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TRANSCRIPCION DEL RNA

INTRODUCCION
  La expresión de la información
genética contenida en un segmento de DNA
siempre requiere la síntesis de una molécula
de RNA.
  Durante el proceso de transcripción ,
una enzima, llamada RNA polimerasa,
convierte la información genética de un
segmento de DNA en una hebra de RNA con
una secuencia complementaria a una de las
hebras del DNA.
Estructura y propiedades
del RNA
  El RNA , al igual que el DNA es un
polímero lineal de nucleótidos unidos por
enlaces fosfodiester 3',5' , a diferencia del
DNA los nucleótidos en el RNA son
ribonucleótidos, y se encuentra la base
uracilo en lugar de la timina.

 La presencia característica en el RNA del


grupo hidroxilo 2' (2'OH) en la ribosa hace
que la molécula de RNA sea más susceptible
a la hidrólisis
Estructura y propiedades
del RNA
  El RNA normalmente esta
compuesto de una sola hebra, pero
puede formar regiones de doble hélice
intramolecular que le dan una
conformación tridimensional.
  El RNA es la única molécula que
tiene funciones informacionales y
catálíticas.
Tipos de RNA

 1. RNA mensajero (mRNA),


lleva la información que codifican para
la secuencia de aminoácidos de uno o
más polipéptidos especificados por un
gen o conjunto de genes hacia los
ribosomas donde se realiza la síntesis
de las proteínas. Tienen una vida media
que va de minutos a horas.
Tipos de RNA
 RNA de Transferencia (tRNA), es
una molécula adaptadora que lee la
información codificada en el mRNA y
transfiere el aminoácido apropiado a la
cadena polipeptídica 1. en
crecimiento durante la síntesis de
proteínas. Tiene una vida media que va
de horas a días.
Tipos de RNA
 1. RNA ribosomal (rRNA), moléculas
que asociadas con proteínas forman el
ribosoma. Tienen una vida media que va de
horas a días.
 2. RNA pequeño del núcleo (snRNA),
se encuentran formando complejos con
proteínas conocidas partículas
ribonucleoproteicas pequeñas del núcleo o
"snurps". Estas se encuentran en el núcleo de
las células eucarioticas y participan en el
procesamiento de los pre-mRNA.
Tipos de RNA
 3. RNA de virus, muchos virus de
bacterias, plantas y mamíferos tienen
RNA como material genético.
 4. Ribozimas, algunas enzimas
tienen RNA como una parte integral de
sus sitios activos. También hay enzimas
que son puro RNA.
TRANSCRIPCION EN
PROCARIONTES
 La bacteria E. coli una sola RNA polimerasa
es la responsable de toda la transcripción que
ocurre en la célula. Tiene las siguientes
características estructurales y funcionales.
 Tiene 6 subunidades funcionales: 2
subunidades alfa, una subunidad beta, una
subunidad beta prima , la subunidad o factor
sigma y una subunidad omega
Formas de la RNA polimerasa
  La enzima núcleo, compuesta de 2
subunidades alfa, una subunidad beta y una
subunidad beta prima. Es capaz de copiar ambas
hebras del DNA pero carece de especificidad.
  La RNA polimerasa holoenzima, es la
forma totalmente funcional de la enzima. Consiste de
la enzima núcleo más el factor sigma. Tiene
especificidad y reconoce señales específicas de inicio
de transcripción en el DNA conocidas como regiones
promotoras, debido a la presencia del subunidad o
factor sigma que reconoce las regiones promotoras y
que luego de la iniciación se disocia.
RNA pol de E. coli: Rol de las
Subunidades
E. Coli RNA Polimerasa núcleo
85 x 105 x 140 A (canal 25A)
RNA polimerasa holoenzima
100x100x160 A
RNA pol II de levadura
140x136x110 A
RNA Polimerasa
 la síntesis de RNA llevada a cabo por la
RNA polimerasa es semejante a la
síntesis del DNA.
 sintetiza una hebra de RNA añadiendo
unidades de ribonucleótidos al extremo
3' terminal de una cadena de RNA,
construyendo una cadena de RNA en
dirección 5'->3’.
El molde es el DNA
El RNA es sintetizado de 5’ a
3’
Requerimientos de la RNA
polimerasa

