientes provocan respuestas primarias caracterizadas por

la síntesis de anticuerpos de la clase IgM, pero en exposiciones posteriores al
antígeno maduran hacia IgG (suero) o IgA (secreciones) y células de memoria, a
diferencia de las respuestas a los antígenos timoindependientes, que sólo estimulan
la producción de anticuerpos de la clase IgM y muy pocas células de memoria.
 Antígenos timo-independientes

Algunos antígenos, como los polisacáridos y lipopolisacáridos de bacterias, son

capaces de activar linfocitos B sin la ayuda de linfocitos T “helper”; son los
denominados antígenos timoindependientes.

Entre las propiedades que presentan estos antígenos podemos mencionar las
siguientes:
• Son moléculas de gran tamaño con epítopos repetidos, lo que les permite
interactuar con múltiples receptores de la superficie, dando como resultado una
reacción de alta avidez que induce el coronamiento (“capping”) de los mismos,
• Son mitogénicos, es decir, inducen proliferación de los linfocitos B y (c) Pueden
activar la vía alternativa del complemento.
 CLASIFICACIÓN DE LOS
ANTÍGENOS SEGÚN SU FUNCIÓN
Antígenos de trasplante
El trasplante de tejido incompatible y la maternidad multípara van acompañados de la
inducción de altos títulos de anticuerpos que reconocen a los antígenos de
histocompatibilidad, especialmente de Clase I.

Esto se debe al alto polimorfismo genético de la cadena pesada de estas moléculas en la

especie humana y en los animales superiores.

Estos antisueros naturales, han sido una herramienta fundamental para entender las reglas
que gobiernan la histocompatibilidad y prolongar la sobrevida de los trasplantes.

Los antígenos o moléculas MHC de clase II son menos potentes en la inducción de

anticuerpos y en la actualidad se usan técnicas de biología molecular para su tipificación.
 Antígenos tumorales

Se han descrito numerosos anticuerpos monoclonales que son reactivos con

antígenos que se expresan exclusivamente o, en mayor cantidad en células
tumorales, por lo tanto son utilizados en diagnóstico clínico de humanos como
marcadores de la presencia de células neoplásicas.

Entre estos antígenos, se encuentran marcadores de melanoma, carcinoma

colo-rectal, neuroblastoma, antígeno prostático y antígenos de leucemias
linfáticas, entre otros.
 Autoantígenos

Existen procesos patológicos en que el sistema inmunológico reconoce como

antígenos componentes propios; son las denominadas enfermedades
autoinmunes.

Si bien pueden afectar cualquier órgano de un individuo, las más frecuentes

incluyen: la substancia blanca del cerebro y la espina dorsal (Esclerosis múltiple);
los revestimientos de las articulaciones (Artritis reumatoide); las células secretoras
de la insulina (Diabetes mellitus juvenil).

Otras enfermedades autoinmunitarias destruyen las conexiones entre nervios y

músculos (miastenia gravis), producen ampollas en la piel (Pénfigo vulgar) o
destruyen los riñones y otros órganos (Lupus eritematoso sistémico)
 Antígenos de diferenciación

Se refiere tanto a los antígenos específicos de estado como los antígenos

específicos de tejido.

Un antígeno que se reconoce exclusivamente durante una etapa del desarrollo

embrionario de un organismo, pero que posteriormente no es reconocido en células
terminalmente diferenciadas corresponde a un antígeno específico de estado;
mientras que un antígeno reconocido en cierto tipo celular diferenciado, que sirve
como marcador para distinguirlo de otro, es propiamente un antígeno específico de
tejido.
 Superantígenos

Se definen como superantígenos (Sags) numerosas proteínas de microorganismos

bacterianos (estafilococos, estreptococos, micobacterias, y micoplasmas, entre
otras) y virales (del tipo rabdovirus y retrovirus), que se unen a moléculas MHC
clase II y que estimulan las células T , fuera de la región de unión al antígeno.

Se les denomina Sags debido a que el número de células T involucradas en la

respuesta inmune es mucho mayor que el de las células específicas a antígenos
proteicos convencionales.

Los superantígenos de microorganismos están presentes en diferentes formas.

 Alergenos

Son antígenos capaces de provocar reacciones de hipersensibilidad de tipo

inmediato (minutos después de su exposición) o retardado (días después del
desafío antigénico).

Desde el punto de vista bioquímico, los alergenos incluyen polisacáridos,

proteínas y haptenos de origen sintético y naturales.
 INMUNO-DICCIONARIO
• Antígeno: Es una molécula que, al ser introducida en un individuo, desencadena una
respuesta inmune frente a ella. Generalmente un antígeno es, a su vez, inmunógeno, es
decir, capaz de despertar “per se” la respuesta inmune frente a él mismo.
• Epítopos: Es la región concreta de un antígeno donde se une el anticuerpo (entre 15 y 20
aminoácidos). Un antígeno suele tener varios epitopos distintos. El conjunto de todos los
epitopos constituye una fracción muy minoritaria de la estructura del antígeno. A los
epítopos también se les llama determinantes antigénicos.
• Haptenos: Son sustancias químicamente definidas de poco peso molecular, que por sí solas
no son inmunógenas, pero que pueden comportarse como inmunógenas si se unen
covalentemente a otra molécula más grande (portador o “carrier”), por lo que algunos
autores los denominan antígenos incompletos.
• Idiotipo: Es el conjunto de determinantes antigénicos situados en las regiones variables de
las cadenas pesada y ligera de una IG, dicho de un modo más simple, es la zona que
determina su actividad anticuerpo.
• Isotipos: son los distintos tipos de inmunoglobulinas frente a los que se pueden formar por
combinación de las diferentes cadenas pesadas y ligeras, es decir, las distintas clases (G, M,
A, D y E) y subclases (G1,G2, etc.) de inmunoglobulinas.