ETAPAS DE MADUREZ CON EL ANTAGONISTA DEL ETILENO 1-METILCICLOPROPENO Abstracto Goldenberries(physalis peruviana l.) se cosecharon en cuatro etapas de madurez diferentes: verde inmaduro (IG), verde maduro (MG), amarillo (Y) y naranja (OR). La fruta se trató con 1-metilciclopropeno (1-MCP) a 25 ◦c durante 20 h y luego se mantuvo a 20 ◦c durante 8 días. 1-mcp gas las concentraciones usadas fueron 0, 0.5 o 5 µLL-1 La aplicación de 1-MCP retrasó la aparición del etileno climatérico en frutas IG y MG en una dosis dependiente , y disminuyó transitoriamente la producción de etileno en fruta Y y OR. La aplicación 1-MCP disminuyó transitoriamente la tasa de respiración en fruta MG y, en menor medida, en fruta IG e Y. Por el contrario, la fruta OR tratada con 1-MCP presentó mayores tasas de respiración que la fruta control durante todo el período experimental. La fruta tratada con 5 µL L-1, 1-MCP mostró niveles promedio de producción de CO2 de 6 días aproximadamente 41% más altos que los de fruta de control, con una tasa de respiración hasta 76% mayor el día 4.
El ángulo de matiz fue más alto en la etapa Y, tratadas con 1-mcp
en fruta de control durante 8 días, pero las diferencias entre fruta MG tratada y no tratada se registraron solo al final del experimento. Por el contrario, no se detectaron diferencias en frutas IG y OR.
La fruta tratada con 1-MCP no fue consistentemente más firme que
la fruta no tratada durante el almacenamiento. Además, 1-MCP no tuvo ningún efecto sobre los sólidos solubles o el contenido de ácido ascórbico. La aplicación 1-MCP no evitó la descomposición en la fruta pero redujo su incidencia. INTRODUCCIÓN Goldenberry (physalis peruviana l.), también llamada uchuva, es una planta perenne originaria de sudamérica tropical y ampliamente utilizado como parte de los remedios caseros para diversas enfermedades.
Los extractos de diferentes partes de la planta muestran
antihepatotóxico y antiinflamatorio, así como efectos antiproliferativos en células de hepatoma. Las frutas comestibles, teniendo un perfil volátil complejo y que contiene altos niveles de vitaminas A, B, C, 𝛽-caroteno, fósforo y el hierro, son bayas climatéricas encapsuladas en un cáliz inflado, parecido a una vejiga llamado 'linterna china'. A medida que el color de la fruta cambia de verde a naranja debido a la descomposición de la clorofila y el carotenoide (principalmente acumulación de β-caroteno), ocurre un ablandamiento progresivo y la relación de sólidos solubles / acidez titulable aumenta linealmente.
Esta fruta muestra un aumento conspicuo en la producción de etileno
asociado con la etapa de maduración climatérica. Los goldenberries varían ampliamente en la producción de etileno según el cultivar y la etapa de maduración. En frutas climatéricas, el etileno de cerca coordina una serie de eventos catabólicos y anabólicos durante la maduración resulta en una rápida perecebilidad. sin embargo, no hay información sobre los efectos de la aplicación de un etileno bloqueador de acción en la maduración de goldenberry .
1-metilciclopropeno (1-mcp) es un antagonista de etileno gaseoso
químicamente similar a las sustancias naturales que ocurren, inactiva el receptor de etileno en diferentes frutas y otros tejidos vegetales durante un número variable de días por exposición única a niveles de dosis relativamente muy bajos de esta olefina cíclica (sisler y serek, 1997; sisler, 2006). OBJETIVOS
El primer objetivo de este trabajo fue examinar el potencial de 1-
MCP para el control de la maduración en la fruta de oro.