Para su actividad la RNA polimerasa
requiere:
  Un DNA molde
  Mg ++ o Mn++
  Los cuatro ribonucleósidos
trifosfatos (ATP, GTP,UTP,CTP)
Mecanismo general de la
transcipcion
  La RNA polimerasa requiere un
DNA de doble cadena como molde. Sin
embargo durante la transcripción de un
gen en particular, sólo una de las
hebras del DNA llamada hebra anti-
sentido o hebra molde (antisense
strand) , es copiada a RNA. La hebra
de DNA complementaria a la molde se
le llama hebra con-sentido (sense
strand).
Convenciones para describir
las hebras
 sentido/antisentido
 +/-
 No transcrita/transcrita
 No molde/molde
 codificadora/molde
Ambas hebras codifican genes
PROMOTORES
 La síntesis del RNA se inicia en un
promotor PROMOTORES.
 Un promotor es una secuencia de DNA
a la cual la RNA polimerasa se une, para
posteriormente iniciar la transcripción.
Identificación de regiones
promotoras
Identificación de regiones
promotoras
Secuencias de consenso
 Reveladas por la comparación de las
secuencias de muchos promotores
bacterianos.
 Están localizadas aproximadamente 10
y 35 pares de bases cuesta arriba del
punto de iniciación
Secuencias de consenso
 Exhiben homología.
 La secuencia de consenso -10 es:
TATAAT (caja TATA).
 La secuencia de consenso -35 es:
TTGACA
Pasos de la Transcripción
 La RNA polimerasa se desliza a través
del DNA buscando promotores.
 Cuando encuentra un promotor migra a
la región -35, formando lo que se
conoce como "complejo cerrado".
Pasos II
 Luego el DNA es desenrollado en
aproximadamente 17 pares de bases
formando un "complejo abierto" que
empieza en la región -10, y que descubre la
hebra molde en el sitio de iniciación.
 Después de la iniciación la subunidad sigma
se disocia de la RNA polimerasa y la enzima
núcleo con el proceso de elongación de la
transcripción.
Elongación
 Subunidad sigma se separa.
 El RNA sintetizado forma un híbrido
transitorio de 12 bp. con el DNA.
 50 nucleótidos por seg.
 El DNA se enrolla detrás de la RNA
polimerasa y se desenrolla delante de
ella.
 No hay prueba de lectura.
Terminación
 1. Terminación independiente de
factor, que consiste en una secuencia de
nucleotidos que permite la formación de una
región apareada con forma de alfiler en el
mRNA seguida de un tramo de residuos de
uracilo (U).
 1. Terminación dependiente de
factor, requiere de un factor proteico. El sitio
de terminación llamado rut (el nombre viene
de rho utilization) , es reconocido por un
factor específico llamado rho.
Terminación independiente de
Factor
 Una región rica en AT en el DNA y de
GC en el RNA causa que se forme una
doble una estructura de alfiler “hairpin”
en el mRNA.
 Al hairpin le sigue una secuencia de U
(se une débilmente a las A del DNA).
 Produce un efecto de jale y el RNA se
disocia
Terminación dependiente de
factor
 Se requiere de un factor proteico
llamado Rho.
 No se necesita una estructura en
hairpin.
 Determina la terminación en los sitios
que no son reconocidos por la RNA
polimerasa.
 Rho reconoce los sitos de terminación
llamados rut ( rho utilization).
 Rho hidroliza ATP
Procesamiento de RNA en
procariontes
 El mRNA no sufre modificaciones
importantes.
 EL tRNA y el rRNA se generan por
ruptura específica y modificaciones del
RNA naciente.
 Nucleasas específicas cortan el RNA
naciente.
Procesamiento de RNA en
procariontes
 Algunos nucleótidos específicos pueden
ser añadidos en el extremo. (CCA en el
tRNA).
 Pueden ocurrir modificaciones
covalentes de las bases (metilación) y
de la ribosa.
 Modificaciones enzimáticas forman
bases inusuales en el RNA.
Transcrito de rRNA de E. coli
Inhibidores de la Transcripción
 La rifampicina y la actinomicina son
antibióticos que inhiben la transcripción.
 La rifampicina inhibe la iniciación bloqueando
la formación del primer enlace fosfodiester
(subunidad beta de la RNA pol).
 La actinomicina es un péptido que se une al
dsDNA y evita que se use como molde.
 Se intercala entre dos pares de bases GC
Transcripción en Eucariontes
 Los eucariontes tienen 3 tipos de RNA
polimerasa.
 Todas nucleares.
 La alfa-amanitina ,es una toxina
extraída de un hongo, se une a la RNA
polimersa e inhibe la elongación
Transcripción en eucariontes
 Esta compartemenlizada debido a la
presencia de la envoltura nuclear.
 El RNA naciente de eucariontes es
procesado para formar el RNA maduro.
RNA Polimerasa II
 Es más compleja que la RNA pol de E.
Coli.
 Consiste de 10 polipéptidos (10 –220
kD).
 RPB1, RPB2 y RPB3 son esenciales
equivalen a las subunidades beta, beta
prima y alfa respectivamente.
 RPB4 a la subunidad sigma
RNA Polimerasa II
 RPB5, RPB6 y RPB8 son componentes
esenciales de las 3 RNA polimerasas de
eucariontes.
RNA pol de Procariontes y Eucariontes.
Estructura conservada de las subunidades
grandes
Promotores de Eucariontes
 Tienen una caja TATA cerca al sitio de
inicio.
 Otros elementos adicionales de control
están localizados entre -40 y –110.
 Los promotores fuertes tienen:
 - caja CG
 - caja CAAT
Promotores: Porcariontes Vs
Eucariontes
Elementos de transcripción y del promotor para la RNA
polimerasa II

