RESULTADOS Y DISCUSIÓN

Los valores del % de C y del coeficiente óptico E4/E6 de las sustancias húmicas obtenidas aparecen en la Tabla 1. El
valor de %C para el AH obtenido a partir de vermicompost es ligeramente superior a los reportados por la IHHS
(2008). Se nota el aumento significativo de AH-Ac y AH-Met en cuanto al % de C, debido a una adecuada eficiencia
en la esterificación y metilación de los grupos OH; también el bloqueo con cloruro de tionilo con respecto al
anhidrido tiende a ocurrir sobre un mayor número de grupos OH. En el caso del derivado amoniacal, el % C es
similar al AH. Los derivatizados poseen valores de la relación E4/E6 inferiores al AH de origen y por tanto existe un
mayor grado de complejidad y de condensación, siendo el AH-NH3 el menos condensado de todos.

Los procesos de acetilación, metilación y amonificación de los AH provocan una disminución de sus propiedades
ácidas al AH de origen, resultados que se presentan en la Tabla 2. El AH-NH3 fue el que más contribuyó a la
disminución de la acidez total, el AH-Met tuvo una mayor interacción con los grupos -OH de ácidos carboxílicos,
MÉTODOS dando los menores valores de acidez de este grupo funcional.

Se sigue la metodología propuesta por IHHS (2008) con

NaOH (o,1 mol/g)
• Proporción 1:10 (m de vermicompost : v disolución)
• Agitación: 8 horas
Extracción y Los ácidos húmicos (AH) siguen el siguiente proceso:
purificación de 1. Precipitación con la adición de HCl (0,01 mol/l) En la Figura 1 se muestran los espectros DRIFT obtenidos de las sustancias húmicas estudiadas. Tomando en cuenta
ácido húmicos 2. Centrifugación
las reacciones implicadas reportadas en la literatura especializada y los trabajos presentados por Chen et al. (2008);
Dobbss et al. (2009); Spaccini y Piccolo (2009) y Calderin et al. (2012).
3. Purificación con HCl:HF:H2O en proporción 1:1:98 En el espectro del AH aparece una banda fuerte y ancha en la zona de 3400 cm-1 asignada a -OH de ácidos
(v:v:v) carboxílicos, alcoholes y fenoles, la que se encuentra ligeramente desplazada en los espectros de los AH
derivatizados.
Además, la intensidad de la banda disminuye, lo que corresponde a los resultados de acidez (Tabla 2). Para el AH-
Los AH se modificaron estructuralmente con anhídrido NH3 hay una segunda banda (323,31 cm-1) atribuible a la vibración –NH de amidas, lo que indica la interacción del
acético y cloruro de tionilo mediante técnicas descritas NH4OH con los ácidos carboxílicos del AH, para la formación de amidas. Otras bandas están sobre los 1730 y 1650
por Andjelkovic et al. (2006), obteniendo: cm-1 atribuibles a la vibración C=O de ácidos, esteres, éteres, amidas y quinonas. En el espectro AH-Ac la banda en
• AH acetilado (AH-Ac) 1730 cm-1 de esteres es más intensa, mientras que en el espectro AH-NH3 la banda es más intensa alrededor de
Derivatización • AH metilado (AH-Met) los 1600 cm-1 atribuible a C=O de amidas.
de los AH Para el derivado amoniacal se empleo:
• 30 mL de NH4OH (7,5 %)
• 500 mg de AH en un equipo de reflujo y agitador
magnético a 450 C por espacio de 1 hora.

Se determino el %C por el método de Tyurin y el

coeficiente óptico E4/E6 (con valores de absorbancia
Caracterización de 465 y 665 nm) Los valores de índice de Condensación (IC) presentados en la Tabla 3 indican que los AH derivatizados tienen un
Se calculo la acidez total de los grupos –COOH y –OH menor grado de condensación que el AH de origen según la estimación realizada por la expresión de Freixo et al.
de los AH y mediante el procedimiento de Canellas et al. (2008). (2002).
derivados Se utilizo Espectroscopia Infrarrojo de Reflactancia Difusa Los valores del índice de hidrofobicidad (IH) de estas sustancias poseen similar comportamiento frente a los
con Transformada de Fourrier (DRIFT), para caracterizar agentes derivatizantes, es decir, el IH aumenta en todos los derivatizados.
los grupos presentes en los AH.
Se utilizo un equipo PE Spectrum-One, en un intervalo de
frecuencia de 700-4000 cm-1 con resolución de 4 cm-1.

Índices de Se determino los índices de hidrofobicidad (IH) y de

condensación (IC) de los AHs según Freixo et al. (2002);
Hidrofobicidad y basándose en las relaciones entre las absorbancias En la Figura 2 se muestran los resultados del Biotest de Ácido Indol Acético (AIA) evaluándose el incremento de la
de Condensación referidas:
longitud de la radícula de semillas de maíz. Los AHs derivatizados propiciaron unabioestimulación del crecimiento
del órgano con respecto al control (sin AIA) (Figura 3) una actividad fitohormonal equivalente de AIA superior.
2929 𝑐𝑚−1 2929 𝑐𝑚−1
𝐼𝐻 = 𝐼𝑐 =
1050 𝑐𝑚−1 1050 𝑐𝑚−1

Se utilizó el “Biotest” para la fitohormona Ácido Indol

Ácetico (AIA) (Ortega y Rodés, 1986) utilizando semillas
Actividad de maíz (Zea mays; var: 7928).
Biológica Se utilizo una curva patrón de AIA con respecto a la
longitud de la raíz.
Se realizo un ANOVA simple y la comparación de
medias por el Test de Tukey con un percentil de 0.05 . Estos resultados indican que las modificaciones estructurales producidas en el AH no conllevaron a la pérdida de su
bioactividad, y no depende totalmente ni de la acidez ni del grado de hidrofobicidad de los AH, de esta forma para
el AH acetilado y el AH-NH3con bajos valores de acidez y mayor hidrofobicidad la bioestimulación del crecimiento
fue superior. Resultados semejantes por otro método ha sido reportado por Canellas et al. (2010) utilizando seis
fracciones de diferente masa molecular de AH extraídos de vermicompost.