El segundo objetivo era determinar si la respuesta de goldenberry
a 1-mcp varía según la etapa de madurez. 1. MATERIALES Y MÉTODOS Material vegetal La fruta de Aguaymanto se obtuvo de plantas cultivadas en el huerto de la Facultad de Agronomía de la Universidad de Buenos Aires. Las frutas se recogieron a mano el 15 de enero de 2007, aplicando los siguientes criterios de selección: Etapa IG: bayas verdes inmaduras, cáliz fresco Etapa MG: bayas maduras de color verde amarillento, de color verde a amarillo pálido. Etapa Y: bayas amarillas oscuras, el cáliz no completamente seco. Etapa O: baya madura naranja, marrón claro, seca y cáliz de papel. El cáliz inflado se separó de la fruta y se desechó. Las frutas se aleatorizaron para proporcionar tres unidades experimentales de 200 frutos por etapa de madurez Cada unidad de 200 frutas se colocó en un recipiente de plástico de 60L. Aplicación 1-MCP y Almacenamiento de fruta 1-MCP se aplicó el día de la cosecha. Las unidades experimentales se mantuvieron como controles no tratados o se trataron con 0,5 o 5LL-1 1-MCP (una unidad experimental por tratamiento). Se liberó 1-MCP de viales de prueba con tapa de 50 ml que contienen cantidades pesadas de polvo SmartFreshTM (0,14% de ingrediente activo; RohmandHass, Argentina) añadiendo agua caliente (40 ◦C) a través de un tabique. Cada vial se agitó con vórtice y se colocó en el recipiente de plástico. El vial se dejó sin vaciar siguiendo la posición de la tapa del recipiente en 10 s. La tapa de cada contenedor también se pegó con cinta adhesiva para asegurar un sello hermético. Se colocó una caja comercial de hidróxido de sodio en cada contenedor para reducir la acumulación de CO2. La concentración de 1-MCP se verificó mediante cromatografía de gases, usando iso-butileno como estándar La fruta de control se mantuvo en recipientes sellados de 60L que tenían agua, pero no 1-MCP. Después de 20 ha 25°C, los contenedores fueron ventilados. Las unidades experimentales se almacenaron en el aire a 20 °C y 90% de humedad relativa. Se seleccionaron tres grupos de 5 frutas al azar y se usaron para evaluar la firmeza, el color, el contenido de sólidos solubles Para cada tratamiento (0, 0.5 o 5LL-1 1-MCP), etapa (IG, MG, Y u OR), y período de maduración (0, 2, 4, 6 u 8d). Se usaron 3 grupos de 5 frutas por tratamiento y etapa para determinar la producción de etileno y la tasa de respiración a diario. La pérdida de fruta debido a la descomposición redujo el número de frutos. Por lo tanto, la fruta en descomposición se eliminó de los contenedores y se registró en cada tiempo de eliminación. Se distribuyó un envío de fruta adicional de 180 o OR en tres lotes de 60 frutas. Los lotes fueron tratados con 0, 0.5 o 5LL-1 1-MCP y la incidencia de decaimiento se evaluó después de 8d. Evaluación de calidad de fruta PRODUCCION DE ETILENO: se determinó colocando cinco recipientes de vidrio de color dorado y 1,5L que, a su vez, estaban firmemente sujetos al mar con un tabique de silicio. Se extrajo un mililitro del gas del espacio superior después de 30 minutos y se cuantificó el etileno en un cromatógrafo de gases Cromatógrafo de gases Las temperaturas del inyector, el horno y el detector fueron de Hewlett Packard 110, 90 y 250 ◦C, respectivamente. Se usó N2 como gas portador a un caudal de 0,37 mLs-1 (velocidad del gas lineal = 4,5 cms-1). Los resultados se expresaron como nanogramos de etileno producido por kilogramo de fruta en 1s. FIRMEZA DE LA FRUTA: se midió usando una máquina de ensayo universal Instron (Modelo 3342, Canton, MA, EE. UU.) Equipada con una placa plana. Cada fruta se comprimió 2 mm a una velocidad de 0,1 mm-1. Instron (Modelo 3342) Omnimixer
CONCENTRACION DE SOLIDOS SOLUBLES: Bayas de Aguaymanto se
presionaron a través de estopilla. El jugo de cinco bayas se combinó y se analizó para determinar la concentración de sólidos solubles (SSC).