 Promotor : secuencia de DNA cuesta arribia del gen


 Determina el sitio de inicio (+1) para la transcripción
 Se localiza al lado del sitio de inicio (+1)
 Permite la transcripción basal (bajo nivel)
 Elemento de transcripción (secuencia de DNA que regula el
gen.
 Determina la frecuencia o eficiencia de la transcripción

Elementos de transcripción y del promotor para la RNA
polimerasa II

 Elemento de transcripción (secuencia de DNA que regula el gen.


 Determina la frecuencia o eficiencia de la transcripción
 Ubicado cuesta arriba, cuesta abajo o dentro de los genes.
 Puede estar muy cerca o miles de bases aparte del gen.
 Incluye:
 Intensificadores.- Aumentan la velocidad de transcripción
 Silenciadores: desminuyen la velocidad de transcripción
 Elementos de respuesta (secuencias blanco para moleculas señal.
 Los genes pueden tener muchos elementos de transcripción
Elementos de secuencia dentro de un gen típico de
Eucariontes

 Caja TATA (TATAAAA)


 Se ubica 25 a 30 pb cuesta arriba del sitio de inicio +1
 Determina el sitio exacto de incio (no en todos los promotores
 Une a la proteína a la proteína TBP (proteína que se une a la
caja TATA que es una subunidad de TFIID.
 Caja GC (CCGCCC) une Sp1 (factor específico 1)
 Caja CAAT (GGCCAATCT) une CTF (factor de transcripción de
la caja CAAT.
 Octamero (ATTTGCAT)
 Une OTF (Factor de transcripción octámero)
Promotores de Eucariontes
 Los genes constitutivos tienen
tendencia a tener cajas GC.
 Las cajas GC y CAAT son efectivas en
las hebras antisentido.
Elementos de transcripción y promotores de la
RNA polimerasa II
Complejo de Transcripción
 El ensamblaje de un complejo de
trascripción requiere de un grupo de
proteínas llamadas factores de
transcripción II (TFII):
 TFIID un complejo de 700 kD que tiene
a la TATA binding protein (TBP) de 30
kD que se une directamente a la caja
TATA.
 Factores asociados a TBP (TAFs) que se
unen a la TBP.
Complejo de Transcripción
 La unión del TBP induce una curvatura
de 90 grados en el DNA, quebrando el
DNA a ambos lados de la caja TATA y
desenrolla el DNA
 TFIIA, TFIIB, TFIIE, TFIIF, TFIIH, TFIIJ
se ensamblan junto con TFIID.
 Se requieren factores adicionales para
la síntesis de mRNA en “alto nivel
Formación del Complejo de Iniciación de
la transcripción (PIC) en Eucariontes en
genes que codifican para proteínas
 TFIID se une a la caja TATA
 TFIIB se une al complejo TFIID-TATA
 El complejo TFIID-TATA más TFIIB
reclutan a la RNA polimerasa II al
TFIIF, y forman el complejo mínimo de
iniciación de la transcripción.
 TFIIE and TFIIH se unen y forman el
complejo de iniciación de la
transcripción completo (PIC).
 El PIC solo permite niveles bajos de
transcripción.
 Los niveles elevados son inducidos por
los factores activadores que se unen a
las secuencias intensificadoras.
 La interacción entre el complejo factor
activador , enhancer y PIC estimulan la
transcripción.
Unión de los factores
generales de transcripción
Unión de la RNA polimerasa II
Unión de los fatores de
transcripción especializados
Formación de un complejo de
preiniciación estable
Iniciación de la transcripción.
TFIIH fosforila al CTD
Secuencias Intensificadoras
 El plegamiento del DNA permite que las
proteínas activadoras se unan a
secuencias intensificadoras (secuencias
que están localizadas lejos de los
promotores).
 Interactúan con TFIID y otras
proteínas TF y la RNA polimerasa II
Secuencias Intensificadoras
 No tienen actividad promotora.
 Pueden estar ubicadas cuesta arriba ,
cuesta abajo o dentro del transcrito.
 En cualquiera de las 2 hebras del DNA.
 Son específicos para cada tejido.
Transcripción Eucariontes
Procesamiento del pre-mRNA
 Incluye:
 Adición de una estructura cap en el
extremo 5’ terminal.
 Adición de una cola de poli A en el
extremo 3’terminal.
 Remoción de los intrones via “splicing”
Procesamiento del pre-mRNA
 El splicing es regulado durante el
desarrollo.
 Es posible general un gran repertorio de
proteína vía splicing.
CAPPING
 Solo al mRNA y algunos snRNA se les
agrega el cap.
 Protege al mRNA de las fosfatasas y
nucleasas y aumenta de esta manera la
traducción.
Adición de poli A
 El extremo 3’ terminal tiene de 50 a 250
residuos de adenina añadidos
enzimaticamente.
 La cola de poli A es importante para la
estabilidad del pre-mRNA.
 También juega un rol en la terninación
de la transcripción.
Pasos en la adición de poli A
 La transcripción del mRNA continua a través
de la secuencia consenso de poli (A), el sitio
de poli A y la región rica en GU.
 Una proteína llamada CPSF (factor específico
de ruptura y poliadenilación.
 Una proteína llamada CstF (factor que
estimula la ruptura) se une a la secuencia GU.
 CPSF and CstF se unen entre ellos y originan
la formación un loop en el RNA.
Pasos en la adición de poli A
 CFI y CFII se unen cerca del sitio de poli (A)
y el RNA es clivado.
 La enzima poli A polimerasa (PAP) se une a
CPSF y añade nucleótidos de adenina al
extremo 3’ del RNA, usando ATP como
sustrato.
 PABII (proteína II que se una a poli(A), se
une a la cola de poli A conforme se produce.
Adición de cola de Poli A
Edición del RNA en sistemas
Eucarióticos
 Edición por modificación enzimática de
la secuencia de bases.
 Las secuencias de CCA pueden ser
desaminadas a UAA.
 La presencia de la desaminasa es
variable en distintos tejidos y tipos
celulares.
 Puede ser regulada durante el
desarrollo.
Edición mediante Splicing
 Los intrones son removidos del mRNA
en secuencias que contiene sitios
específicos de ruptura y empalme
(splice sites).
 La secuencia de consenso para el splice
site 5´terminal es AG/GUAAGU ,
donde AG es la última base del exón.
Edición mediante Splicing
 La secuencia de consenso del sitio
3´terminal es (Py)nNCAG/G , n = 10
residuos de U o C.
 Despues del splicing la secuencia queda
como AG-G
Edición mediante Splicing
Spliceosomas
 El splicing es realizado por los snRNA en
los spliceosomas.
 Los spliceososmas consisten de:
 snRNPS ( partículas ribonucleoproteicas
pequeñas del núcleo). U1,U2,U4,U5,U6.
 Los precursores del mRNA.
SPLICEOSOMA: Ensamblaje
ordenado
Edición mediante Splicing
Spliceosomas
 U1 y U2 se unen a los sitios de splice
5´y 3respectivamente.
 U4,U5 y U6 ( un complejo pre-
ensamblado) se une a U1 y U2
formando el spliceosoma.
 Los snRNA alinean los sitios de splicing.