DETERMINACION DE ACIDO ASCORBICO: Se molieron 2,5 g de fruta
con 10 ml de HCl al 2% (p/v) El extracto se centrifugó inmediatamente a 10000 xg a 4 ◦C durante 10 minutos. Se filtraron alícuotas del sobrenadante a través de una membrana de celulosa y se usaron para la determinación. Metanol: agua (30:70, K2HPO4 0,01 M, pH 4,30) se usó isocráticamente como fase móvil a un flujo de 8,3Ls-1 y la detección se realizó espectrofotométricamente. Los resultados se expresaron como masa de ácido ascórbico por masa de fruta fresca en peso, mgkg-1. Se evaluaron tres réplicas independientes por etapa, tratamiento y fecha.
Hewlett Packard Series 1100 HPLC
Análisis estadístico
Los experimentos se realizaron según un diseño
factorial. Los datos se analizaron por medio de un ANOVA de un factor, utilizando el paquete de software pc-sas (SAS Institute INC). En el caso de un valor F significativo, los datos se sometieron a la prueba de Tukey (p <0.05) para la comparación de tratamientos dentro de cada fecha. RESULTADOS Y DISCUSIÓN Producción de etileno y tasa de respiración Tabla 1: Indicadores de diferentes etapas de la La biosíntesis de etileno fruta al comienzo del experimento (media ± S.E. puede clasificarse como n= 3, cada réplica que contiene cinco frutas) extremadamente alta. Sin embargo, la biosíntesis de Etapa Masa Masa de una Diámetro Producción Ángulo de de una fruta fruta (g) (mm) de etileno tonalidad etileno puede depender del (g) (ng kg-1 s-1) (h◦) tiempo de cosecha: la producción de etileno de IG 1.13 ± 0.10 12.90 ± 0.37 3.77 ± 1.32 110.45 ± 1.28 aguaymanto alcanzó niveles más altos cuando se cosecha en verano (este experimento) MG 1.63 ± 0.10 14.44 ± 0.37 31.25 ± 20.14 103.46 ± 1.97 que en otoño. Esto puede ser Y 2.47 ± 0.31 16.43 ± 0.72 199.43 ± 87.58 ± 1.22 atribuible a la variación en las 15.24 condiciones de temperatura ambiente durante la OR 3.04 ± 0.21 17.65 ± 0.28 346.14 ± 9.72 81.19 ± 1.73 maduración. Fig. 1. Producción de control de etileno y fruta tratada con 1-MCP. El aguaymanto se cosecharo en cuatro etapas de madurez diferentes: (a) verde inmaduro, (b) verde maduro, (c) amarillo, y (d) naranja, expuesto o no a 1-MCP y almacenado a 20 ◦C durante 8 d. Los números en la leyenda indican la concentración (L L-1) de 1-MCP utilizada en cada tratamiento. Los valores representan la media ± S.E. La letra "a" indica una diferencia significativa entre T0 y T5 en una sola fecha; la letra "b" indica una diferencia significativa entre T0 y T0.5, y entre T0 y T5 dentro de una sola fecha; letra "c" indica una diferencia significativa entre T0 y T5 y entre T0.5 y T5 en una sola fecha (P <0.05). Fig. 2. Tasa de control de la respiración y fruta tratada con 1- MCP. Los aguaymantos se cosecharon en cuatro etapas de madurez diferentes: (a) verde inmaduro, (b) verde maduro, (c) amarillo, y (d) naranja, expuesto o no a 1-MCP y almacenado a 20 ◦ C por 8 d. Los números en la leyenda indican la concentración (uLL -1) de 1-MCP utilizado en cada tratamiento. Los valores representan la media ± S.E. Donde no se muestran las barras, el S.E. no excede el tamaño del símbolo. La letra "a" indica una diferencia significativa entre T0 y T5 en una sola fecha; la letra "b" indica una diferencia significativa entre T0 y T0.5, y entre T0 y T5 dentro