 La hidrólisis del ATP ( por las proteínas)
promueve la fusión de los pares de
bases antes del splicing.
Edición mediante Splicing
Spliceosomas
 U2 y U6 forman un centro catalítico
para remover la estructura “lazo”
(lariat).
Centro Caralítico del
Spliceosoma
Auto-splicing
 El RNA puede tener capacidad catalítica
de splicing en ausencia de proteínas
catalizadoras.
 Una guanosina (GTP;GDP o GMP) ataca
al RNA en el sitio de splicing 5´
 Corta el RNA y une la guanina al
extremo 5´del intron.
Auto-splicing
 El extremo 3´ OH generado en el exon
ubicado cuesta arriba, ataca al sitio de
splincing 3´del intron, uniendo los 2
exones y liberando el intron.
 Requiere la formación de estructuras
terciarias del RNA generadas por las
secuencias de bases del intron y exon.
Auto-splicing
 El splicing es bloqueado por agentes
denaturantes tales como la
dimetilformamida.
 La unión de G es saturable, lo que
implica la presencia de un sitio de unión
específico en el RNA plegado.
 El término “ribozimas” hace referencia
al RNA catalítico.
Auto-splicing
 Los estudios de ribozimas revelan la
formación de una estructura secundaria
llamada “cabeza de martillo” en los RNA
que se auto clivan.
 Presenta 3 dobles hélices, llamado
brazo 1, 2 y 3, que rodean una hebra
de RNA no apareada. El sitio catalítico
esta en la base del brazo 1.
Ribozima con cabeza de
martillo
Tipos de Splicing
 Grupo I: una unidad de G ataca el
extremo 5´del intron.
 Grupo II: Una base de A en el RNA
ataca el extremo 5´terminal del intron
de la misma cadena y el intron es
removido como una estructura lazo.
 Grupo III: splicing catalizado por el
spliceosoma.
Splicing Alternativo: Distintos mRNA
a partir del mismo pre-mRNA
TRADUCCIÓN O SÍNTESIS DE
PROTEÍNAS
INTRODUCCIÓN
 La célula necesita miles de proteínas diferentes en un
determinado momento.
 Las proteínas son sintetizadas de acuerdo a las
necesidades de la célula.
 Una vez sintetizadas son transportadas a un sitio
apropiado dentro de la célula.
 Son degradadas cuando ya no se necesitan.
 En las células eucarióticas intervienen más de 300
macromoléculas .
 Se utiliza casi un 90% de la energía celular para la
síntesis de polipéptidos.
Complejidad de la Traducción
en E. coli
 La maquinaria de la traducción
constitutye el 35% del peso seco de la
célula.
 20,000 ribosomas
 200,000 tRNAs
 100,000 proteínas y cofactores
INTRODUCCIÓN
 La traducción es la síntesis de proteínas
dirigida por RNA.
 Se requiere la participación de 3 clases
de RNA.
 El proceso que lleva a la capacidad de
formar un enlace peptídico es muy
complejo.
CÓDIGO GENÉTICO
 Es la relación que hay entre la
secuencia de bases en el DNA y la
secuencia de aminoácidos en las
proteínas.
 Fue descifrado en 1961.
 El código genético usa codones o
tripletes de nucleótidos, los cuales
corresponden a un aminoácido.
CARACTERÍSTICAS DEL
CÓDIGO GENÉTICO
 Un grupo de 3 bases codifican para un aminoácido.
Se le denomina codón.
 Tiene 64 tripletes o codones.
 61 de los 64 codifican para aminoácidos,
 UAA, UAG , UGA son señales de terminación.
 Es degenerado, varios codones pueden codificar para
un mismo aminoácido.
 No tiene comas, a un triplete le sigue otro.
 No se traslapa, es decir, el marco de lectura lo
establece el pirmer tRNA.
 Es casi universal para todos los organismos
RNA de transferencia (tRNA)
 Las proteínas son sintetizadas de
acuerdo al mensaje genético en forma
de secuencia de codones a lo largo del
mRNA-
 El tRNA es el interprete entre las 2
formas de información.
 El tRNA alinea los aminoácidos
apropiados para formar un nuevo
polipéptido.
RNA de transferencia (tRNA)
 Peso Molecular de 25 kD,
 73-93 ribonucleótidos
 7-15 bases son metiladas o modificadas
covalentemente por molécula.
RNA de transferencia (tRNA)
 Peso Molecular de 25 kD,
 73-93 ribonucleótidos
 7-15 bases son metiladas o modificadas
covalentemente por molécula.
tRNA: principales
caracteristicas
El tRNA tiene una estructura hélice A
compacta. Solo unas cuantas bases no
están apareadas
tRNA. Características
 Son específicos para un aminoácido en
particular.
 Un extremo de la molécula del tRNA se une a
un aminoácido específico.
 El otro extremo se une al codon del mRNA
mediante el apareamiento de bases con el
anticodon.
 El anticodon es un triplete de nucleótidos en
el tRNA que se aparea con un triplete de
codones complementarios (codon) en el
mRNA.
Reconocimiento codon-
anticodon:Apareamiento de bases
con balanceo
No se necesita 61 tRNAs. El
anticodon de algunos tRNAs pueden
leer 2 o 3 codones
Aminoacil tRNA sintetasas
 El enlace entre el tRNA y su
correspondiente aminoácido debe
ocurrir antes que el anticodon se
aparee con el codon complementario
del mRNA.
 Este proceso de la correcta unión del
tRNA con su aminoácido apropiado es
catalizado por la aminoacil-tRNA
sintetasa.
Aminoacil-tRNA sintetasa
 Es la enzima que cataliza la unión de un
aminoácido a su tRNA.
 Cada uno de los 20 aminoácidos tiene una
aminoacil tRNA específica.
 La unión del aminoácido se realiza en 2
pasos:
 Activación del aminoácido con ATP.
 Transferencia del aminoácido al tRNA.
Aminoacil-tRNA sintetasa
 Se forma un intermediario de aminoacil
adenilato (aminoacil AMP).
 Se usan 2 enlaces de alta energía
durante el proceso.
 Hay 2 clase de aminoacil tRNA
sintetasas
 Clase I (aminoácidos grandes 10)
 Clase II (aminoácidos pequeños 10)
Aa tRNA sintetasas:Reconocen 2
diferentes conformaciones de CCA
RIBOSOMAS
 Son las organelas que coordinan el
apareamiento de los anticodones del
tRNA con los codones del mRNA.
 Es un componente mayoritario en la
célula.
 Hay unos 20,000 ribosomas en la célula
bacteriana.
 Tiene el 10% de la proteína bacteriana.
 80% de la masa total del RNA celular.
ESTRUCTURA DE LOS
RIBOSOMAS
 Son partículas ribonucleoproteicas
grandes que contienen más RNA que
proteínas y que se disocian en 2
subnidades.
 Los ribosomas de eucariontes y de
procariontes difieren en tamaño y
estructura de las subunidades.
Ribosoma de E. coli
Estructura del Ribosoma
SITIOS FUNCIONALES DEL
RIBOSOMA
 1. El sitio de unión del mRNA, es una
hendidura localizada cerca de las
interfase de las dos subunidades
 El sitio A, por donde ingresan los
aminoacil tRNA trayendo el próximo
aminoácido a ser añadido y donde el
tRNA se aparea con el correspondiente
codon en el mRNA.
SITIOS
 El sitio P, donde se ubica el tRNA que tiene la