de una única fecha (P <0.05). Color, firmeza y decaimiento Fig. 3. Ángulo de control del tono y fruta tratada con 1-MCP. Los aguaymantos se cosecharon en cuatro etapas de madurez diferentes: (a) verde inmaduro, (b) verde maduro, (c) amarillo, y (d) naranja, expuesta o no a 1-MCP y almacenada a 20 ◦ C por 8 d. Los números en la leyenda indican la concentración (uLL -1) de 1-MCP utilizado en cada tratamiento. Los valores representan la media ± S.E. La letra "a" indica una diferencia significativa entre T0 y T5 en una sola fecha; la letra "b" indica una diferencia significativa entre T0 y T0.5, y entre T0 y T5 dentro de una sola fecha (P <0.05). Fig. 4. Firmeza de control y fruta tratada con 1-MCP. Los aguaymantos se cosecharon en cuatro etapas de madurez diferentes: (a) verde inmaduro, (b) verde maduro, (c) amarillo, y (d) naranja, expuesta o no a 1-MCP y almacenada a 20 ◦ C por 8 d. Los números en la leyenda indican la concentración (u LL -1 ) de 1-MCP utilizado en cada tratamiento. Los valores representan la media ± S.E. En todos los casos, las diferencias entre los tratamientos dentro de una sola fecha no fueron significativas (P <0.05). Contenido de sólidos solubles y ácido ascórbico Fig. 5. Concentración de sólidos solubles (a) y contenido de ácido ascórbico (b) en fruta control y fruta tratada con 1-MCP. Los aguaymantos se cosecharon a cuatro diferentes etapas de madurez (verde inmaduro, verde maduro, amarillo y naranja), expuestas o no a 1-MCP y almacenado a 20 ◦C durante 8 días. Los números en la leyenda indican la concentración (LL-1) de 1-MCP utilizado en cada tratamiento. Los valores representan el media ± S.E. Los valores en el día 0 fueron los mismos para todos los tratamientos. El contenido de Solidos Solubles aumentó significativamente en todos los tratamientos entre los días 0 y 8, pero no se detectaron diferencias entre tratamientos dentro de una única fecha (P <0.05). 1-MCP no afectó significativamente el contenido de ácido ascórbico en ninguna etapa. CONCLUSIONES El aumento de etileno climatérico en bayas de Aguaymanto MG es detenido por 1-MCP lo que sugiere que la producción de etileno durante la maduración de estas bayas es autocatalítica.
Algunos de los cambios bioquímicos asociados con la
maduración de las bayas de Aguaymanto (es decir, el cambio de color) son parcialmente dependientes de los receptores de etileno en funcionamiento.
El efecto del bloqueo del receptor de etileno depende en gran
medida de la etapa de la fruta: las bayas OR muestran menos capacidad de respuesta a 1-MCP que las bayas MG o Y. El Aguaymanto no es altamente sensible a dosis relativamente bajas (0.5LL-1) de 1-MCP y puede ser necesaria una calibración de dosis adicional en futuros experimentos; además, las dosis utilizadas podrían ser parcialmente responsables del retraso relativamente leve del ablandamiento de la fruta
La fruta tratada con 1-MCP reanudó la maduración, y algunos
atributos relacionados con el sabor (SSC) y la calidad nutricional (contenido de ácido ascórbico) no se vieron afectados por la aplicación de 1-MCP.
Además, las bayas MG adheridas a la planta aumentan su peso
fresco en un 86% hacia la etapa OR y, en consecuencia, el desprendimiento prematuro de la fruta no parece ser una opción práctica. GRACIAS