cadena polipeptídica en crecimiento.
 El sitio E o sitio de salida, a donde se mueve el
tRNA deacilado (descargado) después de
transferir el péptido en crecimiento al tRNA
ubicado en el sitio A.
 Un túnel para el polipéptido en crecimiento,
que oculta 40 aminoácidos de la proteína
dentro del ribosoma.
 Sitios de unión para los factores de iniciación,
elongación y terminación.
3 sitios de unión en la
subunidad 30S
Subunidad 50S: canal de salidad de la
proteína. Canal hidrofóbico de 100 A de
diámetro
Subunidad 50S: la Proteína en
crecimiento pasa a través del canal.
REGLAS BÁSICAS
 Dos reglas básicas:
 1. El mRNA es traducido en dirección
5´-- 3´.
 2. Las proteínas son sintetizadas a
partir del extremo N-terminal hacia el
extremo C-terminal.
SÍNTESIS DE PROTEÍNAS
ETAPAS
 Ocurre en 3 etapas: 1) iniciación, 2 )
elongación y 3) terminación.
 Todas las etapa requieren enzimas y
otros factores proteicos.
 La iniciación y elongación también
requieren energía suministrada por GTP.
INICIACIÓN
 Unión del met-tRNA iniciador colocado
sobre el codon de inicio en el sitio P.
 Unión de la subunidad 50S.
COMPONENTES DE LA
INICIACIÓN
 1. Las 2 subunidades ribosomales, 30S
y 50S.
 1 mRNA
 3 factores de iniciación: IF1, IF2(GTP)
IF3
 Un aminoacil-tRNA especial modificado.
fmet-tRNAf
tRNA iniciador: fmet-tRNAf
Complejo de Iniciación en Procariontes
ELONGACIÓN , PASOS
 1) Unión del nuevo aminoacil tRNA al
sitio A formando un complejo ternario.
EF-Tu:aa-tRNA:GTP
 2. Formación del enlace peptídico
 Es mediado por la peptidil transferasa.
 El sitio activo de la peptidil transferasa
es el rRNA 23 S
EF-Tu reparte los tRNAs al
ribosoma
Elongación: Formación del
enlace peptídico
50S Peptidil transferasa: una
ribozima
ELONGACIÓN , PASOS
 3. Translocación del ribosoma con la
participación del factor de elongación EF-G.
 El ribosoma se mueva a lo largo del mRNA en
dirección 5 -- 3 moviendo el peptidil tRNA
localizado en el sitio A al sitio P.
 Es necesaria la hidrólisis del GTP.
 Un nuevo codon se ubica en el sitio A.
 El tRNA deacilado se mueve al sitio E y es
liberado del ribosoma.
Translocación: Factor EF-G
La estructura de EF-G imita a la
estructura del complejo EF-Tu
TERMINACIÓN
 Ocurre cuando un codon de terminación se coloca en
el sitio A del ribosoma.
 No hay tRNA que reconozcan los codones de pare.
 Estos son reconocidos por los factores de liberación.
 RF1 reconoce los codones UAA y UAG.
 RF2 reconoce los codones UAA y UGA.
 RF3(GTP), estimula la unión de RF1 y RF2.
 Hidrólisis del peptidil tRNA.
Los RF también imitan al tRNA
TRADUCCION EN
EUCARIONTES
 Secuencia kozak, es una secuencia
corta de reconocimiento que facilita la
unión inicial del mRNA a la subunidad
menor del ribosoma de eucariontes
 GCCACC(ATG)
 ATG, codon de iniciación
TRADUCCION EUCARIONTES
 Usa los factores EF1a and EF1bg (análogos de
EF-Tu y EF-Ts de procariontes).
 eRF causa la terminación en eucariontes, usa
GTP
 eIFe evita la reasociación del ribosoma
cuando la síntesis ha concluido.
 La fosforilación del factor eIF2 regula la
iniciación
 La fosforilación desactiva la iniciación.
 La desfosforilación activa la iniciación.